肝细胞肝癌组织中A1CF、UPF1的表达及临床意义

目的研究肝细胞肝癌(HCC)组织中APOBEC1互补因子(A1CF)和上移码蛋白1(UPF1)的表达及临床意义。方法选取2017年1月至2020年1月在该院诊治的118例HCC患者作为研究对象。应用荧光定量PCR检测组织中A1CF、UPF1 mRNA表达。应用免疫组织化学检测组织中A1CF、UPF1蛋白表达。A1CF、UPF1 mRNA表达的相关性采用Pearson相关分析。A1CF、UPF1蛋白表达的相关性采用Spearman秩相关分析。分析HCC癌组织中A1CF、UPF1蛋白表达与临床病理特征的关系。Kaplan-Meier生存分析A1CF、UPF1蛋白表达对HCC患者生存预后的影响。单因素及多因素COX回归分析影响HCC患者临床生存预后的因素。结果癌组织中A1CF mRNA相对表达量显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001)。癌组织中UPF1 mRNA相对表达量显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001)。HCC癌组织中A1CF蛋白表达阳性率明显高于癌旁组织(P<0.001),HCC癌组织中UPF1蛋白表达阳性率明显低于癌旁组织(P<0.001)。HCC癌组织中A1CF与UPF1 mRNA表达呈显著负相关(r=-0.713,P<0.001)。A1CF与UPF1蛋白表达亦呈显著负相关(r s=-0.782,P<0.001)。不同肿瘤分期、组织学分级HCC癌组织中A1CF、UPF1蛋白表达阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。A1CF阳性组患者累积生存明显低于A1CF阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);UPF1阴性组患者累积生存低于UPF1阳性组差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤分期Ⅲ期、组织学分级Ⅲ级、A1CF蛋白阳性、UPF1蛋白阴性是影响患者不良生存预后的独立危险因素。结论HCC中A1CF表达升高,UPF1表达降低,二者表达与肿瘤TNM分期、病理分级有关,是影响HCC患者不良预后的独立因素。

LC+LCBDE+PDC在胆总管结石合并胆囊结石患者中的应用价值探讨

目的 探讨腹腔镜胆囊切除+胆总管切开取石+胆管一期缝合术(LC+LCBDE+PDC)在胆总管结石合并胆囊结石患者中的应用价值。方法 选取2020年6月—2022年6月分别接受腹腔镜胆囊切除+胆总管切开取石+胆管一期缝合术(LC+LCBDE+PDC)治疗的51例胆总管结石合并胆囊结石患者作为LCBDE组,同期选取接受内镜逆行性胰胆管造影(ERCP)+LC治疗的29例胆总管结石合并胆囊结石患者作为ERCP组;对两组患者临床资料进行回顾性分析。结果 LCBDE组手术时间、住院时间、结石清除率均显著优于ERCP组(P<0.05),两组术后肛门排气时间比较差异不显著(P>0.05);治疗前两组焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、SF-36评分比较差异不显著(P>0.05),治疗后两组SAS、SDS、SF-36评分均得到显著改善(P<0.05),且术后LCBDE组SAS、SDS、SF-36评分均显著优于ERCP组(P<0.05);LCBDE组并发症发生率显著低于ERCP组(P<0.05)。结论 与ERCP+LC相比,LC+LCBDE+PDC用于治疗胆总管结石合并胆囊结石有效性和安全性均更高,且能更好地改善患者负面情况和生活质量,值得临床借鉴推广。

