类风湿性关节炎患者2H4^+T淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析

目的：了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化，探讨其发病机制。方法：使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１１例ＲＡ患者和１２例健康人的外周血Ｔ淋巴细胞进行了研究。结果：ＲＡ患者与对照组比较ＣＤ３＋Ｔ细胞和ＣＤ４＋Ｔ细胞无明显变化，ＣＤ８＋Ｔ细胞明显减少，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值增加。ＣＤ４＋２Ｈ４＋Ｔ细胞在ＣＤ４＋Ｔ细胞中的比例减少，而ＣＤ４＋４Ｂ４＋Ｔ细胞的比例增加。进一步研究发现，ＲＡ患者活化的ＣＤ２５＋Ｔ淋巴细胞比率增加。此外，血清学研究发现，ＲＡ患者ＩｇＧ含量显著增加，ＩｇＭ和ＩｇＡ含量与正常组比较无明显差别。结论：ＲＡ患者存在细胞免疫和体液免疫的功能紊乱，而大量自身免疫球蛋白的产生可能是辅助性Ｔ淋巴细胞升高，抑制性Ｔ淋巴细胞减少以及活化Ｔ淋巴细胞增加的结果，因此，Ｔ淋巴细胞亚群比例失衡在ＲＡ的发病中可能起着更为重要的作用。

强直性脊椎炎的临床与HLA-B27分析

目的：了解本地区强直性脊椎炎的临床特征及其与ＨＬＡＢ２７的相关性。方法：用微量淋巴细胞毒试验对２４５例强直性脊椎炎患者进行ＨＬＡＢ２７抗原检测。结果：ＨＬＡＢ２７抗原阳性２２０例，阳性率９０％，抗原阳性组男女之比为２５∶１，抗原阴性组为３１∶１，两组间无明显差异，本病发病年龄大多在３０岁以内，占６５％。平均病程４５年。患者初发症状以腰痛为主，周围关节以髋膝关节受累居多。患者均有骶髂关节炎症改变，多为骶髂关节模糊、狭窄。脊椎异常主要表现为脊椎小关节模糊、椎间韧带钙化、椎骨质增生。结论：对长期不明原因的腰腿痛患者及早检测ＨＬＡＢ２７抗原对强直性脊椎炎的诊断有很大帮助。

类风湿性关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群分析

目的了解类风湿性关节炎患者外周血淋巴细胞亚群的分布特征，以探讨其发病机制。方法使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１９例类风湿性关节炎患者和１６例健康对照的外周血淋巴细胞进行研究。结果类风湿性关节炎患者与对照组比较ＣＤ３＋Ｔ细胞和ＣＤ４＋Ｔ细胞无明显变化，ＣＤ８＋Ｔ细胞明显减少，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ比值增加。ＣＤ４＋２Ｈ４＋Ｔ细胞在ＣＤ４＋Ｔ细胞中所占比例减少，而ＣＤ４＋４Ｂ４＋Ｔ细胞所占比例增加。进一步研究发现，类风性性关节炎患者活化的ＣＤ２５＋Ｔ淋巴细胞增加；ＩｇＧ含量显著增加，ＩｇＭ和ＩｇＡ与正常组比较无明显差别。结论类风湿性关节炎患者存在细胞免疫和体液免疫的功能紊乱，而大量自身免疫球蛋白的产生可能是辅助Ｔ淋巴细胞升高，抑制性Ｔ淋巴细胞减少以及活化Ｔ淋巴细胞增加的结果，因此。

雷公藤总甙细胞毒性作用的流式细胞仪分析

利用流式细胞仪技术对雷公藤总甙（ＴⅡ）的细胞毒性作用做了进一步分析。结果表明：ＴⅡ对Ｔ淋巴细胞有直接的细胞毒作用。这种作用随ＴⅡ剂量增加而增强，亦与细胞的状态有关。ＴⅡ对静止期Ｔ细胞的毒性最强，对正在活化中的Ｔ细胞次之，而对活化后的Ｔ细胞毒性最弱，提示活化的Ｔ细胞比静止期Ｔ细胞对ＴⅡ的毒性有较大的耐受力。这从一个侧面说明ＴⅡ的临床用药剂量不宜过大，以免引起严重的白细胞减少症。

