翻转课堂联合PBL教学法在肾内科住院医师培训中的应用

在我国医学教育中,住院医师规范化培训(简称住培)是培养医生的主要方式,是住院医师知识理论与实际相结合的重要途径。肾脏内科是内科学的重要分支之一,该学科具有理论性强、实践性强等特点,发病机制抽象复杂,部分疾病没有特异的症状与体征等,认识理解及实践操作均存在一定的难度。此外,住院医师工作任务多而重,如何在有限的培训时间内,怎样提升学习积极性与培训效果。

糖尿病对肾小球内葡萄糖转运蛋白1表达的影响

目的通过肾小球系膜细胞培养及2型糖尿病动物模型来研究糖尿病对葡萄糖转运蛋白(GLUT)1的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖(HG)刺激12 h、24 h后提取RNA及蛋白。高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素诱导2型糖尿病肾病(DN)大鼠模型,随机分成对照(Control)组、DN组,记录大鼠体重、血糖,留取尿液、血清、肾脏组织进行生化指标、12脂氧化酶(12-LO)、GLUT1测定及组织病理等检查。结果在体外,HG刺激下肾小球系膜细胞内12-LO转录及蛋白水平均升高,而GLUT1转录及表达在HG刺激12 h后升高,24 h后下降。在体内,PAS染色显示DN组肾小球体积明显增大,系膜基质增生,囊腔裂隙变窄,肾小管管腔狭窄,肾小管肿胀。与Control组相比,DN组肾组织内12-LO表达明显升高,GLUT1表达明显下降(P<0.05)。免疫组化示DN组肾小球内12-LO表达显著增加,GLUT1表达显著降低(P<0.05)。结论DN条件下不同阶段肾小球内12-LO和GLUT1表达不完全同步,提示12-LO和GLUT1在DN肾小球损伤过程中可能既有致病作用,又有保护性作用。

胚胎脑片免疫荧光组织化学双重漂染技术在神经元发生研究中的应用

目的为更客观地观察胚胎脑神经祖细胞的增殖、分化和迁移,建立胚胎脑片免疫荧光组织化学双重漂染技术。方法灌流固定,取胚胎14天(E14)大鼠脑,低熔点琼脂糖包埋,振动切片机连续冠状切片,免疫荧光组织化学双重漂染,激光扫描共聚焦显微镜下观察。结果波形蛋白(Vimentin)和乙酰胆碱转移酶(ChAT)双阳性细胞呈黄色荧光,胞体位于脑室区,长突起呈放射状。ChAT阳性细胞呈红色荧光,除胞体位于脑室区,长突起呈放射状伸展外,可见皮层板区也有阳性细胞集聚。结论此项技术可直接观察到胚胎脑神经祖细胞和成神经细胞的完整形态,并通过免疫荧光组织化学方法鉴定其表型,从而阐明相互之间的关系。

组合型人工肾对血液透析患者中大分子毒素水平的影响

目的探讨组合型人工肾治疗方案对提高血液透析患者中大分子毒素的清除效果.方法以规律血液透析治疗的260例患者作为研究对象,其中,试验组130例,采用组合型人工肾治疗,血液透析2次/周,4 h/次,组合型人工肾治疗1次/周;对照组130例,采用单纯性血液透析治疗,3次/周,4 h/次.结果干预前,两组患者年龄、性别、原发病比例、血管通路、并发症、透析龄、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR)、体质量指数(BMI)和常见生化指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);随访2 a,试验组患者体内瘦素、hsCRP、PTH、IL-6、β2-MG和TNF-α等中大分子毒素的血清浓度和患者SBP、DBP、HR、心胸比(C/T)、左室质量指数(LVMI)、促红细胞生成素剂量(EPO)均低于对照组(均P<0.05);试验组患者血红蛋白(Hb)浓度、左心室射血分数(EF)、BMI均高于对照组(均P<0.05);生活质量(SF-36量表)总体得分试验组明显优于对照组(P<0.05),试验组患者具有明显的生存优势(P<0.05).结论组合型人工肾治疗方案可以有效清除患者体内的中大分子毒素,治疗效果明显优于单纯的血液透析患者.

中国吉林省地区朝鲜族和汉族健康人群维生素D受体ApaⅠ酶切位点基因多态性分布的研究

目的分析吉林省地区朝鲜族和汉族健康人群维生素D受体(vitamin Dreceptor,VDR)基因多态性的分布情况。方法应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和限制性片段长度多态性(restriction fragment length poly-morphism,RFLP)技术,对45名朝鲜族和37名汉族VDR基因多态性进行检测,并分析比较其基因型和等位基因的分布特征。结果45名朝鲜族人群中AA、Aa和aa基因型频率分别为22%(10/45名)、22%(10/45名)和56%(25/45名);37名汉族人群中AA、Aa和aa基因型频率分别为46%(17/37名)、14%(5/37名)和40%(15/37名),两组差异无显著性(χ2=5.25;P=0.072)。朝鲜族人群A和a等位基因频率分别为33%和67%;汉族分别为52%和48%,两者差异具有显著性(χ2=6.25;P=0.01)。结论吉林省地区汉族和朝鲜族健康人群维生素D受体基因型分布频率差异无显著性,而等位基因的分布频率差异显著。

血液透析诱发肝硬化肝性脑病1例

报道1例合并肝硬化的患者在规律血液透析中发生肝性脑病。文献回顾提示血液透析是肝硬化肝性脑病的诱发因素,通过及时识别高危患者,调整透析方案,可以预防透析中肝硬化肝性脑病的发生。

