经典猪瘟荧光PCR检测方法的建立与应用

猪瘟(CSF)已被世界卫生组织确定为A类传染病,为减少猪瘟病毒(CSFV)带来的经济损失,新的有效的诊断技术的开发成为关键。根据CSFV的Zaozhuang-1毒株的5'UTR基因保守区域设计出特异性引物,建立了一种猪瘟病毒荧光PCR快速检测方法。结果表明,该方法在62℃条件下扩增40个循环,灵敏度最高,最低可检测限度为10拷贝/μL;且特异性良好,与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)均无特异性扩增。对临床样本进行检测,结果显示,荧光定量PCR检测结果合格率为100%。该方法灵敏度高、特异性强、重复性良好、符合率高,适用于经典猪瘟的快速检测。