地高辛标记人IL-2 cDNA探针的制备及临床初步应用

目的：制备IL-2地高辛标记探针，探讨类风湿性关节炎（rheumatoidarthritis，RA）患者外周血淋巴细胞IL－2mRNA的表达情况。方法：采用斑点杂交技术，对6例正常对照和12例RA患者进行研究。结果：①从pUC12质粒中扩增制备了长度为1kb的IL-2cDNA片段，用地高辛标记后制备成探针。其敏感性达1pg同源DNA，且特异性较高。②12例RA患者外周血淋巴细胞IL-2mRNA表达的相对光密度值为0．72+0.14（IL－2／β－actin），而6例健康对照组IL-2mRNA表达的相对光密度值为0．26+0．17（IL-2／β-actin），两组相比差异显著（P＜0．01）。结论：RA患者IL-2基因的表达水平存在一定程度的失调；IL-2mRNA表达的检测，对探讨RA的发病机制，以及对RA患者的诊断有一定的帮助。

雷公藤总甙对人T淋巴细胞的影响

本文利用流式细胞仪研究了雷公藤总甙对人Ｔ细胞亚群及对ＩＬ－２产生和ＩＬ－２ＲＴａｃ链表达的影响。结果证实Ｔ＿Ⅱ可明显抑制ＰＨＡ刺激的Ｔ细胞ＩＬ－２ＲＴａｃ链表达，抑制ＩＬ－２产生，且均有剂量依赖关系。Ｔ＿Ⅱ对Ｔ细胞亚群中ＣＤ细胞和ＣＤ细胞从Ｇ＿０／Ｇ＿１期到Ｓ＋Ｇ＿２／Ｍ期均有明显的抑制作用。但两者受抑制的程度不同，其中对ＣＤＴ细胞的抑制作用更强。提示雷公藤总甙治疗自身免疫病的机制之一可能与其抑制ＩＬ－２自泌环路，降低体内活化的Ｔ细胞数量，调整Ｔ细胞亚群比例，从而恢复异常的免疫状态有关。

鲁西南地区强直性脊椎炎HLA—B27抗原相关性研究

为了解鲁西南地区强直性脊椎炎（ａｎｋｙｌｏｓｉｎｇ ｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓ，ＡＳ）与ＨＬＡ－Ｂ２７抗原的相关性，对６５５例腰腿痛病人和１００例健康人进行了ＨＬＡ－Ｂ２７抗原检测。结果显示，确诊的３３８例ＡＳ中，ＨＬＡ－Ｂ２７抗原阳性率８９．０％，健康对照组ＨＬＡ－Ｂ２７抗原阳性率７％，其它腰腿痛病人Ｂ２７抗原阳性率８．３％．ＡＳ组与健康对照组相比差异非常显著（Ｐ〈０．０１）。遗传学分析表明。

抗HLA-B27单克隆抗体的制备鉴定及初步应用

目的 制备HLA -B2 7单克隆抗体。方法 用HLA -B2 7抗原免疫小鼠 ,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞 ,用ELISA法筛选分泌该单抗的细胞株。结果 建立了分泌该单抗的细胞系 3B3和 4F2 ,抗体均为IgG2b ,3B3细胞分泌的单抗只与B2 7反应 ,而 4F2细胞分泌的单抗与B7有交叉反应。 结论 建立了高特异性分泌抗B2 7单抗的细胞株 。

