肝细胞癌中P16蛋白缺失与增殖细胞核抗原表达的相关性

用免疫组织化学技术检测了６３例肝细胞癌（ＨＣＣ）中Ｐ１６蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣ－ＮＡ）的表达及其分布情况，探讨Ｐ１６蛋白缺失与癌细胞增殖的关系。结果显示：（１）ＨＣＣ级别愈高Ｐ１６蛋白阴性率愈高；（２）ＨＣＣ级别愈高ＰＣＮＡ指数（ＰＣＮＡ－ＬＩ）愈高；（３）Ｐ１６蛋白阴性病例的ＰＣＮＡ－ＬＩ比Ｐ１６蛋白阳性病例的更高（Ｐ＜０．０２５）。Ｐ１６蛋白与ＰＣＮＡ表达之间呈负相关（ｒｓ＝－０．３７９，Ｐ＜０．０１）

异丙肾上腺素对人胃癌细胞株凋亡的影响

目的研究异丙肾上腺素(ISO)对人胃癌细胞株(NKM45细胞)凋亡的影响。方法把NKM45细胞置含不同浓度(15,30,60μmol/L)ISO的培养液中培养24h。用TUNEL试验检测凋亡率。用免疫组化技术检测Bcl2和P53基因的表达。结果ISO显著地增加NKM45细胞的凋亡率(P<0.01),并随ISO浓度的增高而增高。Bcl2和P53的表达随ISO浓度的降低而降低(P<0.01)。NKM45细胞凋亡率与Bcl2和P53的表达密切相关(r=-0.93,P<0.01和r=-0.99,P<0.01)。结论ISO可促进NKM45细胞凋亡。NKM45细胞凋亡与Bcl2和P53表达减少相关。

国产曙红Y染色液配制方法的改进

染色液的配制是稳定提高常规切片质量重要因素之一,我们在学习前人经验的基础上,对配制曙红染色液的方法作了改进,现报告如下。(一)酸化去钠醇溶性伊红曙红 Y 的分子式为 C_(20)H_6O_5Br_4Na_2。用酸处理后可除去钠,使之由水溶性变为醇溶性。

T_(24)细胞系中Cyclin D_1、CDK_4、p16和PCNA的表达状态及其意义

目的 :研究人膀胱移行细胞癌 (TCC)T2 4 细胞系中CyclinD1、CDK4 、p16和PCNA的表达及其意义。方法 :用免疫组化方法检测T2 4 细胞系在细胞周期各时期CyclinD1、CDK4 、p16和PCNA的表达。结果 :在G1、S和G2 M期 ,Cy clinD1阳性细胞数分别为 2 8.4%、46 .8%和 6 4.7% ;CDK4 阳性细胞数分别为 41.2 %、5 3.7%和 6 3.7% ;PCNA阳性细胞数分别为 41.3%、5 9.9%和 71.1%。在G1、S、G2 M期间均有显著性差异 (P <0 .0 1)。各期细胞中均未检出p16阳性细胞。结论 :(1)在正常 (非肿 )细胞中CyclinD1和CDK4 的表达主要在G1期 ,然而 ,在T2 4 细胞系中的表达在S期继续增高并在G2 M期达高峰 ,在肿瘤细胞中CyclinD1和CDKM4这种异常的表达形式和p16蛋白缺失可能导致细胞周期进程的正常调控机制丧失。 (2 )

