广东省烟草主栽品种病毒病抗性评价

为测定广东省7个烟草主栽品种对TMV和CMV的抗性情况,采用TMV侵染的普通烟叶系列稀释液(CK、1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000、1∶100000)作浓度梯度,选用K326作中感品种对照,机械摩擦接种法接种7个烟草品种(K326、云烟87、RG17、9601、9032、MSK326、MS96-7)。同时,对不同烟草品种选用评价浓度1∶40稀释度进行CMV接种,对接种后20d的病情指数和9d的发病率进行分析。结果表明:从各项自然及接种TMV后的农艺产量性状来看,云烟87、RG17和9601表现相对较好。其中以1∶10000稀释度作为评价浓度进行攻毒接种,接种70d后的病情指数:MS96-7最低为81.06,9032最高为95.46;接种30d后统计发病率:MS96-7最低为71.21%,RG17最高为100.00%。其中MS96-7表现为中抗,云烟87、RG17、9601、9032、K326和MSK326表现为中感;云烟87抗CMV扩展特性最强,9601抗CMV扩展特性最弱;RG17为CMV高感品种,其余5个(含新育成的品种MS96-7、MSK326)为CMV中感至高感间的品种。总体上,没有一个品种表现对TMV免疫或高抗水平,同时,也没有一个品种表现对CMV免疫、高抗或中抗水平。

香蕉细菌性枯萎病菌荧光LAMP检测体系的建立

【目的】基于香蕉细菌性枯萎病病原(Ralstonia solanacearum)2号生理小种的特异保守引物和LAMP技术建立一种实时荧光定性检测方法,解决常规PCR定性检测特异性低、灵敏度低、耗时长等问题,实现在1 h内能进行准确高效的定性检测,为加强该病害防控检测和检疫工作提供技术支持。【方法】确定被测基因靶序列,利用Primer软件设计两对内外引物。由两对引物、具有链置换特性的DNA聚合酶、模板DNA、甜菜碱、Mg2SO4、反应缓冲液、荧光染料等组成LAMP反应体系,采用不必在反应完开管盖检测的实时荧光LAMP方法,针对该方法对于样品DNA定性检测的灵敏度、特异性及可重复性进行试验。【结果】设计的引物能顺利扩增目标基因,实时荧光LAMP检测体系对于香蕉细菌性枯萎病病原生理2号小种有良好的灵敏度、特异性,该方法可重复性强,灵敏度比普通PCR高10倍以上。【结论】香蕉细菌性枯萎病菌荧光LAMP检测体系检测特异性强、灵敏度高、耗时短、不易污染,效果较好。

进境东盟水果货物携带细菌病害截获疫情分析

2011—2015年,全国各检验检疫口岸累计从东盟截获细菌745种次,其中包含货检336种次,旅检406种次,邮检3种次。分析了其中的货检货物携带细菌病害截获疫情,结果表明,疫情较为严重的年份为2015、2012和2011年,分别占36.61%、34.22%、16.07%。深圳口岸截获的细菌占全国总检出种次的95.83%;截获较多的种类有肠杆菌属((Enterobacter sp.),占50.89%)、芽孢杆菌属((Bacillus sp.),占27.68%)和金黄杆菌属((Chryseobacterium sp.),占11.31%),截获的检疫性细菌仅有1种次(芒果黑斑病菌(Xanthomonas campestris pv.mangiferaeindicae))。从来源国来看,来源于泰国和越南的水果截获种次居前位,其中以泰国榴莲和越南火龙果检出的细菌种次最多,均占总检出种次的40%。从水果种类来看,细菌疫情较为严重的水果有火龙果、榴莲和龙眼等;芒果中检出的细菌最少,仅占总检出种次的0.29%。总体各口岸细菌检出率较低,特别是检疫性的细菌病害截获仅有一次,相关口岸的细菌检测能力亟待加强。

胶体金免疫层析法快速检测李痘病毒的研究

用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体p ET29(a)上,得到p ET29a-PPV重组载体,然后将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达。回收表达蛋白后免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定其效价达到3.2×104,然后采用该抗血清制备出专门检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条,测试结果表明,该试纸条不仅特异性强、稳定性好,灵敏度也高,可以检测到1μg/m L粗提病毒和稀释100倍的病汁液,操作简便,10分钟之内即可出检测结果,特别适宜口岸检疫和田间快速诊断。

信息回避行为研究进展与理论框架

[目的/意义]文章梳理国内外信息回避行为研究进展与理论框架,提出现有研究的问题和将来研究的发展方向。[方法/过程]采用文献计量和内容分析法,对信息回避行为研究现状进行全面梳理和综合分析,从年度发文量和热点主题揭示国内外信息回避研究的总体进展,在对信息回避相关概念进行辨析的基础上,提出信息回避行为研究的理论框架。[结果/结论]已有研究重点关注了信息回避行为类型、回避内容和回避原因,但仍处于探索阶段,未来可在理论基础、研究方法与数据、研究对象与情境等方面开展系统而深入的研究。

基于纳米磁珠-LAMP结合技术检测齿兰环斑病毒的初步研究

根据齿兰环斑病毒外壳蛋白基因序列,设计了LAMP检测引物,并结合纳米磁珠技术对齿兰环斑病毒进行LAMP检测。结果表明,只有齿兰环斑病毒毒株有扩增,而建兰花叶病毒、烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒毒株都没有扩增,说明本实验设计的LAMP检测引物具有检测齿兰环斑病毒的特异性。灵敏度实验结果表明,纳米磁珠-LAMP结合技术比RT-PCR方法高100倍。研究表明,纳米磁珠-LAMP结合技术检测方法是一种特异、灵敏、快速的齿兰环斑病毒检测方法。