中药通过调控不同信号通路治疗糖尿病肾脏疾病机制研究进展

糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病引起的慢性微血管病变之一,多发于糖尿病患者,以大量蛋白尿、高血压、水肿等为主要临床表现,其中30%~40%的患者会进展至终末期肾病。中药在改善肾脏疾病的临床症状、保护肾功能等方面优势明显,通过总结近年来中药对核因子κB(NF-κB)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、酪氨酸激酶/信号转导与转录激活因子(JAK/STAT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转化生长因子-β/Smad(TGF-β/Smad)等信号通路的调控,以期阐明中药治疗DKD的作用机制,为中药治疗DKD提供更多理论支持。但是,当前中药治疗DKD的分子作用机制仅局限于动物或细胞水平的研究,缺乏临床实践研究,未来需要进一步紧密结合临床,注重成果转化,使中药防治DKD体系更为完善。

中药左金丸逆转胃癌顺铂耐药的作用机制

目的:探讨左金丸逆转胃癌顺铂耐药的作用机制。方法:体外实验采用人胃癌细胞株SGC-7901及人胃癌顺铂耐药细胞株SGC-7901/DDP,CCK-8法检测细胞增殖率;免疫蛋白印迹法和实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测左金丸干预后各组基因蛋白表达量;同时构建RTKN基因慢病毒载体转染的胃癌细胞系并验证,结合CCK-8法、qRT-PCR和Western blot法检测RTKN基因干扰对胃癌细胞顺铂耐药性的影响。裸鼠体内实验将RTKN干扰的SGC-7901/DDP细胞移植到裸鼠皮下,分别给予左金丸干预4周后,记录移植瘤大小,绘制肿瘤生长曲线,Western blot检测RTKN、p53、Ace-p53、HDAC1蛋白的表达量。结果:SGC-7901/DDP细胞中的RTKN表达量显著高于SGC-7901细胞,沉默RTKN显著降低SGC-7901/DDP细胞的耐药性;左金丸可显著降低SGC-7901/DDP细胞的耐药性,但沉默RTKN后其对SGC-7901/DDP细胞的耐药性及对裸鼠皮下移植瘤体积无明显影响,提示降低RTKN表达后,左金丸的抗肿瘤作用被抑制。结论:RTKN通过p53脱乙酰化途径增加SGC-7901/DDP细胞对顺铂的耐受性;左金丸能有效增加化疗药物对胃癌细胞增殖的抑制作用,通过抑制RTKN介导p53组蛋白脱乙酰化逆转胃癌顺铂耐药。

AA肉仔鸡肌肉组织中miR-133在不同饲养方式下的表达研究

为了研究AA肉仔鸡肌肉组织中miR-133在不同饲养方式下的表达情况,试验采用生物信息学的方法分析了鸡肌肉组织中miR-133基因信息,比对了miR-133前体序列的同源性,通过stem-loop实时定量RT-PCR法分析gga-miR-133c-3p在不同饲养方式的AA肉仔鸡肌肉组织中的表达水平。试验结果表明,共有4个miR-133前体序列,分别位于鸡基因组23号、2号.3号和20号染色体上,4个miR-133的同源性可达96.59%;散养方式的AA肉仔鸡的翅肌、腿肌中gga-miR-133c-3p表达显著低于笼养方式,胸肌、心肌中gga-miR-133c-3p的表达显著高于笼养方式。

外泌体蛋白质在消化系统恶性肿瘤中的研究进展

消化系统恶性肿瘤是常见的恶性肿瘤之一,其中胃癌和肠癌的发病率和死亡率较高。外泌体蛋白质是外泌体的重要组成,在肿瘤的生长、转移侵袭和耐药等过程中起关键作用。随着蛋白质组学技术的发展普及,越来越多的外泌体蛋白质的组成和功能相继被揭示,本文以外泌体蛋白质在消化系统恶性肿瘤中的生物学特征、作用机制、诊断和治疗中的价值等方面的研究进展进行综述,以期为消化系统恶性肿瘤的早期诊断、治疗、预后情况提供一些新的思路及方法。