反义c-fos寡脱氧核苷酸对hCG诱导大鼠黄体细胞孕酮和雌二醇生成的影响

采用离体孵育大鼠黄体细胞的方法，观察了反义c-fos寡脱氧核苷酸（反义c－fosODN）对hCG诱导的黄体细胞孕酮（P）和雌二醇（E2）产生的影响，同时观察了外源性cAMP和钙离子通道阻断剂维拉帕米（Verapamil）对黄体细胞中c－fos蛋白的影响。结果发现，反义c－fosODN能呈剂量相关方式抑制hCG诱导的黄体细胞P和E2的产生，同时使c－fos蛋白染色阳性的黄体细胞百分数下降；而无义tatODN没有相应的作用。10-4mol／L二丁酰cAMP能明显增强hCG对P、E2产生的刺激作用，并使c－fos蛋白染色阳性的黄体细胞百分率显著升高；当与反义c－fosODN共同作用时能明显逆转反义c-fosODN对P、E2产生和c－fos表达的抑制作用。10～6mol／L维拉帕米（Verapamil）显著抑制hCG诱导的P、E2产生，同时使c－fos蛋白染色阳性的黄体细胞百分率下降；当与反义c－fosODN共同作用时，对反义c-fosODN对P、E2产生和c－fos表达的抑制作用具有协同效应。表明，c－fos与hCG诱导的黄体细胞孕酮和雌二醇的产生密切相关；cAMP和Ca2+能调节c－fos在黄体细胞中的表达。

甲醛铬明矾加强明胶粘附力在免疫组化技术中的应用

免疫组化在病理学中的应用日益广泛,不仅可用新鲜组织的冰冻切片,也可用经甲醛固定石蜡包埋的切片进行免疫组化染色,但用石蜡切片时需经蛋白酶消化,在随后一系列步骤中还要经过多次水洗,组织切片容易脱落,给技术操作造成很大困难,因此选择粘附力强的粘附剂是很重要的。除了可用白胶作粘附剂外,也可用明胶—铬明矾作粘附剂,但后者粘附力不理想,会发生脱片现象。

大鼠卵巢不同功能阶段时c-fos表达的动态变化

目的和方法 :本文用免疫组织化学方法检测了成年大鼠卵巢于不同的功能阶段和未成年大鼠外源性激素诱导的卵巢于不同的功能阶段c fos表达的变化以及与血清E2 和P含量的相关关系。结果 :在成年大鼠动情前期、动情期卵巢的间质腺和基质中及动情间期和妊娠期卵巢的黄体细胞和基质中有c fos表达 ,c fos蛋白阳性信号的表达范围和表达强度在动情前期卵巢较大 ,动情间期和动情期卵巢较低 ,妊娠期卵巢最大 ,这种变化与血清E2 和P含量的变化呈明显的正相关关系。未成年大鼠 ,用DES使卵泡发育至窦前期时 ,在卵巢中未检测到有c fos蛋白的表达 ,用PMSG使卵泡发育至排卵前期时在卵巢的间质腺和基质中有c fos表达 ,用PMSG和hCG后 4天形成的早期黄体化卵巢c fos在黄体细胞和基质中的表达明显升高 ,而于用hCG后 9天形成的晚期黄体化卵巢c fos表达明显下降 ,这种变化也与血清E2 和P含量的变化呈明显的正相关关系。结论 :c fos与卵泡发育、排卵。

牛磺酸对心肌缺血损伤细胞凋亡与Fas/FasL基因表达变化的影响

目的探讨大鼠心肌缺血损伤心肌细胞凋亡与Fas/FasL基因表达变化及牛磺酸对其的影响。方法结扎冠状动脉制备心肌缺血模型,转移酶介导脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞,免疫组织化学法检测Fas/FasL蛋白水平,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分析Fas基因mRNA表达变化。结果心肌缺血后心肌细胞凋亡指数、Fas/FasL蛋白阳性染色细胞指数及Fas基因的mRNA表达水平均明显增加,心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量升高,Ca2+-ATP酶活性降低。牛磺酸能明显降低心肌细胞凋亡指数,Fas基因mRNA表达及Fas/FasL蛋白阳性染色细胞指数,抑制心肌组织MDA的生成,提高Ca2+-ATP酶活性。结论牛磺酸对心肌缺血的心肌细胞凋亡与Fas/FasL基因表达水平增高有较好的拮抗作用。