表柔比星-聚乳酸缓释微球局部治疗肝癌

目的研究表柔比星-聚乳酸缓释微球(EPI-PLA-MS)局部给药治疗肝癌的效果。方法复乳-溶剂挥发法制备EPI-PLA-MS。将40只昆明小鼠随机分为5组,每组8只,分别腹腔注射不同剂量的游离表柔比星(FEPI),计算最大耐受量(MTD)。H22皮下实体瘤肝癌荷瘤小鼠3组,每组5只,分别用生理盐水(normalsaline,NS)、空白微球和含药微球(含EPI9mg/kg)瘤内注射给药,2周后取瘤称重。H22腹水型肝癌荷瘤小鼠3组,每组5只,分别用NS、空白微球和含药微球(含EPI9mg/kg)腹腔注射给药,计算动物生命延长率。结果FEPI腹腔注射的MTD为9mg/kg。EPI-PLA-MS瘤内给药后含药微球组和空白微球组的抑瘤率分别为40.35%和36.09%。腹腔给药后能显著延长荷瘤鼠的生存时间,含药微球组和空白微球组生命延长率分别为153.49%和142.22%。结论EPI-PLA-MS是一种有效低毒的药物新剂型,在局部治疗肝癌方面具有良好的临床应用前景。

单用表阿霉素缓释剂及联合表阿霉素游离剂腹腔化疗治疗肝癌的疗效

目的观察单用表阿霉素（EPI）聚乳酸（PLA）缓释微球（MS）及联合游离表阿霉素（FEPI）腹腔化疗治疗肝癌的疗效。方法将35只H22腹水型肝癌荷瘤小鼠分为7组,每组5只,分别予空白微球,生理盐水,低、中、高剂量载药微球（分别含EPI 9、18、36 mg/kg）,FEPI（9 mg/kg）和EPI-PLA-MS＋FEPI（各含EPI 4.5 mg/kg）,经腹腔注射给药,计算动物生命延长率。结果EPI-PLA-MS能有效延长荷瘤鼠的生存时间,并呈量效关系,小鼠最大耐受量约为18-36 mg/kg。联合用药组的平均生存时间、中位生存时间和生命延长率均达到最高值,分别为（40.0±16.9）d、33.5 d和222.58%。结论EPI-PLA-MS缓释剂与游离剂型联合腹腔化疗是一种新型、高效的给药方式,可有效治疗肝癌。

化疗药缓释制剂局部治疗肝癌的研究进展

本文综述了近年来应用抗癌药缓释剂对肝癌局部化疗的实验室及临床研究进展;并借鉴了其他实体肿瘤的研究成果,提出植入式缓释剂置入肝癌局部行间质化疗的新型给药途径。

控缓释制剂治疗肝癌新进展

控缓释制剂是一种新型药物剂型,与传统药物相比,达到了增效减毒的目的,对毒性大的抗肿瘤药意义非凡。近年来在肝癌研究方面取得了令人鼓舞的成果,拓宽了肝癌治疗尤其是化疗的思路。控缓释制剂包括多种形态,可经多途径给药应用于肝癌治疗。

腹腔镜胆总管探查的若干问题探讨

目的探讨腹腔镜下胆总管探查取石术的优点、方法、适应证及术后胆总管Ⅰ期缝合术的必要条件等问题。方法分析60例胆总管结石患者(部分合并结石性胆囊炎)行腹腔镜胆总管切开取石术的术式及病例资料特点。结果 60例患者大部分在腹腔镜下成功完成胆囊切除、胆总管切开取石术,中转开腹3例,平均手术时间140 min,出血量微量,平均住院时间8 d。1例患者术后2 d T管脱落后出现胆漏,行EST及ENBD引流后治愈,1例术后造影后胆漏,保守治疗1周治愈,无二次手术;残余结石2例,2个月后经T管胆道镜结石取出,其余患者术后无严重并发症发生,造影无胆管狭窄随访8个月无结石复发。结论腹腔镜下胆总管切开取石术具有微创、安全的优点,在严格把握手术指征的前提下,是值得推广的临床治疗胆总管结石的手术方式。

