目的观察不同Wagner分级的糖尿病患者血清及血清外泌体内microRNA-3976(miR-3976)的表达变化,并探讨其表达异常的可能机制。方法选取2018年3~6月中山大学孙逸仙纪念医院内分泌科28例糖尿病患者,通过逆转录-实时荧光定量聚合酶链式反应(R...目的观察不同Wagner分级的糖尿病患者血清及血清外泌体内microRNA-3976(miR-3976)的表达变化,并探讨其表达异常的可能机制。方法选取2018年3~6月中山大学孙逸仙纪念医院内分泌科28例糖尿病患者,通过逆转录-实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测血清及血清外泌体内miR-3976的表达水平,采用t检验比较不同Wagner分级糖尿病患者血清及血清外泌体miR-3976的表达差异。体外培养皮肤成纤维细胞和角质形成细胞,分别给予高糖、甘露醇及正常糖浓度培养,RT-qPCR法检测miR-3976的表达水平,采用单因素方差分析比较3种处理情况下细胞内miR-3976的表达差异。对miR-3976进行生物信息学分析。结果Wagner 3~4级糖尿病足患者与Wagner 0~2级患者相比,血清miR-3976表达水平显著升高(1.588±1.118 vs 1.068±0.108),差异具有统计学意义(t=3.256,P=0.0031),且血清外泌体中的miR-3976升高更显著(2.885±0.742 vs 1.156±0.220),差异具有统计学意义(t=2.435,P=0.0255);高糖培养的成纤维细胞中miR-3976表达较正常糖及等渗甘露醇组显著升高(3.749±1.177 vs 1.000;3.749±1.177 vs 2.060±0.475),差异均具有统计学意义(q=6.497、3.992,P均<0.05),而HaCaT细胞在高糖、等渗甘露醇及正常糖培养情况下miR-3976表达差异无统计学意义(F=0.249,P=0.789)。miR-3976的靶基因KEGG信号通路分析结果显示靶基因在细胞间紧密连接信号通路上富集程度最高。结论Wagner 3~4级的糖尿病足患者血清中升高的miR-3976可能主要以外泌体的形式存在,且可能主要来源于伤口局部的成纤维细胞,并通过外泌体将表达增高的miR-3976传递至皮肤修复细胞,影响细胞紧密连接分子表达,从而抑制伤口愈合。展开更多
文摘目的观察不同Wagner分级的糖尿病患者血清及血清外泌体内microRNA-3976(miR-3976)的表达变化,并探讨其表达异常的可能机制。方法选取2018年3~6月中山大学孙逸仙纪念医院内分泌科28例糖尿病患者,通过逆转录-实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测血清及血清外泌体内miR-3976的表达水平,采用t检验比较不同Wagner分级糖尿病患者血清及血清外泌体miR-3976的表达差异。体外培养皮肤成纤维细胞和角质形成细胞,分别给予高糖、甘露醇及正常糖浓度培养,RT-qPCR法检测miR-3976的表达水平,采用单因素方差分析比较3种处理情况下细胞内miR-3976的表达差异。对miR-3976进行生物信息学分析。结果Wagner 3~4级糖尿病足患者与Wagner 0~2级患者相比,血清miR-3976表达水平显著升高(1.588±1.118 vs 1.068±0.108),差异具有统计学意义(t=3.256,P=0.0031),且血清外泌体中的miR-3976升高更显著(2.885±0.742 vs 1.156±0.220),差异具有统计学意义(t=2.435,P=0.0255);高糖培养的成纤维细胞中miR-3976表达较正常糖及等渗甘露醇组显著升高(3.749±1.177 vs 1.000;3.749±1.177 vs 2.060±0.475),差异均具有统计学意义(q=6.497、3.992,P均<0.05),而HaCaT细胞在高糖、等渗甘露醇及正常糖培养情况下miR-3976表达差异无统计学意义(F=0.249,P=0.789)。miR-3976的靶基因KEGG信号通路分析结果显示靶基因在细胞间紧密连接信号通路上富集程度最高。结论Wagner 3~4级的糖尿病足患者血清中升高的miR-3976可能主要以外泌体的形式存在,且可能主要来源于伤口局部的成纤维细胞,并通过外泌体将表达增高的miR-3976传递至皮肤修复细胞,影响细胞紧密连接分子表达,从而抑制伤口愈合。