脂蛋白肾病一例报道及其超微结构分析

[目的]报告一例脂蛋白肾病,并分析其超微结构特点.[方法]分析脂蛋白肾病患者的临床表现、实验室结果,以及肾活检病理检查结果.[结果]该病例经病理检查,结合临床特点证实为脂蛋白肾病.[结论]诊断脂蛋白肾病除根据临床表现外,还应结合光镜病理和超微病理特征,而毛细血管袢中广泛性脂蛋白栓子形成及ApoB、ApoE染色阳性,是诊断的关键依据.

吗啡依赖大鼠背根节神经元胞体的光镜和电镜定量研究

在吗啡依赖条件下 ,观察了脊髓 板层发生轴突终末侧支生芽和建立新突触的背根节神经元的胞体是否出现相应的形态变化。应用光镜体视学方法 ,结合电镜观察和测量 ,比较吗啡依赖组与对照组背根节体积及其神经元胞体、胞核、核仁、粗面内质网和线粒体的体积变化。结果显示 :吗啡依赖组背根节体积与对照组比较未发现差异 ,背根节内的亮、暗两类神经元的胞体、胞核、核仁体积以及胞质内粗面内质网和线粒体体积也无显著性差异。结果表明 。

改良电镜固定方法对腹膜表面活性层的保护

有研究提示在腹膜表面有一层液体滞留层,它们粘附于腹膜表面,对腹膜的运转功能有十分重要的作用,尽管对腹膜表面液体层有种种猜测,在形态学方面这一活性层的存在却迟迟未能被证实。本文介绍使用了改良的固定方法,在透射电镜下第一次观察到了该活性层的存在。

基于局部Fisher判别法的电镜下致密沉积物自动识别（英文）

本文提出一种在电子显微镜图像中有效检测致密沉积物的方法。致密沉积物在电子显微镜图像中较难分辨,使用传统的SIFT,ORB或者SURF特征检测及描述算法往往难以达到理想的效果。运用传统计算机视觉处理流程,如,SIFT特征提取器以及描述器来进行特征提取,再建立bag-of-words全局特征向量,最后使用支持向量机来进行分类,在进行致密沉积物的分类操作中难度比较大。本文选择了实用LBP特征提取器来提取高反差度的纹理特征,使用梯度直方图特征提取器来提取轮廓特征,同时使用Schimid滤波器组和Gabor滤波器组来提取图像中的常规纹理特征,形成超高维度的特征向量使其包含显微镜图像中的全面特征。由于电子显微镜图像不具备色彩信息,纹理信息变得最为重要,又由于在显微镜图像中,尺度基本可知,LBP以及HOG能非常有效地提取高反差轮廓特征以及质地特征。配合两大纹理滤波器组合将可以确保特征向量在强调高反差特征的同时,不会忽略常规纹理信息。在特征提取出来后使用局部Fisher判别分析来降低特征向量的维度,并选择最具有可区分性和有效的特征。LFDA能够进行无指导的降维,并保留最具可分辨性的特征,对于本文提出的算法至关重要。由于在之前产生的特征向量对所有的特征并不进行强弱区分,经过LFDA后,不重要或者具有广泛普遍性的特征将会被舍弃,而最能够代表致密沉积物的特征将得以保留。这保证了之后的分类器训练能够在不牺牲训练速度的前提下,有效地形成分类区间。最后,算法使用了probabilistic boosting tree来对训练样本进行训练,PBT是按照等级划分的决策树,每一个节点是一个强决策器,它具有不易过度训练、高效准确的特征,通过输入LFDA处理后的训练样本特征向量,来学习得到致密沉积物的分类器。为验证本文提出的方法的可行性,一个包含50张电子显微镜图像的数据库被用于实验中。在这50张电子显微镜图像中,每一张都包含不同数量的沉积物区域。沉积物区域的总数约为500处。这些区域被精确标记。如果算法输出的沉积物标记与人工标记区域的重合率达到50%以上,认为该区域被准确识别,否则认为未能识别。在实验中,10张电子显微镜图像被用于神经网络的训练,而其余40张被用于测试。训练样本为100×100分辨率的图像块,只要图像块中包含沉积物区域,则视为正样本,否则视为负样本。为了增加样本个数,所有正样本被进行了旋转、平移、以及放大和缩小等变换。在训练中,一共500个正样本及约15 000个负样本被输入到PBT。实验结果显示,本文提出的方法能够有效地在真实电子显微镜图像中识别致密沉积物,识别效率接近50%。该结果证明利用LBP特征以及Schimid滤波器组和Gabor滤波器组来提取显微镜图像特征能够全面概括图像中个体的显著性特征,比起单纯使用SIFT以及SURF具有更高的通用性、鲁棒性以及有效性。对于从显微镜图像中提取出来的高维度特征向量,使用局部Fisher判别分析法能够非常有效地实施降维操作,从而保留了显著性的具有区分功能的特征以便更有效的训练分类器。而probabilistic boosting tree对于只具有少量训练样本的训练任务能够相当有效地收敛且避免过度拟合的情况发生。本文提出的处理流程适用于大多数基于显微镜图像下的目标识别、分类以及再识别任务,且具有速度快、高鲁棒性以及易于扩展等特点,具有较高的实用性。