中华硬蜱叮咬免疫接种宿主后中肠病理变化的动态观察

目的为系统观察中华硬蜱成虫叮咬蜱抗原免疫接种组和佐剂对照组宿主后中肠上皮形态学动态变化。方法选用中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种组0兔和佐剂对照组兔，分别在叮咬后24h、48h、72h以及第5、8天电镜下观察中肠上皮形态学变化。结果中华硬蜱叮咬唾液腺抗原免疫接种宿主后，蜱中肠上皮遭到较严重程度的损伤和破坏，消化细胞表面微绒毛减少、变短、排列不整，细胞内粗面内质网扩张，线粒体嵴减少，高铁血红素颗粒及脂滴较对照组明显减少，基底迷路系统空泡化，基膜变性、松散和断裂等。而对照组蜱中肠消化细胞发育正常。讨论结果提示在蜱抗诱导的宿主抗蜱免疫作用中，蜱中肠是主要损伤部位，中肠的病理损伤是蟀吸血、生殖能力变化的病理学基础。

大肠腺癌p21ras的表达与淋巴结转移状态的关系

应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法，对９０例大肠腺癌ｐ２１ｒａｓ的表达与淋巴结转移状态的关系进行了研究。结果显示：在有淋巴结转移的４５例大肠腺癌中，ｐ２１ｒａｓ表达呈阳性者有３４例（７５．６％），在无淋巴结转移的４５例大肠腺癌中，ｐ２１ｒａｓ表达呈阳性者有１４例（３１．１％），阳性表达率前者高于后者，差异非常显著（Ｐ＜０．００１）；在淋巴结转移数为１～３枚的２７例大肠腺癌中，ｐ２１ｒａｓ表达呈阳性者１８例（６６．７％），在转移数大于３枚的１８例大肠腺癌中，ｐ２１ｒａｓ呈阳性表达者１６例（８８．９％），后者的阳性表达率高于前者，但两者无显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结果提示：大肠腺癌ｐ２１ｒａｓ的阳性表达与淋巴结转移密切相关，这对判断淋巴结转移、选择手术方式和拟定辅助治疗措施等方面起着指导作用。

膀胱移行细胞癌组织中cyclinD1和CDK4的表达及其与临床病理的关系

目的 研究膀胱移行细胞癌组织中cyclinD1和CDK 4的表达及其与临床病理变化的关系。方法 采用免疫组化方法对 8例正常膀胱和 69例膀胱移行细胞癌组织中cyclinD1和CDK 4的表达进行观察。 结果 膀胱移行细胞癌组织中cyclinD1的表达高于正常膀胱组织 (P <0 .0 5 )。cyclinD1表达阳性者的肿瘤细胞分化较差 ,术后易复发 ,生存时间较短 ;而CDK 4的阳性表达仅与患者术后复发有关 (P <0 .0 5 ) ,与病理分级和生存时间无关 (P >0 .0 5 )。结论 cyclinD1的表达可作为判断膀胱细胞癌病理分级 ,术后复发和临床预后的指标 ,而CDK 4只能作为术后复发的参考指标。

氯化镧对内毒素血症小鼠炎性介质的影响

目的 :观察氯化镧对内毒素血症小鼠炎性介质水平的影响 ,以探讨氯化镧对内毒素效应的阻断作用。方法 :Balb/C小鼠随机分为内毒素组、氯化镧用药组、氯化镧对照组、生理盐水对照组 ,分别于内毒素攻击后 4h、2 0h取血检测各组小鼠血浆中TNFα、IL1β的含量 ,并进行形态学观察。结果 :氯化镧用药组TNFα、IL1β的含量明显低于内毒素组 (P <0 .0 0 1)。形态学观察显示氯化镧能减轻内毒素对机体的损害效应。结论

