血栓抽吸导管在治疗下肢深静脉血栓形成中的应用

目的探讨血栓抽吸导管在治疗下肢深静脉血栓形成(DVT)中的应用效果。方法收集2022年9月至2023年2月于山东省立第三医院使用血栓抽吸导管进行治疗的37例下肢DVT患者的临床资料,观察出血情况、血红蛋白变化情况、肝肾功能及凝血功能,评估血栓清除效果、新发血栓和支架内再狭窄发生情况。结果37例下肢DVT患的手术成功率为100%,其中,13例进行一期髂静脉支架植入术,6例进行球囊扩张成形术。1例因脑出血术后未行尿激酶溶栓治疗,其余患者术后均留置血管鞘进行尿激酶溶栓治疗。37例术后均未发生出血不良事件,术后72 h内均无肝肾功能损伤;术后膝关节上20 cm处腿围、膝关节下10 cm处腿围、血红蛋白水平均明显小于术前(P﹤0.01)。结论使用血栓抽吸导管治疗下肢DVT安全、有效,术后联合尿激酶进行溶栓治疗可增加血栓清除效果。

腔内微波消融闭合术治疗穿通静脉功能不全的临床研究

目的评价超声引导下腔内微波消融闭合术(EMWA)治疗穿通静脉功能不全(IPVs)的疗效。方法本研究为回顾性纵向研究。回顾性分析2020年7月至2021年7月山东大学附属省立第三医院血管外科采用超声引导下EMWA治疗的138例IPVs患者(148条患肢, 295条IPVs)的临床资料。观察分析患者术后2周、3个月及1年的并发症、静脉临床严重程度评分(VCSS)和IPVs闭合率的情况。结果共纳入138例患者, 其中男性66例, 女性72例, 年龄(57.67±10.82)岁。138例患者均完成1年随访, 随访期间患者术后并发症情况随时间的延长逐渐改善, 未出现皮肤坏死情况, 无死亡事件。患者术后2周、3个月及1年的VCSS评分随时间逐渐改善, 差异有统计学意义(F=335.843, P<0.001), IPVs闭合率分别为100%(295/295)、96.6%(285/295)及92.2%(273/296)。术前与术后1年IPVs部位分布情况的差异无统计学意义(χ^(2)=0.916, P=0.632)。术前与术后1年IPVs直径分布情况的差异无统计学意义(χ^(2)=0.286, P=0.867)。结论超声引导下EMWA治疗IPVs, 术后随访无严重并发症;患者术后VCSS评分较术前明显改善, IPVs闭合情况确切, 且其直径和分布部位对IPVs闭合率影响较小。

基于自组装纳米多肽及脂肪间充质干细胞3D打印组织模型的研究

目的 观察自组装纳米多肽与人脂肪间充质干细胞（Ad-MSCs）3D打印出的组织工程学模型内细胞生长状态及多向分化能力.方法 分离、培养原代Ad-MSCs,流式细胞仪鉴定,以自组装纳米多肽、Ad-MSCs混合溶液为＂生物墨汁＂,利用3D生物打印技术,打印组织工程学模型.诱导其内的Ad-MSCs成骨和成脂分化并分别与对照组进行染色比较.结果 原子力显微镜下观察到纳米多肽纤维结构直径为10-30nm,长200-500nm,具有纳米级材料特点.流式细胞仪鉴定可见分离、培养的细胞CD29（98.51%）、CD90（97.87%）、CD166（98.32%）表达阳性,不表达CD31（1.58%）、CD34（2.42%）、CD45（2.95%）和人类白细胞抗原DR基因（HLA-DR）（0.53%）,符合Ad-MSCs免疫表型.随后利用＂生物墨汁＂打印出组织工程模型,对并其内的Ad-MSCs进行诱导分化,分别对实验组和对照组进行相关染色,茜素红S染色可见成骨诱导实验组中钙结节形成,油红O染色可见成脂诱导实验组Ad-MSCs内脂滴着色,两对照组不着色.结论 以自组装纳米多肽、脂肪间充质干细胞混合溶液为＂生物墨汁＂3D打印出的组织工程学模型内Ad-MSCs生长状态良好,仍具有较强的分化能力.