线状体肌病一例报告及超微病理分析

本文报道一例线状体肌病超微病理分析。电镜观察可查见约80%肌纤维细胞胞浆内有大量的线状体积聚,线状体积聚区域形成空区,呈现灶状肌节结构消失,肌丝松解、紊乱或断裂等超微结构病变,并结合文献复习,探讨了线状体肌病的临床与超微病理的相关性。

小柴胡汤对荷瘤鼠S_(180)细胞生长和结构影响的研究

目的：通过体内实验，探讨小柴胡汤（ＸＣＨＴ）浸膏对荷瘤鼠Ｓ１８０的抑制作用。方法：采用透射电镜观察小柴胡汤对瘤细胞生长和结构的影响。结果：高、中和低浓度ＸＣＨＴ（１０００ｇ·Ｌ－１、５００ｇ·Ｌ－１、２５０ｇ·Ｌ－１）溶液治疗后，对荷瘤鼠Ｓ１８０细胞均有明显抑制作用，抑瘤率４０１９％～５８７３％，其中以高浓度组疗效最佳。同时可见经ＸＣＨＴ治疗后各组Ｓ１８０细胞均出现凋亡的特征，表现为细胞体积变小，核固缩，胞浆和核染色质凝集，密度增高，细胞间有大量凋亡小体，其中以低浓度组为甚，而高浓度组Ｓ１８０细胞则以坏死为主。结论：ＸＣＨＴ对荷瘤鼠Ｓ１８０有明显抑制作用，可诱导Ｓ１８０细胞凋亡及坏死，其中瘤细胞以哪种死亡方式为主。

左炔诺孕酮宫内缓释系统治疗子宫内膜增生过长的疗效

【目的】观察左炔诺孕酮宫内缓释系统 (Mirena)治疗无排卵型功能失调性子宫出血 (下简称功血 )的疗效及其对增生过长的子宫内膜病理学及超微结构的影响。【方法】对 2 5例年龄 30岁～ 5 1岁 ,确诊为无排卵型功血并有子宫内膜增生过长 ,已无生育要求的病例 ,于月经第 4～ 7天放置左炔诺孕酮宫内缓释系统 (Mirena)治疗。【结果】置环后患者月经量明显减少 ,多数表现为点滴出血 ,置环 3个月和 6个月复诊时月经量已较置环前减少 2 /3及以上 ,与置环前相比 ,PBAC法月经评分显著下降 (P <0 0 1)。置环后 6个月复查 ,患者血红蛋白基本恢复正常 ,与置环前比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。置环前子宫内膜厚度为 (8.5± 3.5 )mm ,置环 6个月子宫内膜厚度为 (3.5± 1.5 )mm ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。置环 3～ 12个月复查 ,子宫内膜病理显示子宫内膜增生过长改变全部消失 ,内膜呈现分泌现象或间质蜕膜样改变。电镜显示子宫内膜上皮细胞固缩 ,细胞突起和微绒毛明显减少 ,细胞间隙增宽 ,可见脱落的上皮细胞 ;细胞核常染色质呈小凝块状 ,可见染色质边集现象 ,核膜不整、凹陷 ,内质网扩张 ,有时极度扩张的内质网呈囊状 ,线粒体肿胀 ,总体表现为细胞变性 ,增生受阻。