中华硬蜱叮咬免疫兔后中肠消化细胞形态测量分析

本文采用军事医学科学院生产的多功能系统，对叮咬经不同抗原免疫接种兔后的中华硬蜱中肠消化细胞进行形态学测量分析，以了解蜱中肠受损程度和各种抗原诱导免疫力产生的强弱。结果表明：蜱血餐后其中肠增粗，肠壁增厚：消化细胞数量增加，体积增大；而细胞核相对较小，核体密度、表面积密度变小。中华硬蜱叮咬免疫兔后上述各种吸血后的正常反应不如佐剂对照组，尤以纯化抗原接种组明显，其中肠也增粗，由于大量消化细胞受损伤而脱落，使得消化细胞数减少，由于大量消化细胞受损脱落使消化细胞数减小和消化细胞平均截面面积减小。由于核固缩、核碎裂、核溶解早于细胞碎裂脱落，使细胞核的体密度和表面积密度明显减小。与对照组相比，肠直径、肠壁面积、消化细胞截面数、数面密度、截面面积和消化细胞核的体密度及表面积密度均有显著性或非常显著性差异。受损程度依次为纯化抗原（ＰＡ）组、中肠抗原（ＭＡ）组、唾液腺抗原（ＳＧＡ）组和全虫抗原（ＷＴＡ）组。卵抗原（ＯＡ）组损伤最轻。本实验的五个免疫接种组中有四个组能有效诱导宿主产生免疫力，以１０５ＫＤ纯化抗原接种作用最强。

术中桥静脉广泛损伤后继发性脑损害实验研究

目的：用动物模拟开颅术，持续牵拉脑组织，切断引流之桥静脉，在术后数小时引起淤血性脑实质损害。病理观察此种静脉淤血性脑损害的发生情况。方法：成年家猫18只，随机分为A、B、C三组，A、B组各5只，C组8只。A组开颅后在靠近上矢状窦处将一侧所有桥静脉电凝切断，5 h后缝合手术切口；B组开颅后将一50克重物加压于外侧裂中段，5 h后缝合手术切口；C组则为切断一侧所有桥静脉并将一50 g重物加压于外侧裂中段，5 h后缝合手术切口。24 h 后静注伊文氏蓝染料后处死动物，取脑标本检查。结果：A、B和C组脑组织伊文氏蓝染色面积分别为3.80%、2.93%和24.83%，A、B组与C组之间存在显著差异（P＜0.01、P＜0.01）；C组镜下可见蛛网膜下腔、脑实质区有出血现象，A、B组则未见明显出血现象。结论：持续牵拉脑组织合并桥静脉切断可导致血脑屏障功能受损，通透性增加。术中应注重回流桥静脉的保护、减少脑组织牵拉，从而减少淤血性脑损害的发生。

膀胱移行细胞癌CD_(44)V_7/V_8表达的免疫组化研究

目的 :探讨CD4 4 V7/V8分子在膀胱移行细胞癌 (TCC)中的的表达及其临床意义。方法 :采用免疫组化S P法检测 4 2例新鲜TCC和 8例正常膀胱黏膜CD4 4 V7/V8的表达并分析与临床病理因素的关系。结果 :TCC组织CD4 4 V7/V8表达的阳性率及阳性强度均高于正常对照组 (P分别 <0 0 5和 <0 0 1)。CD4 4 V7/V8表达的阳性率随恶性程度升高 ,浸润深度增加 ,肿瘤基底直径增大及复发的出现而增加 (P <0 .0 5) ,与患者的年龄及肿瘤数目无关 (P <0 .0 5)。结论 :CD4 4 V7/V8分子检测可能对判断TCC的发展及评估预后提供依据。

鼻咽癌中FN、LN和Col.IV的免疫组化研究

本文采用免疫组化方法用纤维连接蛋白 (fibronectin,FN) ,层粘连蛋白 (laminin,L N) ,和 型胶原 (collagenIV,Col.IV)抗体对 5 4例鼻咽癌及 1例鼻咽鳞状上皮瘤的基底膜进行了研究。结果显示鼻咽鳞状上皮瘤中的基底膜呈连续线状 ,而鼻咽癌的癌巢周围基底膜通常是不完整的 ,呈断续甚至消失的改变。高分化鳞癌显示连续线状基膜 ,偶有中断。低分化腺癌则显示断续不完整的基膜 ,大圆型细胞癌、低分化鳞癌部分显示连续线状基膜 ,偶有中断。未分化癌的基膜显示断线和消失的改变 ,癌瘤中基底膜的分布情况与癌实质类型、间质结构以及间质中淋巴细胞、浆细胞数量、嗜银纤维分布类型有关。

