人型枝原体对喹诺酮类药物的耐药性机理研究

为了解人型枝原体 (Mh)对喹诺酮类药物的耐药机理 ,指导临床合理用药 ,采用肉汤稀释法测定了临床标本中 10 0株 Mh对 9种喹诺酮类药物的敏感性。用 PCR对交叉耐药 Mh菌株旋转酶 A亚单位(gyr A)的基因进行扩增 ,将扩增的 DNA片段测序。结果 ,Y98- 37、Y98- 2 3、Y98- 31 、Y98- 32 显示出强大的抗 Mh作用 ,其 MIC5 0 为 0 .0 6 2 5 mg/L,MIC90 为 0 .12 5～ 0 .5 mg/L;其次为 SPL X和 L VL X,MIC5 0 为 0 .2 5、1mg/L,MIC90 为0 .2 5、2 mg/L,OFL X与 CPL X呈现耐药 ,MIC5 0 为 4mg/L,MIC90 为 8mg/L。NAL高度耐药 ,其 MIC5 0 与 MIC90为 12 8mg/L。选出 3株对 9种喹诺酮类药物呈交叉耐药 Mh株 ,PCR扩增 gyr A后得到一大小为 35 0 bp的目的 DNA,测序后将结果与标准敏感株 Mh PG2 1的 gyr A核苷酸序列进行比较 ,3株耐药株中均有 113位碱基C→ T的改变 ,使其编码的 83位氨基酸由丝氨酸变为亮氨酸。提示 Mh gyr A的 113位 C→ T突变 。

尿素支原体所致生殖泌尿道疾病的实验研究

本文从447例NGU(中段尿)、慢性前列腺炎(前列腺液)和男性不育者(精液)中分离UU,其中NGU199例,68例为阳性(34.67%)、慢性前列腺炎159例,33例为阳性(20.7%),男性不育夫妇89例,54例为阳性(60.6%)。在光镜下,UU菌落呈“油煎蛋”状。扫描电镜下,菌体呈卵圆形或球形,直径0.3～0.5μm。临床治疗观察到,大多数阳性患者经四环素、红霉素或强力霉素7～14天治疗后,症状消失,培养转阴、作者认为UU感染可能是NGU,慢性前列膜炎、男性不育的原因之一,应列为常规实验室检查。

3种抗菌药物体外抗5种支原体的活性研究

采用液体与琼脂对倍稀释方法，测定了3种抗菌药物对5种支原体体外抗菌作用效果。结果显示：交沙霉素与泰洛星有较强的抗5种支原体作用。交沙霉素抗尿素支原体（Uu）、人型支原体（Mh）、口腔支原体的MIC50与MIC90作用相同，为0．0625与0．125μg／ml，抗唾液与精氨酸支原体为0．125与0．25μg／ml；泰洛星抗Uu、Mh的MIC50与MIC90，为0．5与1μg／ml，抗口腔支原体为0．25与1μg／ml，抗唾液支原作为0．25与0．5μg／ml，抗精氨酸支原体为0．5与1μg／ml；小檗碱抗唾液与口腔支原体的MIC50与MIC90为4与8μg／ml，抗Uu与Mh为8与16μg／ml，抗精氨酸支原体为16与32μg／ml。

泌尿生殖道支原体对组织细胞的致病作用研究

通过对尿素支原体与人型支原体在单层Ｈｅｌａ细胞上生长特性及细胞毒性的研究，以及细胞水平的致病作用的试验，结果表明，二者在Ｈｅｌａ细胞上持续生长；感染后８天，对Ｈｅｌａ细胞有明显的细胞毒作用，１０天后，可呈现细胞病变效应（Ｃｙｔｏｐａｔｈｉ。ｅｆｆｅｃｔＣＰＥ）。电镜观察，细胞膜与核膜受损，线粒体肿胀，嵴增宽或溶解是空泡状。这些研究结果可为阐明支原体的致病性提供实验依据。

临床医学专业高素质应用型人才培养模式的探索与实践

人才培养模式受社会的经济、政治、文化所制约,不同的时代有着不同的人才培养模式。进入新世纪,随着知识经济全球化进程加快,医学模式、医疗服务以及医生的角色都发生了变化,我国五十年来的传统的临床医学专业人才培养模式面临严峻挑战。本文从我校临床医学专业人才培养的具体实践出发,对临床医学专业高素质应用型人才培养模式的构建进行了探讨。

