尿游离皮质醇萃取方法的改良及其检测相关影响因素的分析

目的:改良24 h尿游离皮质醇(urinary free cortisol,UFC)的萃取方法,分析标本留置时间、蛋白尿及潜血尿对结果的影响。方法:取2019年12月—2020年12月天津医科大学总医院检验科的23例不同结果的24 hUFC标本,其中8例低值、8例中值、7例高值。采用二甲氯烷萃取-化学发光法检测UFC。在萃取步骤中用恒速回旋振荡(改良法)替代触碰式涡旋振荡(原方法);改良后设置不同标本留置时间,配制蛋白及潜血尿,检测UFC,分析这些干扰因素对检测的影响。结果:改良法与原方法对比,效率更高且萃取成功率提升至100%,两种方法检测结果无差异(P>0.05)且相关系数R2=0.9989,改良法能提升检测精密度[变异系数(CV)<25%]与准确度(>80%);与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)相比差异无统计学意义(P>0.05),相关系数R^(2)=0.9922。尿标本不同留置时间对结果影响差异无统计学意义(P>0.05),尿蛋白及潜血干扰实验的平均回收率分别为95.85%及89.85%,但尿血红蛋白(Hb)达4 mg/L时会导致UFC检测误差大于该项目的实验允许总误差(TEA,25%)。结论:恒速回旋振荡萃取可替代触碰式涡旋振荡萃取法,可提高工作效率且不影响检测结果。标本留置时间、蛋白尿对检测结果影响不大,但尿潜血会使检测值偏低。