一株甲醇降解菌Methylobacterium sp.SDM11的筛选鉴定及生长条件优化

从活性污泥中筛选到一株可利用甲醇为唯一碳源和能源生长的细菌SDM11,该菌革兰氏染色阴性,短杆状。经16S rDNA序列比对分析发现,与Methylobacterium sp.的部分16S rDNA同源性达98%。结合其形态特征和生理生化特性,该菌被初步鉴定为甲基营养菌属。在培养温度为30℃、甲醇含量为0.6%、pH值为7.0的最适生长条件下,菌体对甲醇的降解率可达82.5%。

原发性肝癌肝型碱性磷酸酶凝集素亲和层析测定及临床意义

目的研究血清肝型碱性磷酸酶 (L - AL P)凝集素亲和层析用于原发性肝癌诊断的价值。方法用麦胚凝集素(WGA)分离血清骨型碱性磷酸酶 (B- AL P)和 L - AL P,再将 L - AL P进行蔓陀萝凝集素 (DSA)亲和层析 ,分离不同亲和力组分。结果正常人血清 L - AL P不与 DSA结合 ,在慢性肝炎及肝硬化患者血清中分离到 DSA弱结合组分 ,原发性肝癌患者血清出现了特有的 DSA强结合组分 ,6 4例原发性肝癌血清中阳性率为 92 .19% ,其中 14例原发性小肝癌 (癌结节小于 5 cm )有 78.5 7%的阳性率。结论 L - AL P的 DSA强结合组分为原发性肝癌特异性标志 ,L - AL

玉米穗多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖的防治作用

玉米穗中提取的玉米穗多糖精品对四氧嘧啶引起的糖尿病小鼠有预防作用，并且用该品１００ｍｇ／ｋｇ和４００ｍｇ／ｋｇ给正常及糖尿病小鼠灌胃时，均可导致血糖下降，正常小鼠最多可降低４６．３％，而糖尿病小鼠最多可降低５４．１％。

类风湿性关节炎患者血清NO和TNF-α水平的变化

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者血清中NO和TNF-α水平与疾病活动的关系。方法用硝酸还原酶法测每个样本中NO水平,用双抗体夹心ELISA方法测TNF-α水平。结果33例活动期RA患者血清NO和TNF-α均显著高于22例非活动期RA患者和30例健康对照组(P<0.01),而非活动期RA患者血清NO和TNF-α水平亦高于健康对照组(P<0.05)。而且,RA患者血清NO水平与TNF-α高度相关。结论RA患者内源性NO水平升高反映了这类病人免疫调节功能的紊乱。同时亦表明RA患者血清NO和TNF-α水平显著增高可以作为判定RA活动的重要参考指标。

生物化学教学的重要性及改革探讨

生物化学是生命科学的重要基础学科。通过对济宁医学院2005年级各专业的学生的问卷调查结果显示,学生对生物化学的学习兴趣及成绩优劣与医学生成才的自信心建立之间有密切关系,所以提高生物化学教学效果具有重要意义。笔者受基于问题式学习(problem-based learning,PBL)理念的启发,对教学方法进行改进,以学生为本,增加与临床知识和生命科学最新进展的相互渗透,由临床问题或前沿技术引出要学习掌握的基础知识,对基础理论知识进行精辟的讲解,鼓励学生查找资料。通过尝试这一教学方法后,学生对于生物化学的学习兴趣和学习效果都有了提高。

132例强直性脊椎炎临床分析

本文对１３２例强直性脊柱（ＡＳ）的临床表现及其与ＨＬＡ－Ｂ２７抗原的相关性进行了分析。结果表明，ＨＬＡ－Ｂ２７抗原阳性１２１例，阳性率９１％。抗原阳性组男女之比为３：１，抗原有性组为２．６：１，两组间无明显差异。脊柱异常主要表现为椎小关节模糊、狭窄。脊柱异常主要表现为椎小关节模糊、椎骨质增生。本文结果提示对长期不明原因的腰腿痛患者及早检测ＨＩＡ－Ｂ２７抗原对临床确诊ＡＳ有很大帮助。

