HPLC法同时测定穿山甲炮制品中3个主要环二肽成分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定炮山甲中3个成分L-丝-L-酪氨酸环二肽、D-丝-L-酪氨酸环二肽、L-甘-L-酪氨酸环二肽的含量。方法:采用赛分Sepax Bio-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%TFA乙腈-0.1%TFA水(2∶98)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长210 nm。并以3种环二肽为指标,使用SPSS 22.0软件对40批样品进行聚类分析。结果:3个环二肽分离良好,L-丝-L-酪氨酸环二肽、D-丝-L-酪氨酸环二肽、L-甘-L-酪氨酸环二肽进样量分别在0.056~2.244μg(r=0.999 9)、0.061~2.452μg(r=0.999 7)、0.059~2.348μg(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系。加样回收率分别为101.8%、98.1%、95.7%,相应的RSD分别为0.76%、2.2%、2.6%;40批样品中3个成分的含量范围分别为0.007 0%~0.23%,0.005 0%~0.14%,0.008 0%~0.18%,盐类增重对环二肽含量有显著影响,聚类分析将其分为3类。结论:本方法准确可靠,适用于炮山甲中环二肽成分的含量测定。