肥胖相关代谢性内毒素血症对精子畸形率的影响因素分析

目的探讨肥胖人群的代谢性内毒素血症对精子畸形率影响的高危因素分析。方法选取2021年1~12月就诊的畸形精子症患者453例作为观察组,选取同期精子畸形率正常人员231例作为对照组。检测身高、体重、血清人连蛋白(Zonulin)、血清脂多糖结合蛋白(LBP)、人精液弹性蛋白酶(Elastase)、精液8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)、精子畸形率。采用多因素Logistic回归分析法、Pearson相关分析法探究肥胖人群相关的代谢性内毒素血症对精子畸形率影响的高危因素。结果观察组肥胖率显著高于对照组(72.4%∶25.1%,χ^(2)=8.231,P=0.009);观察组8OHdG异常率高于对照组(73.5%∶19.9%,χ^(2)=5.964,P=0.018);观察组Zonulin异常率显著高于对照组(79.7%∶8.2%,χ^(2)=9.635,P=0.002);观察组LBP异常率高于对照组(69.3%∶29.4%,χ^(2)=7.524,P=0.013);观察组雌二醇(E2)异常率高于对照组(43.5%∶10%,χ^(2)=6.954,P=0.019);在年龄、Elastase、FSH、LH、TT等观察指标方面,2组差异无统计学意义。多因素Logistic回归分析结果显示,BMI(OR=5.984,P=0.004)、8OhdG(OR=3.521,P=0.001)、Zonulin(OR=3.241,P=0.017)、LBP(OR=5.511,P=0.001)、E2(OR=4.671,P=0.026)是影响精子畸形率的高危因素。BMI与Zonulin、LBP、8OhdG、E2存在相关关系(P<0.05)。结论肥胖可诱发代谢性内毒素血症,肠道通透性的增加以及内毒素水平的升高可造成全身炎性反应,诱导氧化应激的出现。由氧化应激造成白细胞释放的活性氧将会造成精子畸形率升高。因此,肥胖诱导的代谢性内毒素血症可引起Zonulin、LBP、8OHdG、E2升高,它们是影响精子畸形率的高危因素。

基于线粒体控制区序列的光裸方格星虫群体遗传多样性分析

为了解光裸方格星虫的群体遗传结构和种质资源状况,对北部湾海域光裸方格星虫6个地理野生群体(广西北海、湛江、钦州、防城港、海南儋州,以及越南海防)共93个个体的线粒体DNA(mtDNA)控制区序列进行分析。共检测到107个变异位点,定义了85个单倍型,序列对AT有明显的偏倚性,群体总的单倍体多样性(Hd)和核苷酸多样性(Pi)分别为0.998和0.018 89。单倍型邻接聚类树分析6个群体无明显分支,各单倍型分布于单倍型网络中介图中亦没有明显的地理分支。各群体间的遗传分化系数Fst值为–0.018 13~0.028 05,遗传分化极不明显,AMOVA分析显示光裸方格星虫的遗传差异主要来自群体内(99.74%)。中性检验Tajima’s D和Fu’s Fs值均为负值,核苷酸不配对分布图呈明显的单峰形,提示光裸方格星虫群体在历史上曾出现群体扩张,推算出扩张时间为距今171万年前。目前光裸方格星虫仍具有较高的遗传多样性,6个地理群体间无明显遗传分化,存在频繁的基因交流,推测种群在早更新世曾出现群体扩张。

