加速溶剂萃取-气相色谱/质谱法测定灯盏花及其土壤中阿特拉津和二甲戊乐灵残留

建立了加速溶剂萃取（ASE）-气相色谱/质谱法（GC/MS）同时测定灯盏花及其土壤中阿特拉津和二甲戊乐灵2种除草剂的农药残留。样品采用丙酮-二氯甲烷（1∶1,V/V）加速溶剂萃取,弗罗里硅土柱层析净化,用GC/MS选择离子监测（SIM）法测定。结果表明,2种除草剂在0.05~2.00mg/L范围内线性良好,相关系数分别为0.9987~1.0000（灯盏花）,0.9880~0.9980（土壤）;在0.1、0.5和1.0mg/L添加水平下,2种除草剂在灯盏花及其土壤中的平均回收率分别为67.38%~104.02%和71.69%~105.58%,相对标准偏差（RSD）分别为3.21%~13.48%和2.65%~18.26%,方法的检出限（LOD）在灯盏花中为3.00~4.10ng/g,在土壤中为1.50~2.50ng/g。应用该法成功测定了云南省灯盏花及其土壤样品中2种除草剂残留。

灯盏花雄性不育种质鉴定与花药发育的细胞学研究

对云南泸西栽培灯盏花群体进行调查,发现了灯盏花雄性不育种质个体,其出现频率约为1.06×10-4。对所发现的灯盏花不育株形态特征及其花药发育过程进行了观察,并对花粉活力进行鉴定。结果显示:(1)灯盏花不育株根、茎、叶形态与正常可育植株基本相似,管状花小,花丝短,花药瘦小,无花粉粒散出或花粉无活力。(2)灯盏花在其花药发育的小孢子母细胞时期、四分体时期、小孢子时期和单核早期,由于绒毡层细胞液泡化、提前解体,不能为小孢子或花粉发育提供所需物质,导致小孢子母细胞和四分体解体,产生无花粉的花药;或小孢子和单核花粉胞内降解,形成不同形状和外壁纹饰的败育花粉。研究认为,灯盏花花药绒毡层异常是其花粉败育的主要原因。

红河灯盏花GAP基地环境质量评价

目的评价灯盏花GAP基地环境质量,为灯盏花SOP的制定和GAP基地建设提供依据。方法测定了红河灯盏花GAP基地的大气、水和土壤环境指标,所生产药材的灯盏乙素含量、重金属含量和农药残留量,并采用单项污染指数法和综合污染指数法进行环境质量评价。结果红河灯盏花GAP基地大气环境达到大气环境质量(GB3095-1996)二级标准,灌溉水质量达到农田灌溉水质量标准(GB5084-1992),土壤环境达到土壤质量(GB15618-1995)二级标准;所生产的药材灯盏乙素含量稳定,重金属含量和农药残留量均达到WM2-2001药用植物及制剂出口绿色行业标准。结论红河灯盏花GAP基地环境质量好,符合中药材生产质量管理规范的环境质量要求。

云南灯盏花种质资源的考察与采集

目的 考察云南灯盏花种质资源状况.方法 对云南省灯盏花主要分布区的9个州（市）29个县的灯盏花种质资源分布状况进行调查,并对灯盏花的生境和生物学性状进行评价.结果 灯盏花种质资源分布在年平均气温为5.4℃～18.6℃,海拔1 630～3 280 m的坡地.滇西北生长的灯盏花植株生长茂盛,具有植株高,分枝数多和叶片数多的特点.通过采集,建立了灯盏花种质资源圃.结论 云南灯盏花种质资源分布稀少,需要加强资源保护,通过人工种植等方式保证灯盏花资源的可持续利用.

AFLP标记对灯盏花遗传多样性及选育品系群体一致性的分析

目的:对灯盏花群体种质资源进行分析,为灯盏花的品种选育提供依据。方法:用筛选出来的11对引物对采自云南泸西、昆明、大理、丘北、石林的6份灯盏花种质资源进行AFLP遗传多样性分析。结果:①11个引物在6份种质资源中共产生636条DNA片段,其中604条带为多态性条带,约占82.40%。②在相似系数为0.706时,6份不同地区的灯盏花可聚为3类,第1类包括千山1号和千山2号大部分样品及大理、石林、昆明3个地区的野生居群;第2类为丘北的野生居群;第3类主要为部分千山2号及其他地区样品。千山1号和千山2号灯盏花平均遗传相似系数大,遗传相似系数变幅小,品系内遗传分化较小,遗传性状较稳定;③对6份灯盏花样品的分子系统聚类分析表明:地理来源相同的部分有相对聚合现象或少部分品系出现交差聚类,与其亲缘关系较近有关;丘北居群自行一类,与其特异的遗传基础差异较大有关。结论:AFLP对灯盏花的遗传多样性分析具有可靠性;系统选育对灯盏花的育种具有可行性。