四逆汤保护小鼠缺血心肌的超微结构观察

本实验从心肌超微结构观察了四逆汤对实验性心肌缺血的保护性效应。结果表明:四逆汤显著减少了因心肌缺血而引起的糖原消耗并显著减轻了线粒体的肿胀。提示四逆汤对缺血心肌有一定的保护作用。

实验性帕金森病黑质的超微结构变化及灵芝孢子粉的影响研究

目的 研究帕金森病 (PD)动物模型黑质的超微结构及灵芝孢子粉对这些超微结构的影响。方法 30只健康雄性SD大鼠被分成 3组 ,每组 10只 ,其中PD组采用立体定向仪注入微量 6 羟多巴 (6 OHDA)至右侧中脑黑质 ,诱发PD模型。将成功的PD模型鼠用电镜固定液灌流固定脑组织 ,然后电镜观察黑质超微结构。灵芝孢子粉组先用灵芝孢子粉预处理 3天 ,再用立体定向仪注入微量 6 OHDA至右侧中脑黑质 ,并连续应用灵芝孢子粉直至4周 ,选择旋转次数最多的 6只大鼠电镜观察黑质超微结构。正常对照组黑质注入 0 2 %抗坏血酸生理盐水混合液。结果 PD组大鼠有较多的凋亡的神经细胞 ,线粒体嵴不清、内质网扩张 ,而正常对照组没有这些变化。灵芝孢子粉预处理组存在轻度的线粒体嵴不清、内质网扩张 ,偶见凋亡的神经细胞。结论 从形态学上说明神经细胞的凋亡在PD的发病机制中具有重要作用 ,同时灵芝孢子粉对黑质神经细胞具有保护作用。

急性心肌梗死猝死患者心肌细胞凋亡的研究

目的 :探讨细胞凋亡在急性心肌梗死时心肌细胞死亡中的意义。方法 :用末端原位标记 (TU NEL )法、DNA电泳和电镜 3种方法检测急性心肌梗死猝死患者和心脏正常的车祸死亡者心肌细胞的凋亡。结果 :TU NEL 法发现 ,猝死者梗死区的心肌细胞凋亡数 (5 5 7.95± 1 4 4.1 0 )× 1 0 - 3明显高于正常对照组 (34 .30±2 0 .6 8)× 1 0 - 3(P=0 .0 0 0 0 ) ;心肌细胞凋亡数在冠脉 1支病变者为 (5 0 6 .38± 1 75 .88)× 1 0 - 3<2支病变者为(5 5 4.38± 92 .1 5 )× 1 0 - 3<3支病变者为 (6 6 8.2 5± 1 2 7.1 9)× 1 0 - 3,虽然均明显高于正常对照组 (P均 <0 .0 5 ) ,但 3组之间比较则无统计学差别 (P均 >0 .0 5 ) ;冠脉 2～ 3支病变者梗死区的心肌细胞 DNA电泳可见相差约1 80～ 2 0 0 bp的阶梯片段 ;电镜发现猝死者梗死区内的心肌细胞核膜完整、染色质浓集、电子密度增加的凋亡特征 ,有的则出现核膜破裂、染色质溶解成碎屑的坏死现象。结论 :细胞凋亡在急性心肌梗死猝死者的心肌细胞死亡中起重要作用。