管角螺性畸变现象的组织解剖学研究及扫描电镜观察

为了探讨管角螺性畸变过程中,生殖系统在形态和组织结构方面的变化,以及性畸变可能对其种群带来的不良影响,实验采用组织解剖学和扫描电镜的方法,研究了广东湛江、广西北海、钦州和防城港及越南胡志明市5个区域管角螺的未成熟和成熟正常雄、雌个体以及性畸变个体的生殖系统结构。结果显示,管角螺性畸变个体除具有正常的雌性生殖器官外,还有输精管和阴茎等雄性生殖器官,并且性畸变个体阴茎的位置、形状和输精管的组织结构与正常雄性个体的相似,管角螺性畸变现象仅见于成熟个体,高程度性畸变雌体的性腺发育受阻。性畸变率(IOI)结果显示,8批样中管角螺性畸变严重程度依次是北海1>北海2>湛江>钦州1>防城港近海>越南胡志明市、钦州2和防城港白龙珍珠湾,其中北海的性畸变情况最为严重,性畸变率平均达到90%;北海种群的输精管发育指数(VDSI)也高于其他地区群体;并且北部湾管角螺的雌雄性比几乎都要小于1,总体呈现减少的趋势。研究表明,有机锡污染可能已对北部湾管角螺种群的延续造成威胁。

光裸方格星虫野生与养殖群体线粒体控制区序列的遗传差异分析

基于线粒体控制区序列对光裸方格星虫(Sipunculus nudus Linnaeus,1766)的2个养殖群体(营盘YP、竹林ZL)和4个野生群体(防城港FC、钦州QZ、大冠沙DG和越南海防YN)的91个个体进行遗传差异分析,研究光裸方格星虫养殖和野生群体的遗传变异情况。结果显示:获得的514 bp DNA序列中,野生与养殖群体的多态性位点数分别为82和60,均显示出对AT的偏倚性。共定义85个单倍型,共享单倍型4个,其中共享单倍型Hap5为原始单倍型,营盘群体均为独享单倍型。各群体的单倍型多样性(Hd)相同,野生群体的平均核苷酸多样性(Pi)(0.01531)略高于养殖群体(0.01514),6个群体的遗传多样性水平依次为YN>YP>QZ>FC>ZL>DG。各群体间的遗传分化并不显著(P>0.05),光裸方格星虫的遗传变异主要来自群体内个体间(99.08%),同时未发现明显的地理谱系结构。研究表明,光裸方格星虫野生群体的遗传多样性水平总体略高于养殖群体;滩涂底播养殖方式较池塘养殖更利于维持光裸方格星虫遗传多样性;各群体间不存在显著的遗传分化,养殖群体正逐渐积累遗传变异,但尚未足够以形成其独立的遗传结构。

露空胁迫对管角螺成活率的影响

以不同发育阶段的管角螺为材料,研究了其在不同温度的干、湿环境下对露空的成活响应。实验结果表明,管角螺的成螺、幼螺及稚螺在低温湿润(18℃~20℃)的条件下可耐受更长的露空时间。成螺在低温湿润条件下露空72 h成活率达100%,但随着露空时间的延续,成活率降低,至10 d成活率降到10%。幼螺在同样条件下露空至72 h成活率为80%,稚螺为40%。而在高温(28℃~30℃)干燥的条件下干露相同的时间成活率明显降低,成螺72 h成活率为50%,至96 h全部死亡;幼螺72 h成活率为52.5%,稚螺68 h后全部死亡。在温度、湿度相同的条件下,管角螺耐露空能力为成螺>幼螺>稚螺。

方格星虫中培苗对温度、盐度和干露的耐受性试验

研究了方格星虫中培苗对盐度突变、温度突变和盐度渐变、温度渐变及干露的耐受性。试验结果表明,方格星虫中培苗耐受盐度的范围比较广泛,为10~45,适宜的盐度为15~40;适宜温度为15~30℃,对低温有较强的耐受力。方格星虫中培苗在低温保湿干露48h未发生死亡,大量死亡集中在72~96h。根据试验结果可知,方格星虫中培苗对环境的适应性较强,耐温、耐盐范围较广,且具有较强的耐干露能力,便于苗种运输。

