超声场对固定化木瓜蛋白酶的影响研究

用壳聚糖-海藻酸钠固定化木瓜蛋白酶后,超声处理固定化酶能够提高其活力,但对其最适温度与最适pH没有影响。研究了超声温度、超声时间、超声频率及超声强度对固定化酶活力的影响,单因素实验表明,在水浴温度50℃,135kHz,0.45W/cm2条件下超声50min时,酶活力提高最为显著,较未经超声处理的固定化木瓜蛋白酶活力提高了25.85%。研究低频槽式超声处理的固定化酶的动力学,结果显示超声处理使Km值降低,与未经超声处理的固定化木瓜蛋白酶Km值相比下降了31.83%,接近游离酶的Km值,Vmax值升高了8.35%。结果表明,超声场使酶与底物的亲和力增加。

表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在超声场中热稳定性的动力学

研究弱酸环境下pH值对表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)的影响,以及在非超声场和0.25W/cm2、135kHz超声场中EGCG的稳定性,利用高效液相色谱对其进行定量分析。结果显示:温度为20℃、相同pH值时超声场中EGCG的稳定性均低于非超声场;pH6.2、超声40min时EGCG的损失率为10.70%,是非超声场的5.63倍。通过线性回归计算,确定EGCG在非超声场及超声场中的反应均符合一级反应动力学规律。超声场中,EGCG的反应速率常数为0.00228min-1,是非超声场的4.3倍;反应活化能为22861.13kJ/mol,比非超声场降低了14.0%;指前因子为28.30s-1,比非超声场提高了13.5%。