男性非淋菌性尿道炎患者性病病原体的研究

应用培养、多聚酶链反应（ＰＣＲ）和抗原检测法对１０４６例非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）患者的前列腺液（ＥＰＳ）进行检测。结果显示：ＣＴ阳性为１２６例（１２．０４％），ＵＵ为１４９例（１２．２４％）、ＣＤ为１１２例（１０．７０％）、ＴＶ为３４例（３．２５％）、ＨＳＶ２为３２例（３．０５％）、ＭＨ为２１例（２．０％）。在１２６例ＣＴ阳性患者，混合感染７８例（５７．１４％），其中ＣＴ＋ＵＵ２８例（２２．２２％）、ＣＴ＋ＵＵ＋ＭＨ４例（３．１７％）、ＣＴ＋ＣＤ＋ＴＶ１２例（９．５２％）。本研究结果可为临床男性ＮＧＵ感染病因学诊断与治疗提供实验室依据。

深化实验教学改革 确保人才培养质量

本文通过高校实验教学对人才培养的重要性以及存在问题的分析,探讨了高校实验教学改革的措施,旨在加快实验教学改革与创新,真正实现高素质创新型人才培养。

NGU的病因学诊断研究

ＮＧＵ的病因学诊断研究吴移谋（衡阳医学院微生物学教研室，衡阳，４２１００１）非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）是由多种病原体（除淋球菌外）感染而引起的尿道炎的总称。目前被重视的沙眼衣原体（ＣｈａｌｍｙｄｉａｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓＣｔ）和解脲支原体（Ｕｒｅａｐｌ...

微生物药物靶标

微生物耐药性问题日益严重，很多病原微生物，例如结核分枝杆菌和恶性疟原虫等对人类生命健康造成了极大的威胁，开发新的抗菌药物迫在眉睫。微生物作为抗生素的重要来源，在发掘抗耐药菌新型抗生素的研究中承担了重要角色，许多微生物来源的天然化合物展现了显著的抗耐药菌活性。而大量病原微生物基因组的测序完成，又为寻找针对病原微生物的分子药物靶标提供了有利条件。

论知识经济与高校科技

首先阐述了知识经济的概念与特征。从科研的性质、科研的组织形式、科研的目的以及科研人员的价值分析了未来知识经济与高校科研的发展趋势，并从科研队伍建设、科研环境、开展创新研究、强化知识产权保护等方面讨论了知识经济及高校科研面临的战略任务。在２１世纪，高校面对知识经济的挑战，必将以自己的科技优势，在国民经济建设中发挥主导作用，为“科教兴国”作出应有贡献。

Susceptibilities of Mycoplasma Hominis and Ureaplasma Urealyticum to Fluoroquinolones

Objectives: To determine the susceptibilities of M.hominis and U. urealyticum to fluoroquinolones forthe instruction of reasonable clinical application ofantibiotics.Method: The susceptibilities of M. hominis and U.urealyticum to six fluoroquinolones were determinedby the broth dilution method.Results: Sparfloxacin and gatifloxacin were veryactive with MIC50S of 0.03125 and 0.25 μg/ml againstM. hominis, 0.25 and 0.5 μg/ml against U. urealyticum,respectively. Levofloxacin and ofloxacin had MIC50S of1 μg/ml and 2 μg/ml, respectively against both species.Norfloxacin was less effective against both species at16 and 32 μg/ml. Ciprofloxacin was unusual in thatthe MIC50S varied fourfold between species, with 2 μg/ml against M. hominis and 8 μg/ml against U.urealyticum.Conclusions: The results can provide useful infor-mation for selecting fluoroquinolones for treatmentof urogenital mycoplasma infections.

泌尿生殖道支原体

人类泌尿生殖道菌群中至少含有七种支原体:尿素支原体(Ureaplasma urealyticum Uu)、人型支原体(Mycoplasma hominis Mh)、生殖道支原体(M. genitalium Gm)、发酵支原体(M. fermentans)、肺炎支原体(M. pneumoniae)、灵长目支原体(M. primatum)和唾液支原体(M. Salivarium)。随着研究的深入,越来越多的证据表明前三种对成人泌尿生殖道及新生儿和胎儿有致病作用,后四种较少见,亦无证据表明能引起明显的疾病。现将致病的泌尿生殖道支原体的一般特性、致病性、分离鉴定。