对年轻细胞诱导早衰前后凋亡敏感性的研究

目的 探讨年轻细胞被诱导衰老后对凋亡的敏感性与年轻细胞的差异 ,并分析可能存在的机制。方法 以人胚肺二倍体成纤维细胞 (2BS)为研究对象 ,以H2 O2 诱导 2BS细胞早衰后 ,再以H2 O2 分别诱导早衰 2BS细胞和年轻细胞凋亡 ,DNAladder分析和苔盼蓝排除法检测细胞死亡率。结果 早衰细胞较年轻细胞不易被H2 O2 诱导凋亡。该因素是多方面的 ,不限于caspase - 3的作用。 结论 早衰细胞与衰老细胞一样 。

血浆心钠素水平的升高与阻塞性黄疸关系的研究

目的探讨血浆心钠素在阻塞性黄疸患者并发急性肾功能衰竭中的作用和意义。方法检测了２３例阻塞性黄疸患者术前及术后第２、５、１０、１５ｄ血浆心钠素水平，同时观察其肾功能变化。结果术前血浆心钠素水平黄疸组较对照组明显增高，内生肌酐清除率明显降低。术后内生肌酐清除率随血浆心钠素下降而呈上升趋势。１０ｄ恢复正常。结论阻塞性黄疸患者血浆心钠素水平升高可能是其并发肾功能受损的一个重要原因。

靶向Bcl-xl低结合自由能区域的反义核酸抑瘤效果的研究

目的:观察结合于Bcl-xl mRNA上低结合自由能区域的反义寡核苷酸对Bcl-xl基因的抑制效应。方法:利用软件分析Bcl-xl mRNA上的低结合自由能区域,并针对这一区域合成反义寡核苷酸As587;转染高表达Bcl-xl的人乳腺癌细胞系MCF-7;实验分空白对照组、反义组(As587组)和错义组(Sc587组),转染后检测各组细胞的增殖、Bcl-xl基因及蛋白表达有无变化。结果:As587组与Sc587组相比,转染72h后细胞抑制率差异有统计学意义,P<0.01;凝胶电泳分析Bcl-xl/β-actin比值分别为0.39和0.79,P<0.05;Bcl-xl蛋白水平亦明显下降,P<0.01。结论:计算机软件辅助设计反义寡核苷酸是一种可靠的方法,以此方法设计的反义核酸As587在体外能抑制Bcl-xl基因的表达。

Rho GTP酶在肿瘤发生发展中的作用

Rho GTP酶属于Ras超家族的成员,在细胞中具有控制细胞形态、调控细胞增殖、黏附、迁移和膜运输等许多重要作用。近几年的研究表明,许多肿瘤(如乳腺癌、胃癌、肺癌、前列腺癌等)组织中的Rho GTP酶表达异常,此外,Rho GTP酶与恶性肿瘤的生长、转化、转移和凋亡也密切相关。对Rho GTP酶的研究不仅有利于深入了解肿瘤的发病机制,而且有利于开发抗肿瘤的靶向药物。

提取人外周血淋巴细胞总RNA三种方法的比较

本文报道用ＧＩＴ／ＣｓＣｌ超离心法、胍热酚法和一步法三种方法从人外周血单个核细胞提取总ＲＮＡ，并对所得ＲＮＡ的完整性、纯度和含量进行比较。结果表明，三种方法均可获得完好的ＲＮＡ。但其纯度和含量随方法不同而有所差别。其中ＧＩＴ／ＣｓＣｌ超离心法所提ＲＮＡ纯度最高，适合于构建ＣＤＮＡ文库。一步法所提ＲＮＡ含量最高，可用于ＲＮＡ的进一步分析。而热酚法所得ＲＮＡ纯度和含量均较差，故认为用一步法提取细胞总ＲＮＡ是一种简便、快速、有效的方法。值得推广应用。