体外培育牛黄对人冠状病毒肺炎湿毒疫模型的机制研究

目的观察体外培育牛黄对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺证小鼠模型的治疗作用。方法通过体外培育牛黄(0.128、0.064、0.032 g/kg)对小鼠肺指数和肺指数抑制率、肺组织病毒载量、肺组织炎性因子白细胞介素(IL)-1β,白细胞分化抗原(cluster of differentiation,CD14),氧化应激因子丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量、下丘脑环磷酸腺苷(cAMP)及前列腺素(prostaglandin,PG)E2含量、外周血CD4^(+)T淋巴细胞,CD8^(+)T淋巴细胞及B淋巴细胞百分比的影响评价药物对模型的治疗作用。结果人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺证小鼠病证结合模型小鼠体重减轻,摄食及饮水量下降明显,扎堆不动,反应迟缓,皮毛干枯不泽,大便粘腻,小便量少色黄,体外培育牛黄可明显改善模型小鼠上述状态。体外培育牛黄可降低模型小鼠肺指数;明显降低模型小鼠肺组织病毒核酸表达量;显著降低模型小鼠肺组织炎性因子CD14、MDA含量,显著升高SOD含量;显著降低模型小鼠c AMP含量,对PGE2含量无显著变化;显著升高模型小鼠CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞的百分比。结论体外培育牛黄对人冠状病毒肺炎湿热疫毒袭肺证小鼠病证结合模型具有显著的治疗作用,可通过降低模型小鼠肺指数、调节下丘脑CAMP及PGE2的含量、调节免疫机能和抑制炎性因子释放等作用环节进行治疗,为临床用药提供实验室依据。

体外培育牛黄对人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证小鼠病证结合模型的效用特点

目的:研究药物—体外培育牛黄对人冠状病毒肺炎疫毒袭肺证动物模型的药理作用特点。方法:按体质量等级将48只Balb/c小鼠随机分为6组,分别为空白组,人冠状病毒229E感染组,寒湿组,人冠状病毒肺炎疫毒袭肺复合模型组,体外培育牛黄高、低剂量组,每组8只。采用寒湿环境诱导+人冠状病毒229E感染形成复合动物病证结合模型,在感染当天给予体外培育牛黄(0.128,0.064 g·kg^(-1)),灌胃给药,连续3 d,观察小鼠一般状态,小鼠肺指数和肺指数抑制率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠肺组织病毒载量;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清胃动素(MTL),胃泌素(GAS)含量,以及小鼠肺组织细胞因子白细胞介素(IL)-10,IL-6,肿瘤坏死因子(TNF)-α及γ-干扰素(IFN-γ)含量;采用流式细胞术检测小鼠血中CD4^(+)T淋巴细胞,CD8^(+)T淋巴细胞及B淋巴细胞。结果:体外培育牛黄高、低剂量组可明显改善模型小鼠的一般状态,与空白组比较,模型组小鼠肺指数显著升高(P<0.01),小鼠肺组织核酸表达显著升高(P<0.01),小鼠血清中MTL含量显著增高,GAS含量明显降低(P<0.05,P<0.01),肺部组织细胞免疫因子TNF-α,IL-10和IL-6均显著增高(P<0.01),小鼠外周血淋巴细胞CD4^(+)T细胞,CD8^(+)T细胞及B细胞均显著降低(P<0.01);与模型组比较,体外培育牛黄高、低剂量组小鼠肺指数均显著降低(P<0.01),小鼠肺组织核酸表达显著降低(P<0.01),MTL含量显著降低(P<0.01),小鼠肺组织中IL-6,IL-10,TNF-α,IFN-γ含量均显著降低(P<0.01),体外培育牛黄高剂量组可显著升高CD4^(+)T细胞(P<0.05),体外培育牛黄可一定程度减轻模型小鼠肺组织炎性渗出,肺间质水肿及瘀血等病理表现。结论:体外培育牛黄对人冠状病毒感染致疫毒袭肺证小鼠复合模型的药理作用有明显的改善效用,可显著改善小鼠行为及排泄物状态、降低模型小鼠肺指数、提高肺指数抑制率、降低小鼠肺组织核酸表达、减轻肺组织病理损伤、调节免疫机能和抑制炎性因子释放等作用环节发挥作用,为临床用药提供依据。