肥胖人群的代谢性内毒素血症对精子DNA完整性影响的相关性研究

目的探讨肥胖人群的代谢性内毒素血症与精子DNA碎片指数之间是否存在相关性。方法选取2021年1月至6月在甘肃省妇幼保健院就诊的138例男性不育症患者,检测其血清人连蛋白(Zonulin)、血清脂多糖结合蛋白(LBP)、人精液弹性蛋白酶(Elastase)、精液8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)、精子DNA碎片指数(DFI)等。采用Pearson相关系数分析各指标间的相关性。结果Zonulin与LBP之间r=0.352,P=0.000,呈正相关;LBP与8OHdG之间r=0.540,P=0.000,呈正相关;8OHdG与体重指数(BMI)之间r=0.562,P=0.000,呈正相关;LBP与DFI之间r=0.524,P=0.000,呈正相关;DFI与Elastase之间r=-0.035,P=0.680,无相关性;LBP与Elastase之间r=-0.008,P=0.923,无相关性。结论肥胖可诱发肠道细菌易位,易位的细菌可诱导代谢性内毒素血症发生,内毒素水平的升高可造成全身炎症反应,致使氧化应激出现,而氧化应激可造成白细胞释放活性氧,活性氧会造成精子DNA损伤。

益生菌联合左卡尼汀口服改善肥胖男性精子DNA碎片化率异常的临床观察

目的观察益生菌联合抗氧化剂左卡尼汀口服治疗肥胖男性精子DNA碎片化率(DFI)异常的临床效果,并探讨其可能的机制。方法选取精子DFI异常的肥胖男性179例,按照随机数字表法分为对照组90例、观察组89例。对照组仅口服左卡尼汀,观察组口服左卡尼汀联合益生菌地衣芽孢杆菌活菌胶囊,治疗3个月。记录两组治疗后的临床疗效,比较其治疗前后精子密度、正常形态率、DFI以及血清人连蛋白(Zonulin)、脂多糖结合蛋白(LBP)、精液8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG)水平。结果观察组治疗后显效31例、有效35例、无效23例,总有效率74.16%(66/89),对照组分别为15、28、47例及47.78%(43/90);观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗前后两组精子密度、正常形态率比较差异均无统计学意义(P均>0.05);与治疗前比较,治疗后两组DFI均降低,且观察组降低更明显(P均<0.05)。治疗后观察组血清Zonulin、LBP及精液8OHdG水平均低于同组治疗前及对照组治疗后(P均<0.05),治疗前后对照组上述指标无明显变化(P均>0.05)。结论口服益生菌联合左卡尼汀可有效降低肥胖男性的精子DNA碎片化率,其机制可能与减轻肥胖诱发肠道细菌易位而引起的氧化应激、炎症反应有关。

方格星虫实时荧光定量PCR内参基因的选择与验证

目前研究基因定量表达的方法主要为实时荧光定量PCR,选择合适的内参基因可以提高实时荧光定量PCR分析的准确性。选取方格星虫的体壁肌肉、吻、肾管、脑、肠道、收吻肌、食道、血淋巴细胞为材料,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析EF1-α2、α-Tub1、RPL13-b、Actin1、H3-b、GAPDH1共6个候选内参基因的表达稳定情况,并以方格星虫的免疫球蛋白组织分布情况对内参基因的稳定性进行验证。结果显示,通过BestKeeper软件计算候选内参基因稳定性顺序为:RPL13-b>H3-b>EF1-α2>GAPDH1>Actin1>α-Tub1;Normfider软件分析候选内参基因稳定性顺序为:RPL13-b>EF1-α2>GAPDH1>H3-b1>Actin1>α-Tub1;geNorm软件分析候选内参基因稳定性顺序为:RPL13-b=H3-b>EF1-α2>GAPDH1>Actin1>α-Tub1。采用最稳定和最不稳定内参基因对免疫球蛋白基因在不同组织的表达水平变化进行校准时发现,其表达谱呈现不同模式。RPL13-b内参基因在方格星虫全组织中的表达最稳定,可作为最适单内参基因。