人/鲑降钙素嵌合基因在大肠杆菌中的串联表达

人工合成人/鲑降钙素嵌合基因,用同尾酶法构建多拷贝串联基因表达质粒pLEX-nCT(n=1,2,3,4,5)(单个降钙素基因之间用一段编码柔性连接肽的DNA连接),并在大肠杆菌GI724中表达。Western blotting结果显示,串联多肽具有人源降钙素的抗原性。

cpcB与CT融合蛋白表达质粒在大肠杆菌中的表达和纯化

将人和鲑鱼嵌合型降钙素基因与藻蓝蛋白的β亚基基因相连,插入融合表达载体pGEX-4T-3中,转化大肠杆菌BL21.融合蛋白cpcB-CT基因在IPTG诱导下获得高效表达.超声破碎后,经SDS-PAGE分析,在48kD处有新增条,灰度扫描测定,过表达蛋白量占50%～60%,85%为包涵体.包涵体经变性、复性,过Glutathion-Sepharose-4B亲和吸附柱,获含有GST的融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化和截留分离,获得纯化的融合蛋白cpcB-CT.Western blotting分析表明,产物具有与合成人降钙素相似的抗原决定簇部分;ELISA-受体法和大鼠降血钙试验表明,其具有降血钙作用.提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景.

南方新景:“富人政治”进农村

这里发表两篇涉及非常敏感问题的文章:一篇是说浙江农村私企老板捐资竞选"村官";一篇是说江苏乡镇干部既当官又当老板。从"不管白猫黑猫,抓住老鼠就是好猫"的观点来看,他们的做法似乎都是无可厚非的。可是,人们对于基层政权和农民自治组织的官商结合、亦官亦商又不无担心:"富人政治"能不能真的"带"成全民的富裕?怎样才能避免不公平竞争和保持政权的廉洁?我们欢迎各方面读者来稿,对这个问题发表意见,以促进农村经济的快速、稳定发展。

嵌合降钙素的分子设计与生物学活性预测

目的:设计一种高活性、低副作用的降钙素类似物。方法:根据生物活性肽药物设计原理,结合前人的工作经验,提出提高降钙素分子等电点(pI)、增加N-末端疏水性和C-末端亲水性可以提高新型降钙素活性的假设。以人和鲑鱼降钙素为先导物,设计了大量的降钙素类似物,然后利用蛋白质分析计算软件,逐一分析,综合考虑到副作用与活性的矛盾,确定符合要求的新型降钙素类似物。结果:最终确定的符合要求的降钙素类似物为人和鲑鱼嵌合降钙素(hsCT)。结构预测结果显示新型降钙素类似物符合鲑鱼降钙素的空间构象,其pI值介于人源与鲑鱼源降钙素之间;N-末端疏水性比人降钙素有所增加,与鲑鱼降钙素相当;C-末端疏水情况与鲑鱼降钙素相同。C-末端亲水性与人降钙素比较有很大程度的增加。结论:新型嵌合降钙素活性高于人降钙素,而副作用较鲑鱼降钙素降低。

稀土金属镥配合物有机电致发光器件性能研究

稀土元素因其独特的电子结构和丰富的跃迁能级备受关注。利用真空气相沉积法以稀土金属镥配合物Lu(DBM)_(3)Pyphen为发光层,m-MTDATA为空穴注入层,TPD为空穴传输层,制备了结构为ITO/m-MTDATA/TPD/TPD:Lu(DBM)_(3)Pyphen/Lu(DBM)_(3)Pyphen/LiF/Al的有机电致发光器件。最大亮度和电流效率分别为911 cd/m^(2)和1.1 cd/A,随着电压增加色坐标由(0.485,0.479)移动到(0.391,0.533)。器件发光颜色变化具有明显的电压依赖性,为可视信息存储提供了新的思路。