碳酸镧治疗终末期肾脏病高磷血症的Meta分析

目的系统评价碳酸镧治疗终末期肾脏病（ESRD）高磷血症的有效性及安全性。方法通过计算机检索Cochrane图书馆、MEDLINE、EMBASE、CNKI、万方数据库，文献检索起止时间为1996年1月至2011年12月。收集碳酸镧治疗ESRD高磷血症的随机对照试验（RCT），应用RevMan5．1软件对数据进行Meta分析。结果共纳入6篇文献，12个RCT，包括1688例患者。Meta分析结果显示，有效性分析：碳酸镧组血磷达标率与碳酸钙组相似[RR=1．00，95％CI（0．92～1．09），P=0．97]，高于安慰剂组[RR=4．69，95％CI（2．63～8．39），P〈O．01]（剂量≤1500mg）及[RR=18．92，95％CI（7．42～48．22），P〈0．01]（剂量〉1500mg）；碳酸镧组血钙磷乘积降低幅度与碳酸钙组相似[MD=-0．91，95％CI（-7．18—5．36），JP=0．781，大于安慰剂组[MD=-10．50，95％CI（-15．89—-5．10），P〈0．011。安全性分析：碳酸镧组高钙血症发生率低于碳酸钙组[RR=0．06，95％CI（0．01～0．72），P=0．03]。常见消化道不良反应中，碳酸镧组恶心【RR=1．80，95％CI（0．70—4．64），P=0．22]、呕吐[RR=3．94，95％CI（0．45—34．38），P=0．22]、便秘[RR=0．82，95％CI（0．49—1．37），P=0．45]发生率与碳酸钙组相似，与安慰剂相比，恶心[RR=1．55，95％Ct（0．50—4．78），P=0．44]、呕吐[RR=2．07，95％CI（0．38—11．30），P=0．40]发生率相似，便秘[RR=0．19，95％CI（0．06—0．59），P〈0．01]发生率低。结论应用碳酸镧治疗ESRD高磷血症的有效性与碳酸钙相似；与碳酸钙治疗组相比，碳酸镧治疗组高钙血症发生率较低，恶心、呕吐、便秘等常见消化道不良反应发生率相似。

PCSK9对C57BL／6小鼠肾组织脂质平衡及损伤的作用

目的评估PCSK9（proprotein convertase subtilisin kexin type 9）对C57BL／6小鼠。肾脏组织脂质平衡的影响以及损伤作用。方法12周龄的C57BL／6野生型小鼠和系统性敲除PCSK9基因小鼠通过代谢笼收集24h尿，经心全身灌注，取出肾脏。采用ELISA方法检测尿微量白蛋白、血尿肌酐、血总胆固醇、肾组织内总胆固醇和甘油三酯水平，BODIPY 493／503染色，透射电镜（TEM）观察。肾组织内脂质蓄积；PAS染色、TUNNEL染色以及qPCR和Western印迹法评估肾组织损伤及细胞凋亡。结果与C57BL／6野生型对照组相比，PCSK9 KO组肾组织内总胆固醇及甘油三酯水平升高（均P〈0．05），BODIPY 493／503染色显示。肾小球及。肾小管细胞内脂质染色明显加深，TEM提示肾小管细胞内脂滴数目显著增多。系统性敲除PCSK9基因小鼠较C57BL／6野生型对照组尿微量白蛋白／尿肌酐升高（P〈0．05），Podocin和Nephrin的转录水平下降（均P〈0．05），TEM可见肾小球内足细胞足突变短、不同程度的融合。与野生型对照组相比，PCSK9 KO组小鼠肾组织内Bax和Cleaved Caspase3表达升高，Bcl-2表达下降（均P〈0．05）。结论PCSK9表达下降增加肾组织细胞内脂质蓄积，继而诱导肾固有细胞的损伤和凋亡。

PCSK9对足细胞脂质稳态和细胞损伤的作用及机制

目的:探讨前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)对足细胞脂质稳态和细胞损伤的影响及其作用机制。方法:选取12周龄C57BL/6野生型小鼠(对照组,n=10)和系统性敲除PCSK9基因型小鼠(PCSK9 KO组,n=10)为动物模型,经心脏全身灌注后取肾组织。体外培养小鼠足细胞,用干扰小RNA(siRNA)敲低足细胞PCSK9的表达。用荧光染料BODIPY 493/503染色法观察小鼠肾组织肾小球及体外培养足细胞内的脂质蓄积程度;透射电子显微镜观察足细胞的足突、线粒体结构和脂滴大小及其分布;TUNEL染色法评估肾小球内的细胞凋亡;实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹法检测线粒体功能相关关键酶过氧化物酶体增殖物激活受体C辅激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor-C coactivator 1α,PGC-1α)、肉毒碱棕榈酰转移酶1(carnitine palmitoyltransferase 1,CPT-1)、乙酰辅酶A氧化酶1(acetyl CoA oxidase 1,Acox-1),以及凋亡相关指标的mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组相比,PCSK9 KO组小鼠肾小球内脂质蓄积更显著;肾组织内线粒体功能相关关键酶PGC-1α蛋白和mRNA相对表达量均显著降低,CPT-1和Acox-1的mRNA相对表达量也均显著降低(均P<0.05);肾小球足细胞内线粒体肿胀、嵴消失,足细胞的足突部分融合、消失;肾小球内细胞凋亡指数增加(P<0.05)。与对照组比较,体外培养的PCSK9 siRNA组足细胞内脂质蓄积显著,线粒体功能相关关键酶PGC-1α、CPT-1和Acox-1的mRNA相对表达量下降,线粒体结构受损,细胞凋亡指数增加(均P<0.05)。结论:PCSK9参与足细胞的脂代谢平衡,PCSK9表达减少增加足细胞内脂质沉积,诱导线粒体结构及功能受损,导致细胞凋亡。