吉西他滨治疗膀胱癌的自体荧光光谱特征及其临床疗效分析

目的探讨吉西他滨治疗膀胱癌的效果并分析其自体荧光光谱特征。方法选取2016年8月-2017年8月我院收治的膀胱癌患者94例,根据治疗方法不同分成两组,对照组应用顺铂治疗,研究组应用吉西他滨治疗。对比两组患者的临床疗效、治疗前后的肿瘤直径、荧光强度以及不良反应发生率。结果研究组临床疗效显著优于对照组(P<0.05);治疗后研究组患者的肿瘤直径显著小于对照组(P<0.05);研究组患者不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05);治疗后,研究组患者的膀胱癌荧光强度显著高于对照组(P<0.05)。结论应用吉西他滨治疗膀胱癌疗效显著,并可通过检测荧光强度来提高诊断准确性,二者联合有助于减小肿瘤直径和不良反应,安全性较好,值得在临床上推广应用。

IGHG1基因对膀胱癌细胞增殖凋亡及迁移的影响

目的探讨沉默IGHG1基因对膀胱癌EJ细胞增殖、凋亡及迁移的影响。方法将靶向沉默IGHG1基因的慢病毒载体(LV-IGHG1-RNAi)感染EJ细胞,构建稳定沉默IGHG1基因的EJ细胞(sh IGHG1-EJ细胞)作为实验组;将阴性对照序列(NC)慢病毒载体感染EJ细胞,构建稳定转染NC序列的NC-EJ细胞作为阴性对照组;未转染膀胱癌EJ细胞作为空白对照组。用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测细胞IGHG1 m RNA的相对表达量,Western blot检测细胞Ig G、Caspase-3和Caspase-3剪切片段蛋白的表达,CCK-8法检测细胞的增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞的凋亡,细胞划痕实验检测细胞的迁移。结果 sh IGHG1-EJ细胞转染率为(76.667±0.042)%,NC-EJ细胞转染率为(75.333±0.055)%。q RT-PCR、Western blot检测结果显示,与空白对照组相比,sh IGHG1-EJ细胞IGHG1 m RNA和Ig Gγ蛋白表达量降低(P<0.05),sh IGHG1-EJ细胞IGHG1基因被沉默。CCK-8法结果显示,与空白对照组相比,sh IGHG1-EJ细胞增殖降低(P<0.05);FCM和Western blot检测结果显示,与空白对照组相比,sh IGHG1-EJ细胞凋亡率增加(P<0.05),且在17 k D处出现Caspase-3剪切片段;细胞划痕实验结果显示,sh IGHG1-EJ细胞迁移能力仅为EJ细胞的36%(P<0.05);同时NC-EJ细胞在增殖、凋亡及迁移方面与EJ细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EJ细胞经慢病毒载体沉默IGHG1基因后,细胞增殖和迁移水平降低,细胞凋亡率增加。

活化诱导胞嘧啶核苷酸脱氨酶对膀胱癌T24细胞表型的影响

目的探讨AID(活化诱导胞嘧啶核苷酸脱氨酶)在人体膀胱癌、癌旁组织中的表达情况以及AID对膀胱癌细胞株T24增殖、侵袭、迁移以及凋亡的影响。方法运用Western bolt以及免疫组织化学染色法检测16例临床膀胱癌组织以及癌旁组织中AID的相对表达量;将携带有抑制AID表达的shRNA序列(shAICDA-T24组)或空载序列(NC-T24组)以慢病毒为载体对T24细胞进行感染,利用Western bolt对T24、NC-T24以及shAICDA-T24组进行AID表达量的检测;因为转染后的多克隆细胞株AID的表达抑制效果有限,随后我们对转染的T24细胞进行单克隆细胞筛选,通过Western bolt结果选取抑制效果最明显的组别用于后续试验;然后运用细胞增值试验(CCK8)、流式细胞术(凋亡)、细胞划痕实验以及细胞小室实验(Transwell)检测抑制AID的表达对T24细胞增殖、凋亡、侵袭以及迁移的影响。结果人体膀胱癌组织中存在AID的表达,并且膀胱癌组织中AID的表达显著高于癌旁组织(P<0.05);通过RNA干扰技术(RNAi)抑制AID的表达可显著降低膀胱癌细胞株T24的增殖、侵袭和迁移能力,并且增加了T24细胞的凋亡率(P<0.05)。结论抑制AID的表达可显著降低T24细胞增殖、侵袭以及迁移能力,并且增加T24细胞的凋亡,其表达可能与膀胱癌的进展具有相关性。