吴茱萸碱、小檗碱对SGC-7901/DDP耐药性及耐药相关蛋白的影响

目的:探讨吴茱萸碱、小檗碱及其联合使用对顺铂(Cisplatin, DDP)耐药胃癌细胞SGC7901/DDP敏感性的作用。方法:体外诱导建立人胃癌顺铂耐药细胞株SGC-7901/DDP,实验分为对照组、DDP组、吴茱萸碱+DDP组、小檗碱+DDP组及吴茱萸碱+小檗碱+DDP组,CCK8检测各组SGC-7901/DDP细胞增殖能力;Western Blot分析耐药及凋亡相关蛋白P-gp、MRP、caspase-3、caspase-9的表达。结果:CCK8实验表明吴茱萸碱、小檗碱在不影响SGC-7901/DDP细胞活力的情况下可显著增强DDP抑制细胞增殖的作用,且小檗碱化疗敏感性的作用明显强于二者单独给药(P <0.001);Western Blot结果表明,SGC-7901/DDP细胞经吴茱萸碱、小檗碱处理后,caspase-3、caspase-9表达上调,P-gp、MRP表达下调。结论:吴茱萸碱、小檗碱单用及其联用可在体外显著增强SGC-7901/DDP细胞对DDP的敏感性,其效应与凋亡蛋白caspase-3、caspase-9表达升高,耐药相关蛋白P-gp、MRP表达下调相关。

紫云英苷通过增强核转录因子E2相关因子2基因表达修复力竭运动造成的小鼠肝脏损伤

为探索紫云英苷对力竭运动小鼠肝脏损伤的修复作用,选取48只8周龄无特异性病原体(SPF)级C57BL/6J雄性小鼠,随机分成4组,分别为二甲基亚砜(DMSO)组、力竭运动组、50 mg/kg紫云英苷组、100 mg/kg紫云英苷组,其中DMSO组不做运动,其余3组进行一次性力竭运动4 h。2个紫云英苷组在力竭运动后分别灌胃50和100 mg/kg BW紫云英苷,力竭运动组在力竭运动后灌胃等量生理盐水,DMSO组灌胃等量生理盐水配制的0.1%DMSO。灌胃1 h后处死小鼠,检测小鼠肝脏中羟自由基(·OH)、超氧阴离子(O_(2)^(-))清除能力,谷胱甘肽(GSH)含量,谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)和谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(GCLM)的基因和蛋白表达情况。结果显示:与DMSO组相比,力竭运动组小鼠肝脏中羟自由基(·OH)和超氧阴离子(O_(2)^(-))清除能力分别降低54%(P<0.01)和43%(P<0.01),GSH含量降低27%(P<0.05),GR和GSH-Px活性分别降低32%(P<0.01)和37%(P<0.05),同时Nrf2和GCLM的mRNA和蛋白相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。与力竭运动组相比,灌胃浓度为50、100 mg/kg的紫云英苷分别使小鼠肝脏中·OH清除能力提高1.45(P <0.05)和1.25倍(P<0.01),O_(2)^(-)清除能力提高1.78(P<0.01)和1.95倍(P<0.01),GSH含量提高1.36(P<0.05)和2.21倍(P<0.01),GSH-Px活性提高1.54(P<0.01)和1.99倍(P<0.01),GR活性提高1.42(P<0.01)和1.62倍(P <0.01)。此外,与力竭运动组相比,灌胃浓度为50和100 mg/kg的紫云英苷均可使小鼠肝脏中Nrf2、GCLC、GCLM的mRNA和蛋白相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。综上可知,适量的紫云英苷可通过上调Nrf2以及GCLC、GCLM基因的表达修复力竭运动对小鼠肝脏造成的损伤。

紫云英苷对急性力竭运动小鼠肝脏组织中miR-155表达的影响

为探讨紫云英苷对急性力竭运动小鼠肝脏组织中miR-155表达的影响,试验将48只8周龄无特定病原体(SPF)级C57BL/6J雄性小鼠随机分成4组:二甲基亚砜(DMSO)组、力竭运动组、50 mg/kg紫云英苷组、100 mg/kg紫云英苷组,除DMSO组外,其余3组小鼠进行一次性力竭运动4 h;紫云英苷组在力竭运动后分别灌胃50和100 mg/kg的紫云英苷,力竭运动组在力竭运动后灌胃等量生理盐水,DMSO组灌胃等量由生理盐水配制的0.1%DMSO。在灌注1 h后处死小鼠,测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)活性、肝脏组织中抗超氧阴离子自由基(ASAFR)活力和氧化相关miRNAs的表达。结果表明:与DMSO组相比,急性力竭运动后小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)活性提高16.03倍(P<0.05),肝脏组织中抗超氧阴离子自由基(ASAFR)活力降低43%(P<0.05),说明急性力竭运动导致了小鼠肝脏氧化损伤。与DMSO组相比,急性力竭运动后小鼠肝脏组织中miR-155的相对表达量升高6.29倍(P<0.01)。与力竭运动组相比,50 mg/kg紫云英苷组血清中ALT活性降低77%(P<0.05),肝脏组织中ASAFR活力升高1.77倍(P<0.05),肝脏组织中miR-155的相对表达量降低66%(P<0.01);100 mg/kg紫云英苷组血清中ALT活性降低91%(P<0.05),肝脏组织中ASAFR活力升高1.95倍(P<0.05),肝脏组织中miR-155的相对表达量降低60%(P<0.01)。上述结果说明紫云英苷可以部分修复急性力竭运动引起的小鼠肝脏氧化损伤。