血培养病原菌菌群分布及耐药分析

目的了解南华大学附属第一医院1997年1月～2004年6月年血培养病原菌菌群分布及近2年常见致病菌的耐药情况.方法4686份血标本经BACTEC 9050全自动血培养仪培养检测,分离出的致病菌用Sceptor半自动微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验.结果共分离出799株病原菌,血培养阳性率17.1%,检出病原菌分布于20个属,47个种.革兰阳性菌构成比明显高于革兰阴性菌,最常见的血培养菌属是葡萄球菌,占61.7%,其次是沙门菌、肠球菌、链球菌、埃希菌、假单胞菌及不动杆菌.各主要致病革兰阳性菌对万古霉素、呋喃妥因敏感,对环丙沙星较敏感,各主要致病革兰阴性菌对亚胺培南、头孢吡肟及阿米卡星敏感或较敏感.葡萄球菌的耐药情况严重,对青霉索耐药率高达90%以上,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对多种抗生素耐药情况较金葡菌更严重.肠球菌对多数常用抗生素耐药,对红霉素耐药率高达85.9%.链球菌对青霉素和氨苄西林明显耐药.大肠埃希菌对亚胺培南、头孢替坦、阿米卡星敏感,对头孢吡肟、替卡西林/克拉维酸、阿莫西林/克拉维酸较敏感,对其他多种抗生素耐药.假单胞菌对亚胺培南、环丙沙星、阿米卡星及头孢他啶较敏感,对其他多种抗生素均耐药.不动杆菌对亚胺培南、环丙沙星、头孢吡肟、头孢噻肟、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶及头孢他啶较敏感,对其他多种抗生素均耐药.沙门菌则对多种抗生素敏感.结论血培养病原菌以条件致病菌为主.检出菌中除沙门菌外,均存在严重耐药问题,及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要.

巢式PCR扩增梅毒螺旋体polA及其临床应用的研究

目的 建立一种检测临床标本中微量梅毒螺旋体 (Tp)的敏感、特异的方法。方法 运用常规及巢式PCR扩增了Tp的DNA多聚酶I基因 (polA)的特异性片段 ,检测了两方法的特异性和敏感性 ;与血清学方法比较 ,评价了两方法在诊断梅毒中的意义。结果 常规及巢式 polAPCR只在扩增Tp时有特异性产物 ,灵敏度分别约为 40个 /10 0 μl及 1个 /10 0 μl。检测 13 1份拟诊为梅毒的血清标本 ,血清学方法与巢式 polAPCR结果无显著性差异 ;巢式和常规 polAPCR结果有显著性差异 ,巢式PCR敏感性高于常规PCR。结论 巢式 polAPCR具有高度敏感、特异、标本处理简便等优点 ,适用于检测血清等标本中微量Tp ,可作为血清学方法的补充用于梅毒诊断。

44株甘肃疑似非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定

目的对甘肃44株疑似非结核分枝杆菌临床分离株进行菌种鉴定。方法收集2010年甘肃省兰州市胸科医院从结核病患者痰标本中分离的、抗酸染色阳性和改良罗氏培养基,TCH和PNB鉴别培养基培养鉴定为非结核分枝杆菌(non-tuberculosis Mycobacteria,NTM),采用rpoB-PRA和PCR产物DNA测序等分子生物学方法进行细菌种的鉴定。结果共对44株疑似非结核分枝杆菌临床分离株进行了鉴定。经rpoB-PRA、rpoB和hsp65基因DNA测序分析,其中非结核分枝杆菌13株(29.55%),包括龟分枝杆菌(M.chelonae)5株,戈登分枝杆菌(M.gordonae)4株,胞内分枝杆菌(M.intracellulare)2株,赛特分枝杆菌(M.setense)1株,耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)1株;诺卡菌(Nocardia)31株(70.45%),其中鼻疽诺卡菌(N.farcinica)30株,卡尔涅亚诺卡菌(N.carnea)1株。结论抗酸染色阳性、PNB/TCH鉴定为非结核分枝杆菌临床分离株中包含不同种类的非结核分枝杆菌和诺卡菌,应开展进一步菌种鉴定,以便于临床正确诊断和合理治疗。

