真菌来源的新的纤溶蛋白

本文研究了一种新的纤溶活性蛋白,并对其产生菌(植物内生真菌CPCC 480097)进行了鉴定。经形态学观察和ITS序列分析,CPCC 480097为镰孢霉属(Fusariumsp.)。该菌的发酵液经离心、盐析、Mono-Q阴离子交换和Superdex 75凝胶过滤,获得电泳纯的纤溶蛋白Fu-P,相对分子质量约为28 k。最终纯化倍数和收率分别为158.5倍和6.8%,其相对于尿激酶的比活为76 111 U/mg。Fu-P的N-端15个氨基酸序列为QASSGTPATIRVLVV,与已报道的其它微生物所产的纤溶酶有较大的差异。

重组酪氨酸酚裂解酶催化制备左旋多巴

采用生物酶催化法替代化学合成法制备左旋多巴是一条绿色、经济的合成路线。将来源于弗氏柠檬酸菌酪氨酸酚裂解酶的编码基因与pKK223-3载体连接,构建表达载体pKK223-TPL,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,构建了高活性的基因工程菌;研究了影响酪氨酸酚裂解酶酶活力和稳定性的关键因素,探索了减少副产物生成、提高底物转化率的催化条件。结果表明:在pH7.5、20℃条件下,控制邻苯二酚质量浓度不超过12g/L、丙酮酸钠质量浓度不超过7.5g/L、以0.4mol/L乙酸铵为氨来源、0.1mmol/LK+为激活剂时,可有效减少副产物的生成,提高酪氨酸酚裂解酶的稳定性,经过12h反应,左旋多巴产量达到122.8g/L,邻苯二酚的最大转化率达到98.7%,具有较好的工业化应用潜力。