减少超偏载检测匹配差错与提高设备检修技术

超偏载检测系统是保障货车运行安全的重要设施,由于系统匹配存在缺陷,造成部分车次、车号重复,错配误报警,影响车站正常生产。列举了不匹配的主要类型和产生问题的原因,提出有针对性的解决措施,对设备检修技术和方法进行了探讨。

上海铁路局1—8月份超偏载检测装置运用及检修情况分析(1)

上海铁路局共有超偏载检测装置18台,分布在4个编组站。文章介绍了2007年1～8月份超偏载数据分析运用、故障发生基本情况、各站检测点故障情况、远程诊断故障处理情况和设备故障检修情况。

上海铁路局1～8月份超偏载检测装置运用及检修情况分析(2)

上海铁路局共有超偏载检测装置18台,分布在4个编组站。文章介绍了2007年1～8月份超偏载数据分析运用、故障发生基本情况、各站检测点故障情况、远程诊断故障处理情况和设备故障检修情况。

隐球菌脑膜炎患者脑脊液宏基因组二代测序结果分析

目的评价脑脊液宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing,mNGS)技术在隐球菌脑膜炎诊断中的潜在应用价值。方法回顾性收集北京协和医院2014年1月至2016年12月采用脑脊液mNGS技术辅助确诊的6例隐球菌脑膜炎患者临床资料,包括脑脊液常规、生化、细胞学、培养、墨汁染色等实验室检测结果,应用BGISEQ-100测序平台进行脑脊液病原测序,综合分析患者的临床、实验室和辅助检查结果。结果6例患者中,男性4例,女性2例,年龄26~53岁,中位年龄51岁。6例患者均无免疫缺陷性疾病,有头痛、脑膜刺激症状及颅内压增高表现,5例患者出现发热,2例患者出现复视。脑脊液常规检查示白细胞和蛋白轻度升高,糖正常或轻度降低;5例患者脑脊液墨汁染色阳性,4例患者脑脊液隐球菌抗原检测阳性,2例患者脑脊液真菌培养阳性。脑脊液mNGS检测隐球菌核酸序数为108~25361,基因覆盖率0.19%~29.00%;5例提示新型隐球菌感染,其中3例经PCR检测证实为新型隐球菌感染;1例提示格特隐球菌感染,经生物质谱仪检测证实为格特隐球菌感染。结论脑脊液mNGS技术可准确判断隐球菌感染,并对鉴别格特隐球菌具有一定优势,有助于降低免疫功能正常人群隐球菌脑膜炎的漏诊率。

高通量测序技术诊疗幼儿急疹并热性惊厥1例

幼儿急疹(Exanthema subitum,ES)是婴幼儿时期常见的急性发热性出疹性皮肤病,特点为3岁以内的婴幼儿在持续高热3至5天后,体温迅速下降,同时皮肤出现玫瑰红色斑丘疹,少数可合并热性惊厥。本病在发热期诊断比较困难,因多数患儿就诊于发热期,临床表现与其他常见发热性疾病十分相似,很难区分,且患儿一般状态良好,医院很少进行详细的微生物病原体检测,以常规检查为主。临床上培养方法的特异性较高,但其敏感性较差,培养阴性并不能排除感染。分子生物学方法对于培养阴性、临床怀疑存在感染病例的微生物检出具有较高的敏感性。采用高通量二代基因测序(Nextgeneration sequencing,NGS)的技术,检测过程包括核酸提取,文库构建,测序,信息分析。通过微生物专用数据库比对和生物信息学分析,可获得疑似致病微生物的种属信息,并提供全面深入的检测报告,为疑难危重感染患者查明原因,为临床医生提供快速精准诊断依据[1-3]。该技术尤其用于无菌体液(例如脑脊液,血浆等)的未知病原体检测[4-5]。本文采用该技术成功诊疗幼儿急疹合并热性惊厥患儿1例,现报道如下。

心肌肥厚大鼠心肌细胞变化与Cx43表达

目的探讨异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)致心肌肥厚大鼠心肌细胞间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达的变化。方法皮下注射,异丙肾上腺素4 mg/(kg.d),每日2次,连续5 d,建立大鼠心肌肥厚模型(ISO组),观察大鼠体重(mB)、心脏重量(mH)和左心室重量(mLV),心肌细胞横径(transdiameter of cardiomyocyte,TDM)和心肌细胞截面积(cardiomyocyte area,CA),苏木素伊红(HE)染色观察细胞病理学改变,免疫组化染色和蛋白印记(western blotting)方法观察心肌细胞Cx 43的变化。结果与对照组比较,ISO组大鼠mH/mB、mLV/mB、TDM和CA明显增加(P<0.05,P<0.01);心肌细胞病理学显示,ISO组心肌纤维走向紊乱,细胞大小不均,较对照组心肌细胞变大,密度变小;免疫组化结果表明,对照组大鼠心肌细胞Cx 43颗粒典型地排列在心肌闰盘处,ISO组心肌细胞Cx 43颗粒发生重排,杂乱分布于闰盘、心肌细胞膜各部位和胞浆内;蛋白印记法结果显示,ISO组Cx 43表达量明显低于对照组。结论异丙肾上腺素致心肌肥厚导致Cx 43蛋白表达改变,加速间隙连接降解和功能异常。

新一代测序在中枢神经系统感染病原体检测中的应用

中枢神经系统（CNS）感染是神经科的一类常见疾病,由于临床实验室检测手段的限制,超过一半的CNS感染病例最终都无法明确诊断.目前临床应用最广泛的CNS感染病原体检测方法主要包括：脑脊液病原体形态学鉴定、外周血或脑脊液培养、脑脊液和血清的病原体抗体检测以及脑脊液的基因检测.各种方法均有其局限性,其中培养和病原体抗体检测的适用范围有限,对病毒而言尤为如此.