功能性自组装纳米多肽水凝胶负载脂肪间充质干细胞的研究

目的观察功能性自组装多肽的理化性质、自组装成水凝胶特性及对细胞进行三维培养。方法合成RADA、RGD、KLT3种多肽并制备RAD／KLT!RGD多肽混合溶液，盐溶液诱发多肽溶液自组装成水凝胶。原代培养脂肪间充质干细胞并对其进行鉴定，使用水凝胶对其三维培养来观察其在水凝胶中的生长，并设置RAD／KLT水凝胶组做对比。结果多肽溶液成功自组装成水凝胶，干细胞在三维培养中迁移、分化并有成管腔的趋势，RAD／KLT／RGD水凝胶[（87．75±4．79）个细胞／视野]较对比组[（65．50±6．25）个细胞／视野]黏附生长了更多的细胞（P〈0．05）。结论RAD／KLT／RGD功能性自组装纳米多肽水凝胶是一种更为优良的组织工程框架材料。

传代扩增后的脂肪来源间充质干细胞向内皮细胞分化的研究

目的 观察脂肪来源的间充质干细胞（ad-MSCs）在经过传代扩增后诱导内皮细胞方向的分化能力.方法 使用胶原酶消化法分离培养原代脂肪间充质干细胞,检测其生长特性并用流式细胞术对其进行了联合免疫表型鉴定,诱导其多向分化来确定其干细胞特性.扩增后的高代次（P5）脂肪间充质干细胞被用于进行3种条件下的诱导内皮细胞方向分化（基础培养基＋血管内皮生长因子（VEGF）、内皮细胞支持液＋VEGF、仅用内皮细胞支持液）,诱导时间为12 d,之后用流式细胞术检测CD31并用免疫细胞化学法检测Ⅷ因子表达来评估分化效果.结果 我们成功地进行了脂肪间充质干细胞的原代培养,原代培养的细胞表现出了成纤维细胞样形态,在免疫表型和多向分化能力都表现出了干细胞特性.经过仅12 d的诱导内皮细胞分化后,EGM2-MV＋ VEGF组开始表达CD31和Ⅷ因子,而另外两组未发现表达.结论 传代扩增后的高代次的脂肪间充质干细胞仍有较强的内皮细胞分化能力,EGM2-MV＋ VEGF能更高效地促进其向内皮细胞分化.

载基因磁性金纳米微粒的制备及在细胞中的表达

目的制备一种聚乙二醇（PEG）修饰的磁性金纳米微粒作为基因载体用于细胞转染。方法共沉淀法合成并修饰磁性金纳米微粒。透射电镜及纳米粒度分析仪检测磁性金纳米微粒表征。PicaGreen法测定磁性金纳米微粒质粒包封率，凝胶电泳法检测质粒的完整性与抗核酸酶解性。荧光显微镜观察载质粒磁性金纳米微粒转染人结肠癌kVo细胞后绿色荧光蛋白（GFP）表达。结果制备的磁性金纳米微粒呈圆形或类圆形，粒径为（96．45±3．87）nm，zeta电位为（39．05±1．98）mV。磁性金纳米微粒与质粒质量比为5：1时达到最大包封率为80．38％，体外释放结果显示载质粒磁性金纳米微粒在0．5h就检测到质粒释放，24h释放率为（58．10±4．83）％，磁性金纳米微粒能够完整地包封与释放质粒，且能降低所包封质粒被酶解破坏的可能。细胞转染后24h在荧光显微镜下观察到绿色荧光表达，在一定时问内随着时间延长荧光强度增加。结论制备出一种有效的磁性金纳米基因载体，成功进行细胞转染且所转染基因能在细胞内顺利表达。