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基于CRISPR/Cas12a的室温稳定鼠疫耶尔森氏菌检测体系的建立
被引量:
1
1
作者
任一帆
吴耿珊
+6 位作者
王桐
张源
曹诗洋
谭亚芳
陈红艳
郭晓
杜宗敏
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期419-425,共7页
目的筛选并优化冻干保护剂组合,建立可室温稳定储存的、不影响试剂检测灵敏度的Cas12a鼠疫菌核酸检测冻干体系,为其应用于动物鼠疫监测的现场快速检测奠定基础。方法以鼠疫耶尔森氏菌pla基因为靶基因,选择9种常用冻干保护剂加入核酸检...
目的筛选并优化冻干保护剂组合,建立可室温稳定储存的、不影响试剂检测灵敏度的Cas12a鼠疫菌核酸检测冻干体系,为其应用于动物鼠疫监测的现场快速检测奠定基础。方法以鼠疫耶尔森氏菌pla基因为靶基因,选择9种常用冻干保护剂加入核酸检测试剂中,筛选有明显保护效果的4种保护剂进行优化。按照正交实验设计原则设计保护剂组合,通过37℃加速破坏实验及26℃室温稳定性实验对复合保护剂进行保护效果和灵敏度评价。结果加入蔗糖、山梨醇和海藻糖3种保护剂的冻干检测体系可在37℃稳定存放2周。室温下存放3个月后体系检测信号强度与37℃加速破坏1周时基本相当,同时检测方法的灵敏度依然能达到10-5 ng/μL,说明Cas12a检测试剂加入筛选得到的保护剂冻干后,可在室温下稳定保存至少6个月。结论本研究构建的室温稳定CRISPR/Cas12a鼠疫菌检测体系可在室温下稳定存放至少半年,能够满足鼠疫菌现场快速检测中对试剂稳定性的需求。同时,本研究获得的复合保护剂组分对构建其它室温稳定CRISPR/Cas12a核酸检测体系具有重要参考价值。
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关键词
稳定性
鼠疫耶尔森氏菌
Cas12a
冻干保护剂
核酸检测
下载PDF
职称材料
题名
基于CRISPR/Cas12a的室温稳定鼠疫耶尔森氏菌检测体系的建立
被引量:
1
1
作者
任一帆
吴耿珊
王桐
张源
曹诗洋
谭亚芳
陈红艳
郭晓
杜宗敏
机构
军事医学研究院微生物流行病研究所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期419-425,共7页
基金
国家自然科学基金(No.32070136)。
文摘
目的筛选并优化冻干保护剂组合,建立可室温稳定储存的、不影响试剂检测灵敏度的Cas12a鼠疫菌核酸检测冻干体系,为其应用于动物鼠疫监测的现场快速检测奠定基础。方法以鼠疫耶尔森氏菌pla基因为靶基因,选择9种常用冻干保护剂加入核酸检测试剂中,筛选有明显保护效果的4种保护剂进行优化。按照正交实验设计原则设计保护剂组合,通过37℃加速破坏实验及26℃室温稳定性实验对复合保护剂进行保护效果和灵敏度评价。结果加入蔗糖、山梨醇和海藻糖3种保护剂的冻干检测体系可在37℃稳定存放2周。室温下存放3个月后体系检测信号强度与37℃加速破坏1周时基本相当,同时检测方法的灵敏度依然能达到10-5 ng/μL,说明Cas12a检测试剂加入筛选得到的保护剂冻干后,可在室温下稳定保存至少6个月。结论本研究构建的室温稳定CRISPR/Cas12a鼠疫菌检测体系可在室温下稳定存放至少半年,能够满足鼠疫菌现场快速检测中对试剂稳定性的需求。同时,本研究获得的复合保护剂组分对构建其它室温稳定CRISPR/Cas12a核酸检测体系具有重要参考价值。
关键词
稳定性
鼠疫耶尔森氏菌
Cas12a
冻干保护剂
核酸检测
Keywords
stability
Yersinia pestis
Cas12a
lyophilization protectant
nucleic detection
分类号
R378.6 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于CRISPR/Cas12a的室温稳定鼠疫耶尔森氏菌检测体系的建立
任一帆
吴耿珊
王桐
张源
曹诗洋
谭亚芳
陈红艳
郭晓
杜宗敏
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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