膀胱癌组织自体荧光特征分析及其机制研究

目的:分析膀胱癌组织自体荧光光谱特征及其与正常组织的差异;探讨大鼠膀胱正常组织和癌组织中Ⅳ胶原和组织蛋白酶B的表达差异和相关性。方法:采集了47例膀胱癌组织和47例正常组织的自体荧光光谱,分析其荧光光谱差异及其特征。用免疫组化染色的方法检测正常组、膀胱癌组各25例组织标本中Ⅳ胶原和组织蛋白酶B的表达,比较各组间差异,并进行相关性分析,同时检查组织蛋白酶B mRNA的表达状况。结果:94标本共采集了300~800nm波长范围的癌组织和正常组织自体荧光光谱,发现正常组织的荧光强度在任意波长下均高于癌组织,正常组织的峰强度明显高于癌组织(P<0.05)。免疫组化染色显示正常组、癌组中的基底膜均有Ⅳ胶原表达,但膀胱癌组织中表达减少,与正常膀胱组织组比较,差异有显著性(P<0.05)。组织蛋白酶B在膀胱癌组织中表达较正常膀胱组织表达增加,差异有显著性(P<0.05)。结论:膀胱正常组织、癌组织的自体荧光光谱特征存在差异;在膀胱正常组织及癌组织中,大鼠膀胱癌组织中Ⅳ胶原表达减少;大鼠膀胱癌组织中组织蛋白酶B表达增加,可能导致两组组织的自体荧光差异的原因之一。

双侧肾盂弥漫大B细胞淋巴瘤1例报道

肾盂弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL)是极为罕见的肾盂肿瘤,其临床表现缺乏特异性,与肾盂尿路上皮癌高度相似,通常只有在活检或手术切除的病理检查后才能做出诊断。本文就收治的1例双侧肾盂DLBCL病例进行报道并复习相关文献,旨在为DLBCL临床诊治提供一定思路和建议。患者,女,76岁,因“无痛性肉眼血尿4 d”入院。入院查体:双肾及输尿管走行区无压痛及叩痛,膀胱区无压痛。

RNAi抑制PSA表达对前列腺癌22RV1细胞增殖和侵袭力的影响

目的研究PSA表达对去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞增殖和侵袭的影响。方法构建含有针对PSA基因特异性短发夹RNA(shRNA,分别为shPSA1、shPSA2、shPSA3、shPSA4)和阴性对照序列(NC)的慢病毒载体并由慢病毒颗粒包装后,分别感染去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞并筛选稳定表达PSA特异性shRNA的shPSA1-、shPSA2-、shPSA3-、shPSA4-和表达NC序列的NC-22RV1细胞。分别应用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测shRNA对22RV1细胞中PSA mRNA及蛋白表达的影响;采用CCK-8法、Transwell侵袭试验和流式细胞术检测PSA基因沉默后的22RV1细胞增殖、侵袭和凋亡情况。结果与NC-22RV1细胞相比,shPSA3-22RV1细胞的基因和蛋白表达水平的沉默效果最好;shPSA2组在24、48、72h的吸光度值分别为(0.156 4±0.022 5)、(0.243 8±0.035 8)、(0.364 1±0.020 5),shPSA3组分别为(0.106 9±0.012 0)、(0.158 8±0.019 2)、(0.253 4±0.028 9),与NC组比较差异均有统计学意义(P<0.01);shPSA1、shPSA2、shPSA3组侵袭力分别为NC组的77.35%(P=0.002)、54.35%(P<0.001)、42.21%(P<0.001);shPSA2、shPSA3组凋亡率分别为(27.97±4.28)%(P=0.001)、(43.03±3.19)%(P<0.001),高于NC组[(16.77±0.59)%]。结论 PSA具有促进去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞的增殖和侵袭效应,抑制PSA表达后前列腺癌22RV1细胞凋亡增加。

肿瘤微环境中ROS介导IgG表达对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨肿瘤微环境(TME)中活性氧(ROS)介导免疫球蛋白G(IgG)表达对膀胱癌EJ细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:临床收集的18例膀胱癌患者样本,通过Western blot法检测膀胱癌和癌旁正常组织样本中IgG表达量。利用免疫荧光染色(IF)技术分别对膀胱癌组织和癌旁正常组织中ROS和IgG分子进行共定位和相对定量分析。将活性氧清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)加入膀胱癌细胞EJ中,实验分为3组:空白组(EJ细胞)、阴性对照组(EJ+PBS)、实验组(EJ+PBS+NAC),10 m M NAC药物处理48小时后,运用DHE-ROS荧光探针技术和Western blot实验检测药物NAC对ROS和IgG相对表达水平的影响;通过克隆集落形成实验、划痕实验、Transwell实验检测去除ROS后对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果:人体膀胱癌组织中ROS和IgG分子表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.001);荧光显微镜显示膀胱肿瘤组织中正常膀胱尿路上皮细胞组织被肿瘤细胞严重破坏,结构紊乱不规则,IgG和ROS表达水平均升高,而癌旁组织膀胱尿路上皮组织的结构均匀规则;NAC药物处理EJ细胞后,与空白组和阴性对照组相比ROS和IgG表达显著降低,同时实验组细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显下降(P<0.01)。结论:ROS和IgG在临床膀胱癌组织和体外膀胱癌细胞株EJ中均显著高表达,在肿瘤微环境中ROS通过调控IgG表达,从而促进膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭。ROS和IgG可能成为膀胱癌早期诊断和生物治疗的临床新靶点。