VLAN干线传输协议

虚拟局域网是一种通过将局域网内的设备逻辑地而不是物理地划分成一个个网段,从而实现虚拟工作组的新兴技术。分析了用于VLAN干线的传输协议,对交换机间链路(ISL),IEEE802.10,IEEE 802.1Q及局域网仿真(LANE)这4种协议的帧的结构以及如何工作进行了详细的阐述。

miR-219a-5p通过负调控HMGA2抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移

目的研究miR-219a-5p通过调控高迁移率蛋白A2(HMGA2)对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用实时定量PCR检测骨肉瘤U2OS细胞和正常成骨细胞hFOB1.19的miR-219a-5p mRNA表达水平。采用脂质体转染法将miR-219a-5p模拟物miR-219a-5p mimic(miR-219a-5p mimic组)以及阴性对照mimic NC(mimic NC组)转染U2OS细胞,通过实时定量PCR检测转染后细胞miR-219a-5p和HMGA2 mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测HMGA2蛋白水平,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力、划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-219a-5p与HMGA2间的作用关系。结果实时定量PCR结果显示,骨肉瘤U2OS细胞中的miR-219a-5p表达水平(0.11±0.01)显著低于正常成骨细胞(1.00±0.06),差异具有统计学意义(t=26.83,P<0.001)。CCK-8法结果显示,mimic NC组和miR-219a-5p mimic组培养24 h后细胞吸光度值分别为0.52±0.02、0.42±0.02,48 h后分别为0.85±0.03、0.60±0.03,72 h后分别为1.12±0.02、0.72±0.02,miR-219a-5p mimic组细胞增殖活性显著低于mimic NC组,差异均具有统计学意义(t=6.97,P<0.001;t=16.65,P<0.001;t=26.78,P<0.001)。克隆形成实验结果显示,miR-219a-5p mimic组细胞克隆数为(157.00±15.39)个,明显低于mimic NC组的(294.00±15.51)个,差异具有统计学意义(t=9.70,P<0.001)。划痕实验结果显示,培养24 h后,miR-219a-5p mimic组细胞划痕面积百分比为(40.53±2.92)%,显著高于mimic NC组的(21.71±3.11)%,差异具有统计学意义(t=7.26,P=0.002)。Transwell小室侵袭实验结果显示,miR-219a-5p mimic组细胞的穿膜数量为(128.67±18.67)个,显著少于mimic NC组的(317.67±14.33)个,差异具有统计学意义(t=15.65,P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,在含有MUT-HMGA2细胞中,与mimic NC组(4.40±0.28)相比,转染miR-219a-5p mimic(4.30±0.26)对荧光素酶活性无明显影响,差异无统计学意义(t=0.85,P=0.690)。在含有WT-HMGA2细胞中,相比于NC mimic组(4.50±0.25),miR-219a-5p mimic组(2.88±0.16)荧光素酶活性显著降低,差异具有统计学意义(t=19.15,P<0.001)。且过表达miR-219a-5p后,骨肉瘤U2OS细胞中的HMGA2 mRNA和蛋白表达(0.77±0.01;0.37±0.01)相比于mimic NC组(1.00±0.02;1.00±0.01)均下调,差异均具有统计学意义(t=16.38,P<0.001;t=42.02,P<0.001)。结论在骨肉瘤细胞中,miR-219a-5p可通过下调HMGA2的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。