体外培养诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为肌样细胞的实验研究

目的 :体外培养并诱导大鼠骨髓间质干细胞 (MSCs)分化为肌样细胞。方法 :采用常规技术对SD鼠MSCs进行体外培养传代、鉴定、诱导分化和免疫组化、透射电镜检测分析。结果 :流式细胞仪检测 ,细胞表达CD2 9和CD4 4 ,不表达CD11b和CD4 5 ;经一定浓度 5 -氮杂胞苷和两性霉素B诱导分化后细胞desmin和myoglobin染色阳性 ;电镜观察肌样细胞胞浆靠胞膜缘可见无细胞器的条状肌丝区带。结论 :传代贴壁生长的梭形细胞为MSCs。MSCs可能具有表达肌细胞的特异性启动或分化调控基因 ;5 -氮胞苷等化合物可使DNA的胞嘧啶去甲基化 ,从而诱导MSCs向肌源性细胞分化。临床有运用MSCs治疗肌萎缩性疾病的前景。

大鼠电击死心脑肺及皮肤超微结构的改变

目的 观察电击致死大鼠的心、脑、肺、皮肤超微结构形态学改变，寻找电击死的法医学鉴定依据。方法 大鼠12只，其中电击致死6只，另6只对照；取心、脑、肺、皮肤，用戊二醛固定、锇酸染色后透射电镜观察。结果 所取组织细胞均见明显细胞凋亡样改变，其中红细胞肿胀变形，充填整个毛细血管管腔。结论 心、脑、肺、皮肤组织细胞与血管内皮细胞的超微结构形态改变对鉴定电流死有参考价值。

大鼠老年多器官功能障碍综合征生理、生化及超微结构的变化

目的 :研究老年多器官功能障碍综合征 (MODSE)动物模型超微结构的改变特点与生理、生化指标变化 ,探讨老年多器官功能障碍发生机制 ,提供防治老年多器官功能障碍综合征的依据。方法 :建立盲肠结扎穿孔术(CLP)的MODSE组、青年多器官功能障碍综合征 (MODSY)组及相应的假手术对照组。在术后 2 4h采用透射电镜技术观察重要器官 (心、脑、肺、肝和肾 )的超微结构变化 ,同时检测各组大鼠的呼吸频率 (RR)、心率 (HR)和血压 (BP)、血清丙氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、总胆红素 (TB)、肌酐 (Cr)、尿素氮 (BUN)等生理、生化指标水平的改变。结果 :观察MODSE组和MODSY组的重要器官组织超微结构时发现 ,术后 2 4h两组实验大鼠的重要器官及其血管内皮细胞的超微结构均有不同程度的损伤 ;除RR、BP、HR指标外 ,其他 5项生化指标较假手术对照组亦有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :不同程度的重要器官组织的细胞损伤 (其中以MODSE实验组的细胞损伤最为严重 )与相应的生理、生化指标改变的一致性 ,说明血管内皮细胞的损伤可不同程度导致微循环障碍 ,引起相应组织的供血不足 ,进而使细胞的代谢功能受到影响 ,发生细胞变性、坏死。在纠正器官功能不全的同时 。

电刺激对大鼠脑梗塞运动功能及突触的影响

目的：评价电刺激治疗对大鼠脑梗塞后运动功能的影响及其机理。方法：观察正常ＳＤ大鼠在右侧大脑中动脉闭塞后，使用电刺激治疗６周时，大鼠运动功能的改善情况，结合透射电镜对大鼠脑内坏死边缘区（Ａ区），远隔区（Ｂ区）及镜区（Ｃ区）３个脑区的突触数目及突触界面某些结构的变化进行了定量分析。结果：治疗组运动功能较对照组有一定的改善，治疗组在坏死边缘区有突触数目的增多，突触间隙变窄，突触活性区长度增加，突触后膜致密物质厚度增厚，而在远隔区及镜区，突触的数目及结构改变不明显。结论：电刺激可以改善急性脑梗塞偏瘫的运动功能，可能与电刺激通过外周神经通路，传到中枢，引起突触可塑性变化有关。