肝癌组织中p33^(ING1b)表达水平及其与p53关系和临床意义

目的探讨肝癌组织中p33ING1b表达水平及其与p53的关系和临床意义。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测55例肝癌及其癌旁组织p33ING1b mRNA水平,同时用免疫组化法检测p53蛋白表达。结果肝癌组织p33ING1b mRNA表达量为(0.410±0.175),明显低于癌旁组织(0.529±0.203)(P<0.05)。p33ING1b表达与肝癌的病理分级、淋巴结转移、包膜浸润相关,而与年龄、性别、肿瘤大小、癌栓形成、合并肝硬化无关。p53蛋白阳性肝癌组p33ING1b表达(0.492±0.196)明显高于p53蛋白阴性组(0.363±0.176)(P<0.05)。结论p33ING1b表达下调在肝癌发生、发展中起重要作用,可以作为肝癌分化、侵袭性及预后的评价指标。p33ING1b表达异常可能是野生型p53在肝癌细胞的失活机制之一。

胚胎肝脏原始细胞表型及生物学特性

背景:目前肝干细胞尚无特异性标志物,从胚胎中建立具有干细胞样特性的肝脏原始细胞群是鉴定及研究肝干细胞的一个可行方法。目的:观察胚胎肝原始细胞表型及生物学特性,寻找肝原始/干细胞候选细胞群。方法:酶消化法分离、培养孕13.5d的BALB/C小鼠胚胎肝原始细胞,免疫细胞化学染色及免疫荧光染色、Western blot、RT-PCR法测定AFP/Albumin/CK19/c-Met/E-cadherin等肝干细胞表面标记,以及CD45、CD14、SMA等非肝干细胞标记的表达;相差显微镜及透射电镜观察细胞形态结构;流式细胞仪测定细胞周期分布时相;表皮生长因子加二甲基亚砜诱导分化成熟后行PAS糖原染色。结果与结论:实验成功分离得到纯度较高的干细胞,原代细胞多呈集落样生长,小圆形。细胞周期测定提示细胞多数处于静止期,符合干细胞特点。透射电镜观察细胞核浆比例大,细胞器不成熟,呈现原始细胞特点。流式细胞周期测定结果S期占10.8%,G2/M期占10.6%,无异常DNA含量。PAS染色后阳性对照组肝癌细胞的糖原主要表达在靠近一侧的核周边胞质内,呈强阳性;而胚胎肝前体细胞诱导组,核浆比例大,部分细胞胞质内可见较弱的糖原表达,充满胞质。提示实验初步建立表达AFP+Albumin+CK19+c-Met+E-cadherin+标志的集落样生长的肝原始细胞群,其表达多种干细胞表型,具有未成熟肝干细胞特点,可能作为肝干细胞候选细胞。

熊胆对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的影响

探讨熊胆对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱发大鼠肝癌的影响。将大鼠随机分为正常组、模型组及熊胆两个剂量组(200、400 mg.kg 1,灌胃18周,每周5次)。DEN诱发肝癌,用熊胆粉干预。实验观察了体重等一般情况,检测肝功能,HE染色观察肝组织病理改变,免疫组化检测肝组织中增殖细胞核抗原(PCNA)和平滑肌动蛋白(α-SMA)。结果显示:4周后正常组体重高于其他各组(P<0.01),熊胆两组均高于模型组(P<0.05);除正常组外,其余各组谷丙转氨酶、总胆红素显著升高,但熊胆两组显著低于模型组;模型组呈典型肝硬化、肝癌改变,熊胆两组肝硬化程度较轻、癌组织分化较好;模型组高表达PCNA和α-SMA,熊胆两组较模型组弱,α-SMA减少具有显著意义。实验提示:熊胆在一定程度上抑制了DEN诱发肝癌的进程,可能与抑制肝星状细胞活化并减轻肝损害、肝硬化有关。

