目的探讨生物钟基因CRY2通过Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌细胞侵袭性的作用,并阐明其对细胞外基质可能的作用机理。方法利用GEPIA数据库下载符合本研究需要的卵巢癌组织426例和正常卵巢组织88例的基因表达谱,并通过R语言分析两组的...目的探讨生物钟基因CRY2通过Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌细胞侵袭性的作用,并阐明其对细胞外基质可能的作用机理。方法利用GEPIA数据库下载符合本研究需要的卵巢癌组织426例和正常卵巢组织88例的基因表达谱,并通过R语言分析两组的CRY2基因表达。将TCGA数据库中下载到的的353例卵巢癌患者以CRY2基因表达水平中位值为中心分为CRY2低表达组和CRY2高表达两组,并行差异分析,随后筛选差异基因富集的京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路,通过STRING和cBioPortal分析蛋白互作。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及免疫组织化学检测组织中CRY2 mRNA和蛋白表达水平。采用脂质体转染法将shCRY2质粒转染卵巢癌细胞,过表达CRY2,利用Transwell实验研究卵巢癌细胞的侵袭性。采用荧光素酶报告实验检测过表达CRY2组和对照组两组的TOP/Flash荧光素酶比率,Western-blot检测β-catenin蛋白表达水平。结果CRY2在卵巢癌中的表达水平较正常卵巢组织低(P<0.05),CRY2的差异表达基因主要和细胞外基质受体相互作用等信号通路相关。CRY2主要与生物钟基因蛋白相互作用,并与Wnt信号通路密切相关。RT-qPCR及免疫组织化学染色法检测CRY2在卵巢癌中的基因表达水平低于正常卵巢组织(P<0.05),shCRY2组侵袭细胞数较shNC组多,并具有统计学差异(P<0.05)。过表达CRY2后卵巢癌HO8910细胞株TOP/Flash荧光素酶的比率降低(P<0.05),β-catenin蛋白的表达量减少(P<0.05)。结论CRY2在卵巢癌组织中低表达,可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进细胞侵袭,并影响细胞外基质受体相互作用。展开更多
文摘目的探讨生物钟基因CRY2通过Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌细胞侵袭性的作用,并阐明其对细胞外基质可能的作用机理。方法利用GEPIA数据库下载符合本研究需要的卵巢癌组织426例和正常卵巢组织88例的基因表达谱,并通过R语言分析两组的CRY2基因表达。将TCGA数据库中下载到的的353例卵巢癌患者以CRY2基因表达水平中位值为中心分为CRY2低表达组和CRY2高表达两组,并行差异分析,随后筛选差异基因富集的京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路,通过STRING和cBioPortal分析蛋白互作。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及免疫组织化学检测组织中CRY2 mRNA和蛋白表达水平。采用脂质体转染法将shCRY2质粒转染卵巢癌细胞,过表达CRY2,利用Transwell实验研究卵巢癌细胞的侵袭性。采用荧光素酶报告实验检测过表达CRY2组和对照组两组的TOP/Flash荧光素酶比率,Western-blot检测β-catenin蛋白表达水平。结果CRY2在卵巢癌中的表达水平较正常卵巢组织低(P<0.05),CRY2的差异表达基因主要和细胞外基质受体相互作用等信号通路相关。CRY2主要与生物钟基因蛋白相互作用,并与Wnt信号通路密切相关。RT-qPCR及免疫组织化学染色法检测CRY2在卵巢癌中的基因表达水平低于正常卵巢组织(P<0.05),shCRY2组侵袭细胞数较shNC组多,并具有统计学差异(P<0.05)。过表达CRY2后卵巢癌HO8910细胞株TOP/Flash荧光素酶的比率降低(P<0.05),β-catenin蛋白的表达量减少(P<0.05)。结论CRY2在卵巢癌组织中低表达,可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进细胞侵袭,并影响细胞外基质受体相互作用。