微小RNA-769-3p对KSHV感染的神经细胞SH-SY5Y的增殖和迁移能力的影响

目的探讨微小RNA-769-3p(miR-769-3p)对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染的神经细胞SH-SY5Y(SK-RG)增殖及迁移方面的作用。方法将SK-RG细胞分为NC mimics转染组(转染NC mimics)、miRNA-769-3p mimics转染组(转染miRNA-769-3p mimics)、miRNA-6815-5p mimics转染组(转染miRNA-6815-5p mimics)、miRNA-6874-3p mimics转染组(转染miRNA-6874-3p mimics)和miRNA-7974 mimics转染组(转染miRNA-7974 mimics)。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mTOR)mRNA和蛋白的表达水平,用双荧光素酶报告基因实验检测miR-769-3p对mTOR的靶向调控,用噻唑蓝法和平板克隆实验检测细胞的增殖情况,用划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移情况。结果SK-RG细胞中NC mimics转染组、miRNA-769-3p mimics转染组的mTOR蛋白相对表达水平分别为1.00±0.06和0.60±0.04,细胞第5天的增殖率为4.15±0.14和3.36±0.17,克隆形成数分别为(82.67±3.51)和(53.00±3.61)个,相对迁移率分别为1.00±0.01和0.66±0.01,迁移细胞数分别为(174.30±5.86)和(131.00±5.29)个,miRNA-769-3p mimics转染组的上述指标与NC mimics转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-769-3p可能通过靶向抑制mTOR的表达而降低SK-RG细胞的增殖和迁移能力,提示miR-769-3p可能作为治疗KSHV感染的小分子核酸药物。

2020年新疆生产建设兵团第八师女性HPV感染亚型分析

宫颈癌(cervical cancer,CC)是一种严重危害女性身体健康的常见恶性肿瘤[1]。高危型人乳头瘤病毒(high risk human papilloma virus,hr HPV)是宫颈癌的主要病原体,子宫颈持续性hrHPV感染是发生宫颈癌的主要原因[2-3]。早期发现和预防已被证明可以成功地减缓宫颈癌前病变的进展[4]。

干扰mTOR对HHV-8感染的神经细胞SH-SY5Y的增殖和迁移能力的影响

目的研究干扰mTOR对人类疱疹病毒8(HHV-8)感染的神经细胞SH-SY5Y的增殖和迁移能力的影响。方法通过Western blot实验和qRT-PCR法验证HHV-8感染的SH-SY5Y神经细胞的mTOR表达水平。采用Lipofectamine 2000分别将si-mTOR与si-NC转染进KSHV感染的SH-SY5Y细胞中,采用Western blot和qRT-PCR技术检测转染效率;qRT-PCR检测HHV-8病毒相关因子LANA、RTA、K8.1的mRNA表达水平;采用CCK-8法和划痕实验检测细胞增殖和迁移能力;利用PI染色结合流式细胞术检测细胞周期;采用Western blot检测周期相关蛋白cyclin D1和p27的表达。结果Western blot和qRT-PCR结果显示HHV-8感染的SH-SY5Y细胞中mTOR的表达水平高于SH-SY5Y细胞(P<0.05)。在干扰mTOR的HHV-8感染的SH-SY5Y细胞中,HHV-8病毒相关因子LANA、RTA、K8.1的表达水平均降低(P<0.05)。CCK-8和划痕实验结果表明干扰mTOR组细胞增殖、迁移能力低于对照组(P<0.05)。流式细胞术结果提示干扰mTOR组的细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05)。Western blot结果显示cyclin D1表达水平降低,p27表达水平升高(P<0.05)。结论干扰mTOR能够降低HHV-8感染的SH-SY5Y细胞的增殖和迁移能力,并将其细胞周期阻滞在G0/G1期,针对mTOR的靶向调控在治疗HHV-8感染引起的神经系统疾病有一定的作用。