干细胞、肿瘤干细胞与肿瘤

干细胞是一种具有自我更新、无限增殖和多向分化能力的细胞。而多数肿瘤是由不同增殖潜能的不均一性细胞构成。随着对干细胞的研究不断深入,使人们对肿瘤的发生机制重新进行了审视,并在造血系统、脑、肺、乳腺等部位肿瘤中发现极少量的具有与干细胞非常类似生物学特性的细胞,称之为肿瘤干细胞,它们很可能是肿瘤细胞的起源.肿瘤干细胞的提出,使得靶向性杀伤肿瘤干细胞从而使根治肿瘤和防止肿瘤复发和转移成为可能。所以研究肿瘤干细胞的起源及其与肿瘤的发生关系,成为当前研究和治疗肿瘤领域的新热点。本文就肿瘤干细胞的存在证据、干细胞与肿瘤干细胞的异同点及它们与肿瘤发生之间的关系作简要的综述。

胰腺囊腺瘤合并结石性胆囊炎1例报告并文献复习

女性病人,52岁,因反复右上腹痛2年余,加重1 d入院。实验室检查:CEA(癌胚抗原)、CA19-9(糖基抗原)、AFP(甲胎蛋白)正常。B超示'胰头区囊性包块,轻度脂肪肝.胆囊多发结石',CT示'胰头5.2 cm囊性占位,考虑囊腺癌可能性大;胆囊多发结石并胆囊炎,左侧肾上腺腺瘤;双侧胸腔少量积液',诊断:(1)胆囊结石并急性胆囊炎;(2)胰头囊腺瘤。于2010-11-26行急性胆囊切除,胰头囊肿壁活检,胰头囊肿胃吻合术。

胚胎肝干细胞分离与移植治疗裸鼠急性肝损伤

目的探讨胚胎肝脏原始／干细胞移植治疗急性肝功能损伤裸鼠的可能性与有效性。方法酶消化法分离孕13．5d的BALB／C小鼠的胚胎肝脏原始／干细胞，免疫荧光染色法及RT—PCR法鉴定AFP、Albumin、CK19、c—Met等肝系和胆系标志物，给四氯化碳（CCl4）诱发的肝毒性损伤的裸鼠尾静脉注射4×10^5个干细胞，于注射前和注射后第1、2、4、7天取裸鼠血清，测定肝功能指标，观察肝脏组织学的改善情况。结果经分离可得到具有干细胞特点的胚肝原始细胞，治疗组裸鼠在干细胞移植后肝功能指标逐渐降低，第1、2、4天均低于对照组，治疗组裸鼠肝脏组织学的病理损伤的恢复比对照组快。结论酶消化法能够分离得到较多胚胎肝脏原始／干细胞，并且具有一定的改善急性肝损伤裸鼠的肝功能及肝脏病理指标的作用。

肝干细胞来源的研究进展

从广义上讲，肝干细胞并非特指某一类细胞，而是与肝脏胚胎发育及再生有关的各类具有干细胞特性细胞类型的总称，是一种具有分化为成熟肝细胞和胆管细胞能力和自我更新能力的多潜能干细胞。根据其起源的不同，通常可分为肝源性肝干细胞和非肝源性肝干细胞。

加速康复外科理念在一例巨块型肝癌转化切除围手术期中的运用

快速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)理念已获得国内大部分外科医生认可,但围绕其实施和应用仍然存在诸多争议和质疑,本文结合1例巨块型肝癌转化切除病例探讨ERAS理念用于肝癌切除术的安全性及有效性。

熊去氧胆酸诱导 HepG2和 SMMC-7721肝癌细胞凋亡的机制

目的：初步考察熊去氧胆酸（ UDCA）对肝癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用及机制。方法以人肝癌细胞HepG2、SMMC－7721为模型，熊去氧胆酸干预，利用MTT、倒置显微镜、荧光显微镜、流式细胞术、Western 印迹，分别观察和检测细胞增殖、细胞凋亡以及凋亡相关基因Bax、Bcl－2、Fas的表达情况。结果 UDCA显著抑制肝癌细胞生长，具有量效和时效关系， UDCA 400μg／ml作用HepG272h后细胞抑制率达到55．8％，作用48 h后HepG2、SMMC－7721两株细胞IC50分别为397．3、387．7μg／ml；UDCA诱导肝癌细胞凋亡，流式细胞仪检测结果显示，200μg／ml UDCA作用48 h后HepG2[对照组（1．37±0．61）％，UDCA 组（14．28±2．62）％]、SMMC－7721细胞[对照组（1．04±0．46）％，UDCA组（14．08±2．08）％]均表现出明显的早期凋亡，且差异具有统计学意义（P＜0．01），同时显著上调Bax和下调Bcl－2表达，P＜0．05。结论 UDCA抑制人肝癌细胞HepG2、SMMC－7721增殖，通过线粒体通路诱导肝癌细胞凋亡。