参麦注射液抗肝缺血再灌注损伤的研究

目的：研究参麦注射液对肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法：将３７只成年雄性ＳＤ大鼠随机分成假手术对照组（ＳＯＣ）、缺血再灌注组（Ｉ／Ｒ）、缺血再灌注加参麦组（Ｉ／Ｒ＋ｓｈｅｎｍａｉ）。通过阻断大鼠肝门３０ｍｉｎ后再开放建立肝缺血再灌注损伤模型，在肝脏再灌注９０ｍｉｎ时测肝组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和测血ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ，并取肝组织作光镜及电镜观察。结果：再灌注９０ｍｉｎ时Ｉ／Ｒ＋Ｓｈｅｎｍａｉ组的肝组织ＭＤＡ生成，ＳＯＤ消耗，血清ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ升高值均少于Ｉ／Ｒ组（Ｐ＜０．０１），且Ｉ／Ｒ＋Ｓｈｅｎｍａｉ组的肝细胞显微、超微结构损害的改变较Ｉ／Ｒ组轻。结论：参麦注射液能清除肝缺血再灌注过程中产生的氧自由基。

新型缺血再灌注模式诱导小鼠心肌细胞凋亡

目的 探讨联用垂体后叶素(以下简称Pit)及硝酸甘油(NG)造成缺血再灌注损伤,诱导小鼠心肌细胞凋亡的实验条件及有关机制.方法 以昆明种小鼠为实验对象,单纯经腹腔注入20μ/kg的Pit者为Pit组:30min后再注入10mg/kg的NG者为Pit和NG联用组,记录两组0,5,20,33,60min的心电图(以下简称ECG).80min取出小鼠心脏,用透射电镜及DNA琼脂糖胶电泳观察心肌凋亡的发生.结果 ECG表明在5min及33min前后,t波高度发生显著变化(P<0.05),电泳出现凋亡特征性梯带,电镜下可观察到染色体浓集、边聚等心肌细胞凋亡的特征性变化.结论Pit和NG联用能有效地诱导小鼠心肌凋亡,其机制可能与缺血再灌注损伤有关.

HCG治疗子宫内膜异位症大鼠模型的超微结构变化及意义

目的:探讨人绒毛膜促性腺激素(HCG)治疗子宫内膜异位症大鼠的疗效及机制。方法:诱导法成功建立子宫内膜异位症大鼠模型24只,随机分为4组,每组6只,分别以每天19.4 IU/100 g(HCG低剂量组)、25.8 IU/100 g(HCG中剂量组)和51.6 IU/100 g(HCG高剂量组)的HCG治疗15 d,并以生理盐水作为对照,比较各组治疗前后异位病灶体积的变化及异位内膜、在位内膜电镜下超微结构的改变。结果:HCG治疗后,HCG低、中和高剂量组的异位病灶体积均较治疗前减小(P<0.05);治疗前子宫内膜和异位内膜胞浆内可见大量线粒体、内质网及核糖体;治疗后部分细胞结构不清,部分线粒体嵴减少或消失,细胞致密、萎缩,胞浆中自噬体增多,线粒体和内质网肿胀。结论:HCG可能使在位和异位内膜中的细胞功能代谢减退,从而对子宫内膜异位症大鼠有治疗作用。

肾小球滤过屏障超微结构改变与Alport综合征蛋白尿的关系

目的:探讨肾小球滤过屏障超微结构改变与Alport综合征(AS)蛋白尿发生的关系。方法:AS患者35例,男24例,女11例,肾活检的年龄为1.17～24岁。根据尿蛋白结果将患者分为2组:无/间歇性蛋白尿组(13例)和持续性蛋白尿组(22例)。测量AS肾小球基底膜(GBM)变薄、增厚和致密层撕裂分层的长度,计算其各占GBM总长度的百分比;根据平均足突宽度(FPW)=π/4×(∑基底膜长度/∑足突个数)计算患者足突宽度。分析比较2组患者GBM变薄、增厚、致密层撕裂分层比例和平均FPW及其与AS蛋白尿的关系。结果:持续性蛋白尿组GBM增厚、致密层撕裂分层比例和平均FPW较无/间歇蛋白尿组高(均P<0.05)。平均FPW与GBM增厚、致密层撕裂分层及肾活检年龄均呈正相关(均P<0.01)。结论:AS患者GBM病变程度越重,足突融合越严重,蛋白尿越严重,提示AS基底膜异常有可能通过影响足突及裂孔膜的结构和功能导致蛋白尿发生。