紫云英苷对氧化损伤小鼠肌肉组织中LncRNA-MEG3表达的影响

为探讨紫云英苷(Astragalin,AG)对氧化损伤小鼠肌肉组织中抗氧化相关LncRNA-MEG3表达的影响,将48只8周龄c57BL/6J雄性小鼠随机分成4组:DMSO组、运动组、运动+50 mg/kg AG组、运动+100 mg/kg AG组.除DMSO组外,其余3组小鼠进行一次性力竭运动4 h,运动+50 mg/kg AG组和运动+100 mg/kg AG组在小鼠力竭运动后分别灌胃50,100 mg/kg的AG,灌胃1 h后处死动物,取肌肉组织,测定肌肉组织中谷丙转氨酶(ALT)活力、还原型谷胱甘肽(GSH)含量以及氧化相关基因LncRNAs的表达.结果表明,与DMSO组相比,运动组小鼠肌肉组织中ALT活力升高(P<0.01),GSH含量减少(P<0.01);灌胃不同浓度的AG后,与运动组相比灌胃不同浓度AG小鼠肌肉组织中ALT活力降低,GSH含量增多.运动损伤后小鼠肌肉组织中LncRNA-MEG3表达升高,高于DMSO组14.48倍(P<0.01);灌胃不同浓度的AG后,抗氧化相关基因LncRNA-MEG3表达降低,其中100 mg/kg AG组LncRNA-MEG3表达降低了89%(P<0.05).综上说明,紫云英苷对氧化损伤小鼠肌肉组织起到修复作用,并且对肌肉组织中抗氧化相关基因LncRNA-MEG3的表达产生了影响,研究结果为紫云英苷的开发应用提供了实验依据.

棉花籽水提物对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响

为了检测棉花籽水提物对牛骨骼肌卫星细胞增殖的影响,采用HPLC-MS检测棉花籽水提物中棉酚含量,通过CCK-8法检测细胞活力,显微镜下观察细胞形态,Western Blot检测牛骨骼肌卫星细胞增殖相关基因表达水平。结果表明,经不同时间处理后棉花籽水提物中未检测到游离棉酚,浸泡20 h和25 h的棉花籽水提物均可提高细胞活力和数量,细胞形态无变化,其中20 mg·L^-1时效果最显著;20 mg·L^-1棉花籽水提物浸泡20 h能促进牛骨骼肌卫星细胞周期相关CCND1和CCNB1蛋白的表达,可使CCND1蛋白表达提高1.31倍,CCNB1蛋白表达升高1.47倍。此研究结果可为棉花籽的应用提供实验依据。

左金丸醇提物抑制人胃癌SGC-7901细胞糖酵解的作用机制

目的研究左金丸醇提物对人胃癌细胞SGC-7901增殖和糖酵解的作用及机制。方法采用CCK-8法检测左金丸醇提物(5、10、25、50、100、200μg/mL)对SGC-7901细胞增殖的影响;检测左金丸醇提物对SGC-7901细胞葡萄糖摄取量、乳酸和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)含量的影响,评价左金丸醇提物对SGC-7901细胞糖酵解的作用;采用qRT-PCR和Western blotting法检测左金丸醇提物对细胞糖酵解途径相关蛋白Rhotekin(RTKN)表达的影响;采用RTKN shRNA干扰慢病毒感染SGC-7901细胞,检测左金丸醇提物对SGC-7901细胞葡萄糖摄取、乳酸和ATP含量的影响。结果左金丸醇提物对SGC-7901细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.001),呈剂量、时间相关性;左金丸醇提物显著降低SGC-7901细胞葡萄糖摄取、乳酸和ATP含量(P<0.01、0.001);左金丸醇提物显著降低SGC-7901细胞中RTKN mRNA和RTKN蛋白表达(P<0.001);干扰RTKN抵消了左金丸醇提物对SGC-7901细胞葡萄糖摄取、乳酸和ATP含量的抑制作用(P<0.001)。结论左金丸醇提物可显著抑制SGC-7901细胞增殖、降低细胞糖酵解水平,其机制与下调RTKN表达相关。