一种检测药物镇痛作用和局部麻醉作用的简便方法

４－氨基吡啶（４－ＡＰ）２．６ｍｍｏｌ·Ｌ－１０．０２ｍＬｓｃ于小鼠颈背部可引起用后足爪搔抓注射部位的反应．以４－ＡＰｓｃ后５ｍｉｎ内发生搔抓鼠数为指标，观察不同药物对它的抑制作用．麻醉性镇痛药吗啡，哌替啶和芬太尼能明显抑制这一反应；弱镇痛药罗通定，安乃近，水杨酸钠和非镇痛药无效．局部麻醉药普鲁卡因，利多卡因或丁卡因与４－ＡＰ混合ｓｃ也可取消搔抓反应．结果表明这一方法可用于检测麻醉性镇痛药的镇痛作用和局麻药的局部麻醉作用．

人食管癌核基质抗体的免疫组化研究

用人食管癌组织提取核基质抗原,制备核基质抗体,采用免疫组织化学方法对食管癌、正常食管粘膜、食管粘膜异型增生、肺鳞癌、喉鳞癌、胃腺癌以及大鼠食管癌组织进行标记。结果显示食管癌核基质(Esophageal cancer nuclear matrix,ECNM)抗体在食管癌组织中表达有特异性,与正常食管粘膜及胃腺癌有非常显著差异,与食管异常增生、肺鳞癌、喉鳞癌差异明显,但与大鼠食管癌组织差异不明显。ECNM的表达,在不同分化程度的食管癌组织中无明显差异,在淋巴结转移阳性组高于淋巴结转移阴性组,提示抗ECNM抗体具有较好肿瘤特异性和组织学特异性,可作为食管癌的一项新标记物。核基质结构在细胞分化过程中相对稳定,对肿瘤转移有一定影响。

膀胱移行细胞CD_(44)V_7/V_8表达的免疫组化研究

目的 :探讨CD4 4V7/V8分子在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义。方法 :采用免疫组化S P法检测 42例新鲜膀胱移行细胞癌和 8例正常膀胱粘膜CD4 4V7/V8的表达情况并分析与临床病理因素的关系。结果 :CD4 4V7/V8表达位于膀胱肿瘤组织的胞膜、胞浆和间质内。肿瘤细胞CD4 4V7/V8表达的阳性率及阳性强度高于正常对照组 (P率 <0 .0 5、P强度 <0 .0 1) ,结合病理分级 ,临床分期及复发等情况进行比较分析 ,发现随恶性程度升高 ,浸润深度增加及复发的出现CD4 4V7/V8表达的阳性率增加 (P <0 .0 5 ) ,同时还发现该分子表达与患者年龄、肿瘤数目无关 (P >0 .0 5 ) ,与肿瘤基底直径有关 (P <0 .0 5 )。结论 :CD4 4V7/V8在膀胱移行细胞癌的恶性程度、肿瘤浸润、复发中起重要作用 。

大肠腺癌表皮生长因子受体的表达与淋巴结转移的关系

应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法，对７０例大肠腺癌的表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达与淋巴结转移的关系进行了研究。结果有淋巴结转移者ＥＧＦＲ呈强阳性和阳性表达分别是２４例（６８．５８％）和２例（５．７１％），无淋巴结转移者ＥＧＦＲ呈强阳性和阳性表达分别是９例（２５．７１％）和１７例（４８．５８％），有淋巴结转移者ＥＧＦＲ强阳性表达率显著地高于无淋巴结转移者（Ｐ＜０．０１），ＥＧＦＲ呈阳性和强阳性表达之和在两组病例中均为２６例（７４．２９％），表达率完全相同。结果提示大肠腺癌ＥＧＦＲ强阳性表达与淋巴结转移密切相关，这为选择手术方式和制定综合性治疗措施提供了指导。