术后加速康复理念应用于腹腔镜右半肝切除治疗巨块型肝癌一例

我中心于2016年收治一例巨块型肝癌患者,对其实施腹腔镜肝切除并结合应用术后加速康复外科（enhanced recovery after surgery,ERAS）理念，取得良好效果，现报道如下。

基于1例十二指肠巨大间质瘤局部切除术后严重并发症救治的多中心讨论

患者女性, 60岁。因体检时发现胰头占位1周, 拟诊断为"胰头恶性肿瘤"于2020年7月7日收入复旦大学附属中山医院胰腺外科。患者自发病以来无腹胀、腹痛、纳差、黄疸、发热等不适。入院5 d前于外院行增强MRI及PET-CT检查, 考虑为胰腺钩突癌。患者既往有高血压病史10年余, 口服氯沙坦钾氢氯噻嗪 62.5 mg, 1次/d, 自诉血压控制可。30余年前曾因"结核"行腹部肿物切除术, 具体不详。一般体检无特殊, 腹部未及明显阳性体征。入院查血尿常规、生化指标、肿瘤标志物均正常, 增强MRI及胰周CT血管造影检查, 均提示为十二指肠间质瘤。肿瘤最大径6 cm, 马蹄形, 内侧缘位于肠系膜上静脉后方(图1)。语】关于瘘、感染、营养支持、引流的一些外科基本问题, 目前已有定论。然而, 具体到每例患者的临床实际, 诊疗过程中常出现各种复杂的临床问题, 且互相混杂、交互影响、动态发展。尤其对于一些术后严重并发症的处理, 很难有循证医学证据。本例患者的病情复杂, 经局部切除后出现了多种严重并发症, 历经100余天的治疗后才顺利出院。来自国内外11家医院的13名中青年外科医师针对此例患者并发症处理方法和时机进行了两次讨论, 并根据各自中心的经验提出了宝贵的建议, 其中蕴藏着各位外科医师严谨的临床思维和经验教训, 很有借鉴意义。本文基本保留了各位讨论专家的意见, 供同行在不同应用场景中借鉴参考。

肝癌预后模型的构建及其在免疫治疗中的作用研究

目的长非编码RNA (lncRNAs)在肝细胞癌(HCC)的发生发展中起重要作用,寻找可能的基因组不稳定性相关lncRNAs(GI-lncRNAs),建立可以预测HCC患者总体生存率的预后模型。方法利用肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)的肝细胞癌患者的表达数据、临床资料及突变数据,根据不稳定性计算模型,筛选GI-lncRNAs;进行层次聚类验证后,采用单因素和多因素Cox分析建立预后模型,在对预测的可靠性进行评估后,根据预后模型,进行风险亚组间免疫特点、ICI治疗及化学治疗综合分析。结果共鉴定出88个GI-lncRNAs,建立基于4个GI-lncRNAs(MIR210HG、LUCAT1、AC245041.2、AC010643.1)的风险评分模型;风险评分是肝癌患者的独立预后因子,可用于预测患者预后及肿瘤分级和分期情况;风险亚组间存在体细胞突变及免疫特征差异;风险评分与CD274、CTLA4、HAVCR2、IFNG、PDCD1、TNF的高表达呈正相关,且高风险组样品对阿霉素、丝裂霉素C更加敏感。结论基于基因组不稳定性相关lncRNAs的预后模型可以预测肝细胞癌患者的预后。