中药干预代谢重编程抗肿瘤研究进展

代谢重编程是肿瘤细胞的重要特征之一,肿瘤细胞为了满足其快速增殖的生物合成与能量需求,对其代谢通路进行重编程,主要表现为葡萄糖代谢、氨基酸代谢及脂质代谢异常,进而促进肿瘤生长。因此,以肿瘤代谢重编程为靶点,可能为肿瘤的预防和治疗提供新策略。近年来研究发现,多种中药单体和复方通过干预肿瘤代谢重编程发挥抗肿瘤作用。对肿瘤细胞代谢重编程的主要靶点以及中药干预肿瘤代谢重编程的研究进行综述,以期为中药抗肿瘤研究提供新的思路。

miR-1和miR-206在不同饲养方式AA肉仔鸡肌肉组织中的表达分析

为研究miR-1和miR-206在不同饲养方式下AA肉仔鸡肌肉组织中的表达情况,本试验采用生物信息学方法比对了miR-1、miR-206在不同物种中的同源性,通过茎环结构实时定量RT-PCR法分析miR-1和miR-206在不同饲养方式下AA肉仔鸡的肌肉组织中的表达,从而初步探究其表达规律。结果表明,gga-miR-1和gga-miR-206成熟序列分别位于鸡基因组20号和3号染色体上;pre-gga-miR-1与eca、ptr、efu、tgu、ola同源性高达86%,pre-gga-miR-206与bta、cfa、hsa、mml、ptr、efu、xtr同源性高达88%;gga-miR-1和gga-miR-206在幼鸡腿肌中表达量高于笼养鸡和散养鸡,且笼养鸡中gga-miR-1和gga-miR-206表达量高于散养鸡,在散养鸡的翅肌和胸肌中表达量高于幼鸡和笼养鸡。表明不同饲养方式下miR-1和miR-206在不同组织表达不同,导致肉品质不同。本研究有助于了解不同饲养方式下miR-1和miR-206表达规律,养殖户可根据不同需求采取相应的饲养方式。

左金丸对胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖和糖酵解的抑制作用

目的:研究左金丸对胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP增殖和糖酵解的影响。方法:取人胃癌细胞株SGC-7901,体外诱导顺铂(DDP)耐药细胞株SGC-7901/DDP。将耐药细胞分为空白对照组和左金丸低、中、高浓度(25、50、100μg/ml)组,各组予以相应干预。药物干预12 h、24 h、48 h后,CCK-8分别检测各组细胞存活率;药物干预24 h后,试剂盒检测各组细胞葡萄糖摄取率及细胞上清中乳酸含量,同时应用Western blot检测各组细胞中糖酵解途径关键分子C-myc、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1 (GLUT1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)的蛋白表达。结果:(1)与对照组比较,左金丸各浓度组在各检测时间点的细胞存活率均显著降低(P<0.01),且呈时间、浓度依赖性,提示左金丸可显著抑制SGC-7901/DDP细胞增殖。(2)药物干预24 h后,与对照组比较,左金丸各浓度组细胞的葡萄糖摄取率及乳酸含量显著降低(P<0.01),且呈浓度依赖性,提示左金丸可显著抑制SGC-7901/DDP糖酵解。(3)不同浓度左金丸干预24 h后,SGC-7901/DDP细胞中C-myc、HIF-1α、GLUT1、LDHA、HKⅡ的蛋白表达显著下调(P<0.01),且呈浓度依赖性。结论:左金丸可显著抑制胃癌耐药细胞SGC-7901/DDP的增殖,且这一过程可能与抑制糖酵解相关。

白介素22在消化系统恶性肿瘤发生发展中的作用

消化系统恶性肿瘤通常起病隐匿，发病率和死亡率均较高，目前仍缺乏有效的干预策略。白介素22（IL-22）是近年来发现的IL-10细胞因子家族中的一员，最初被称为IL-10相关的T细胞分化诱导因子（IL-TIF）。研究发现IL-22在多种消化系统恶性肿瘤中高表达，且IL-22表达增加与肿瘤进展及患者不良预后相关。机制研究初步表明，IL-22主要通过作用于IL-22受体启动一系列下游信号如JAK/STAT和MAPK，从而促进肿瘤的发生发展。IL-22有潜力成为消化系统恶性肿瘤诊断及治疗的新靶点。