伪狂犬病毒脑炎临床观察与脑脊液二代测序鉴定

目的通过对病因未明的脑炎患者的临床评估与脑脊液二代测序（NGS）病原体筛查，诊断伪狂犬病毒（PRV）脑炎，描述其临床特征。方法选择2016年12月至2017年12月基于北京协和医院神经科牵头的脑炎多中心临床登记研究，并根据北京脑炎协助组脑炎诊断标准入组病因未明的脑炎病例，进一步进行病因筛查，对疑似感染性脑炎而病因未明者行脑脊液二代测序。结果共收集到4例疑似PRV脑炎病例，均为从事生猪与生猪肉产销的人员。急性起病，表现为迅速进展的重症脑炎，癫痫大发作、意识障碍、呼吸障碍，需要ICU救治，3例呼吸机支持。2例合并双侧视网膜炎，神经影像学提示灰质受累为主的坏死性脑炎，受累部位包括边缘系统、基底节区与中脑，无明显出血改变。脑脊液压力升高，脑脊液白细胞升高（6～64）×10^6/L，脑脊液细胞学为淋巴细胞性炎症。对2例患者进行脑脊液NGS，检测到伪狂犬病毒，未检测到其他病原体，其他临床病原学检测结果阴性。阿昔洛韦、静脉免疫球蛋白与激素治疗部分有效，末次随访4例患者的改良Rankin评分分别为3、5、5和6分。结论伪狂犬病毒可感染人而导致脑炎、视网膜炎。对于病因不明的脑炎病例，如果流行病学、临床表现、脑脊液与影像学符合该病，应尽快进行脑脊液PRV核酸检测，及时诊断和治疗。

中枢神经系统李斯特菌感染患者的临床和脑脊液二代测序结果分析

目的评价脑脊液二代测序在中枢神经系统（CNS）李斯特菌感染诊断中的潜在应用价值.方法为明确2017年6—11月在河南省人民医院神经内科住院的5例CNS感染患者的致病微生物,采用血液与脑脊液常规、生化、细胞学、培养、革兰染色等实验室检测方法,应用BGISEQ-100测序平台进行脑脊液病原测序,同时收集患者的相关临床资料,对患者的临床、实验室与辅助检查结果进行综合分析.结果在5例患者中,男性1例,女性4例,年龄26-61岁,发病前3例有免疫抑制剂治疗史,3例前驱期有消化道症状,CNS受累后均有发热、头痛,脑膜刺激征,影像学表现为脑膜、脑干或脑室周围受累,脑脊液细胞数〉500×10^6/L,脑脊液二代测序检测到单核增生性李斯特菌的核酸序列数57-2611条,基因覆盖度为0.23％-14.00％,PCR验证结果支持5例患者的CNS李斯特菌感染临床诊断成立.结论脑脊液二代测序技术可准确判断CNS李斯特菌感染,有利于及时治疗.

大规模检测平台在新型冠状病毒防控中的作用:基于新型数值模型的实证研究

目的为应对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的大规模流行,依托有资质、有能力的检测机构,建立了每日万人份的应急核酸检测及千人份高通量测序实验室(武汉“火眼”实验室)。运用数学模型分析武汉“关闭离汉通道”后检测能力快速扩大对于疫情防控效果的影响。方法在2020年1月23日武汉“关闭离汉通道”后,依据湖北省卫健委通报的疑似病例数据,以及“火眼”实验室每日检测数据,通过建立非线性、竞争性微分方程模型,模拟检测能力对实现疑似病例“清零”和“日清日结”的影响。结果在万人级病原检测实验室没有建成的情况下,疑似患者高峰数量将从23000例上升到33700例(增长47%),疑似患者数量下降的转折点将延后6 d,实现“日清日结”将延迟11 d,疑似患者隔离成本将增加124%;万人级病原检测实验室饱和运转的情况下,疑似患者例数高峰将减少56%,超过22800例疑似患者能够提前获得诊断和收治,疑似患者数量下降转折点将提前1周到来,实现“日清日结”可提前约12 d,隔离成本可减少72%;理想情况下,若“关闭离汉通道”时立即将日检测能力超过10500例的规模化检测平台投入使用,则可始终保证疑似病例“日清日结”。为让“关闭离汉通道”持续时间和隔离成本最小化,需将规模化、标准化检测平台建设与“关闭离汉通道”、床位扩容、加强救治能力等措施同步执行,并向检测平台持续送样,保证饱和运行。结论建设“平战结合”的精准检测平台是新发传感染病防控的关键一环,应作为重要基础设施统筹配置加以保障。