泌尿生殖道支原体临床分离株对7种抗菌药物的耐药性研究

目的 比较 7种抗生素对泌尿生殖道支原体临床分离株的抗菌作用 ,指导临床用药。方法 采用直接肉汤药盘法测定了临床标本中 14 6株解脲脲原体 (Uu)和 92株人型支原体 (Mh)对 7种抗菌药物的耐药性。结果 14 6株 Uu对四环素、多西环素、米诺环素、罗红霉素、阿齐霉素、交沙霉素、氧氟沙星的耐药率分别为 34.2 %、2 4 .7%、2 8.1%、8.9%、4 .8%、11.0 %、和 2 8.8%。92株 Mh对四环素、多西环素、米诺环素、罗红霉素、阿齐霉素、交沙霉素、氧氟沙星的耐药率分别为 5 5 .5 %、2 5 .0 %、4 5 .7%、97.8%、10 0 %、8.7%、和16 .3%。耐四环素的 Uu和 Mh株对多西环素、米诺环素、交沙霉素以及氧氟沙星存在交叉耐药性。 85 0例 Uu和 Mh混合感染者对交沙霉素的耐药率最低 (8.1% )。结论 泌尿生殖道支原体的耐药性监测对指导临床治疗具有重要意义。

研究型教学模式下医学微生物学实验教学改革

为推进高校研究型医学微生物学实验教学的发展,对高校医学微生物学实验教学中存在的问题进行了分析,提出了一系列研究型医学微生物学实验教学改革措施。实践证明,研究型医学微生物学实验教学可极大提高学生的学习兴趣,激发学生主动探索的热情,培养学生的创新意识、创新思维和创新能力,为培养高素质的应用型医学人才打下基础。

福建省肺非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定（英文）

目的对2005-2011年间,福建省福州市胸科医院分离获得的非结核分枝杆菌临床菌株进行菌种鉴定。方法分别使用传统鉴别培养基法和多位点PCR、hsp65-PRA与rpoB-PRA,以及hsp65、rpoB、16srRNA和ITS基因测序等分子生物学方法,对全部菌株进行菌种鉴定。结果 450株被初步鉴定为非结核分枝杆菌的临床分离菌株中,有45株被鉴定为结核分枝杆菌,其余405株被鉴定为23种不同的非结核分枝杆菌和1株支气管戈登菌。结论在该地区有多种非结核分枝杆菌传播和流行,其中,6种非结核分枝杆菌和支气管戈登菌为在福建省内首次发现。

梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd基因的克隆、表达及其免疫活性研究

利用PCR技术从Tp Nichols株基因组模板中扩增梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)外膜蛋白Gpd基因,定向克隆构建真核表达重组体pcDNA3.1(+)-Gpd,免疫印迹和免疫组化技术检测pcDNA3.1(+)-Gpd在HeLa细胞中的表达;同时将真核表达重组体pcDNA3.1(+)-Gpd免疫新西兰兔,检测其在兔体内的免疫应答效果。免疫印迹和免疫组化鉴定均显示重组体在HeLa细胞中能有效表达一个41kD的Gpd融合蛋白。新西兰兔接种核酸疫苗后,能产生特异性抗体,第3次免疫后2周抗体最高滴度可达1∶1024,免疫后兔脾细胞受Gpd蛋白刺激有明显增殖反应。所诱导的抗体水平和脾淋巴细胞增殖情况均显著高于空质粒对照组和空白对照组(p<0.05)。Tp真核表达重组体pcDNA3.1(+)-Gpd的成功构建及能刺激新西兰兔产生较强特异的免疫应答,为Gpd蛋白生物学功能及梅毒DNA疫苗的深入研究奠定了一定的实验基础。

溶脲脲原体对大环内酯类药物的敏感性分析

目的:检测溶脲脲原体(Uu)对14环(红霉素和罗红霉素)、15环(阿奇霉素)和16环(交沙霉素和吉他霉素)大环内酯类药物的敏感性,为临床合理用药提供参考依据。方法:采用微量肉汤稀释法检测了5种大环内酯类药物对203株Uu的最低抑菌浓度(MIC)。结果:203株Uu对红霉素、罗红霉素、阿奇霉素、交沙霉素和吉他霉素的耐药率分别为:11.8％、7.4％、6.9％、3.9％和3.5％。在5种药物中,交沙霉素和吉他霉素抗Uu活性最强,MIC_(50)分别为0.125mg/L和0.5 mg/L,MIC_(90)分别为0.5mg/L和1mg/L,其次为阿奇霉素,MIC_(50)和MIC_(90)分别为2mg/L和4mg/L,红霉素和罗红霉素抗Uu活性较弱,MIC_(50)均为4mg/L,MIC_(90)均为8mg/L。结论:对Uu对大环内酯类药物存在不同程度的耐药;16环大环内酯类药物交沙霉素和吉他霉素抗Uu活性强于14环和15环大环内酯类药物。