牡丹花蕾提取物对铜绿假单胞菌的抑菌活性及其机理

以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)为试验菌,探究牡丹花蕾提取物的抑菌活性及机理。利用琼脂滤纸片扩散法和微量稀释法评价抑菌活性;测定生长曲线、膜脂肪酸组成、膜蛋白荧光光谱、膜通透性及细胞形态变化来探究抑菌机理。牡丹花蕾提取物抑制铜绿假单胞菌生长,最低抑制浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀死浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)分别为3.13和6.25 mg/mL。在MIC和MBC下,细胞膜饱和脂肪酸相对含量提高了6.06%和8.19%,而单不饱和脂肪酸相对含量降低了5.17%和6.91%,从而导致膜流动性降低;同时提取物降低膜蛋白Phe、Trp和Tyr荧光强度,表明膜蛋白构象改变,导致膜功能产生障碍。此外,提取物破坏膜完整性和增加膜通透性。牡丹花蕾提取物通过改变膜脂肪酸组成和膜蛋白构象并破坏膜完整性发挥抑菌作用,可作为防腐保鲜剂予以开发。

重楼黄酮的提取工艺及其抗氧化功效验证

目的:探讨重楼中黄酮提取的最佳工艺参数,并对其不同洗脱条件组分的抗氧化效果进行研究。方法:在单因素试验的基础上,采用响应面法对提取条件进行考察,并确定最佳回流提取条件。对HP20、D101、SP825、H103、AB-8五种大孔吸附树脂进行研究,选择最佳树脂,并利用20%、40%和60%乙醇进行洗脱。测定不同洗脱组分及粗提物的抗氧化活性,包括DPPH、OH和ABTS自由基清除能力,以及对Fe3+的还原能力检测。结果:经过响应面工艺优化,提取乙醇浓度65%,提取时间105 min,料液比1∶10为最佳回流提取工艺条件。选择最佳树脂D101,利用不同浓度乙醇洗脱得到的不同组分D2~D4。抗氧化实验表明D1~D4具有一定的抗氧化能力,其中D2和D3组分的抗氧化功效最好。结论:利用该工艺可以富集纯化重楼黄酮成分,重楼的大孔吸附树脂20%、40%乙醇洗脱部分富集到的黄酮为抗氧化主要活性部位。