白鹤芋染色体制片技术优化及核型分析

以白鹤芋(Spathiphyllum floribundum)‘Mojo’品种的组培苗根尖为试验材料,采用常规压片法,比较不同取材时间、预处理方法对染色体制片的影响,并对其进行核型分析。结果表明,于08:45-09:15取材,用0.002 mol·L-18-羟基喹啉或0.07mmol·L-1放线菌酮预处理4h所得的染色体制片效果最佳。白鹤芋的染色体数目为2n=2x=30,为二倍体,‘Mojo’品种有B染色体,核型公式为2n=2x=30=20m+6m(SAT)+2sm+2sm(SAT)(B染色体),其中3号和8号为近中部着丝粒染色体(sm),其余的染色体都是中部着丝粒染色体(m)。3号、4号、6号和9号的染色体具随体。最长染色体与最短染色体比为1.73;核型属2A型,核型不对称系数为56.37%。

不同培养基组分对油桃花粉萌发的影响

采用花粉离体培养法,研究含有蔗糖、硼酸、NAA、6-BA等不同组分的培养基对油桃花粉生活力的影响,结果表明,油桃花粉萌发的最适宜基本培养基成分为10%蔗糖+100 mg/L硼酸;添加6.0 mg/L NAA时花粉的萌发率相对最好,为74.97%;添加浓度为0.6 mg/L的6-BA有利于花粉萌发,花粉萌发率为74.46%。

如意皇后粗肋草愈伤组织及丛生芽诱导培养基优化

本研究以粗肋草‘Red Valentine’带侧芽的根茎为外植体,研究不同培养基类型、不同外源激素及浓度、不同转接周期对其愈伤组织及丛生芽诱导的影响,进而优化如意愈伤组织和丛生芽诱导培养基。结果表明:最佳愈伤组织诱导培养基为MS+0.5mg/LTDZ+2.0mg/L2,4-D和1/2MS+0.5mg/LTDZ+2.5mg/L2,4-D;最佳愈伤组织分化培养基为1/2MS+0.4mg/LTDZ,最佳转接周期为30d;最佳丛生芽诱导培养基为5.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA和1/2MS+0.5mg/LTDZ,最佳转接周期为30d。优化培养基后愈伤组织及丛生芽诱导效率更高。本研究通过设计优化试验,筛选出了愈伤组织诱导及丛生芽诱导的最佳培养基,为粗肋草属植物的快速繁殖及规模化生产提供了一定的理论指导。

如意皇后粗肋草的离体培养

本研究以粗肋草‘Red Valentine’带侧芽的根茎为外植体,研究不同消毒时间、不同种类外源激素对其根茎侧芽萌发诱导、愈伤组织诱导、丛生芽诱导、丛生芽增殖和生根的影响。结果表明：最佳灭菌时间为18 min,污染率为20.0%。MS＋6-BA 2.0 mg/L＋IBA 0.2 mg/L为最佳侧芽萌发诱导培养基,MS＋TDZ 0.5 mg/L＋2,4-D 2.0 mg/L为最优愈伤诱导培养基,1/2MS＋TDZ 0.5 mg/L为最佳丛生芽诱导培养基,最佳丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L或MS＋KT 4.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L,最佳生根培养基为1/2MS＋NAA 0.2 mg/L。本研究通过对粗肋草‘Red Valentine’进行离体培养,初步得出了适合外植体各时期生长的最佳培养基配方,为粗肋草试管苗的商业化、工厂化及规模化生产提供理论和技术指导。

白鹤芋体细胞胚胎发生及组织学研究

本研究以白鹤芋品种‘Mojo’的根茎为外植体,研究不同外源激素配比对体细胞胚胎发生的影响,筛选出最佳胚性愈伤及体胚的诱导配方。其后采用体式显微镜和石蜡切片技术对体胚发生途径中的典型时期进行形态学和组织学观察。结果表明,4 mg/L 2,4-D与0.5 mg/L KT作用时,白鹤芋胚性愈伤组织诱导效果最佳,诱导率达87.44%;体细胞胚胎诱导的最佳配方为1.0 mg/L6-BA＋0.2 mg/L TDZ＋0.2 mg/L NAA。白鹤芋是单子叶植物,其体细胞胚胎的形态形成过程与单子叶植物胚的形态形成过程类似。研究结果表明,白鹤芋体细胞胚胎的形态形成主要分为以下几个阶段：胚性细胞、胚胎、球形胚、椭圆形胚、盾形胚、子叶型胚、成熟体细胞胚。

豆瓣绿胚性愈伤悬浮培养条件优化及体细胞胚发生

本研究以豆瓣绿无菌苗叶片为外植体诱导获得质地疏松、稳定性高的颗粒状胚性愈伤组织,开展胚性细胞悬浮培养研究。结果表明:豆瓣绿胚性愈伤组织最适继代培养基为MS+0.6%琼脂+3%蔗糖+2,4 D1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,继代间隔14 d;体细胞悬浮最佳培养基为MS+3%蔗糖+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,继代间隔7 d;体细胞悬浮最佳碳源为蔗糖,蔗糖最佳浓度为30 g/L;体细胞悬浮摇床最佳转速为110 r/min。本研究考察激素种类、激素浓度、碳源种类、糖浓度、摇床转速对体细胞胚悬浮体系的影响,并采用解剖镜进行形态学观察,为后期研究体细胞胚胎形态结构提供基础数据。

不同品种彩色马蹄莲灭菌条件优化与不定芽诱导

以‘穆拉诺’(Murano)、‘孟菲斯’(Memphis)、‘凯尔索’(Kelso)、‘刀锋’(Blade)、‘色拉达’(Salada) 5个品种彩色马蹄莲的块茎为试验材料,对其进行灭菌时间、灭菌方法及不定芽诱导条件的筛选。结果表明,在灭菌时间上,不同品种间存在显著性差异,‘穆拉诺’、‘凯尔索’、‘刀锋’的最佳灭菌时间是15 min,‘孟菲斯’、‘色拉达’的最佳灭菌时间是18 min;灭菌方法,5个品种均在45℃水浴1 h和杀菌剂500倍液处理4 h的条件下,灭菌效果最好,初代培养成活率分别达到50%和70%左右;不定芽诱导阶段,不同品种间存在显著性差异,‘穆拉诺’、‘孟菲斯’、‘凯尔索’、‘色拉达’的最适培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,‘刀锋’最适培养基为MS+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。