前列地尔对体外培养类缺血再灌注模型视网膜神经节细胞的自噬影响

目的:通过观察前列地尔对体外培养类缺血再灌注模型视网膜神经节细胞(RGC)自噬的影响,探讨其产生保护作用的机制。方法:以原代培养Sprague-Dawley大鼠RGC为研究对象,将培养的细胞随机分为对照组、模型组、给药组。建立类缺血再灌注损伤模型,给药组在建立模型前后加入浓度为45μg/L前列地尔。采用荧光定量PCR方法检测各组细胞中ULK1、Beclin1、Bcl-2mRNA的相对表达量。结果:①与对照组相比,ULK1mRNA、Beclin1mRNA表达均明显升高,其中模型组(P<0.01),给药组(P<0.05);而给药组ULK1mRNA、Beclin1mRNA表达较模型组明显下调(P<0.01)。②模型组与对照组相比,Bcl-2mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);给药组与对照组相比,Bcl-2mRNA表达升高(P<0.05),与模型组相比表达也明显升高(P<0.01)。结论:前列地尔对体外培养类缺血再灌注模型RGC可能通过抑制细胞自噬作用,进而发挥其保护细胞的作用。

青光眼非滤过泡依赖性手术的应用进展

常用的抗青光眼手术为滤过泡依赖性手术。滤过泡的形成带来一系列的并发症,且滤过道瘢痕化成为诸多抗青光眼手术失败的主要原因。非滤过泡依赖性手术的开展及新型房水内引流装置的研发为此提供了解决途径。近年来针对非滤过泡依赖性手术的研究已取得突破性进展,尤其是脉络膜上腔引流器植入术。本文就近年来非滤过泡依赖性手术的应用进展做一综述。

慢性青光眼血流动力学的临床研究

目的探讨中、晚期慢性青光眼患者眼血流情况及血管因素在视功能损害机制中的作用。方法用彩色多普勒成像检测中、晚期原发性开角型青光眼22例(35只眼)、原发性慢性闭角型青光眼30例(53只眼)和正常组30例(30只眼)的眼动脉(ophthalmicartery,OA)、睫状后短动脉(shortposteriorciliaryartery,SPCA)和视网膜中央动脉(centralretinalartery,CRA)的收缩期峰值血流速度(peaksystolicvelocity,PSV)、舒张末期血流速度(enddiastolicvelocity,EDV)和阻力指数(resistanceindex,RI)。结果原发性开角型青光眼、慢性闭角型青光眼的阻力指数显著性增高,与正常组比较差异均有显著性(P<0.01);两组患者舒张末期的血流速度明显减慢,与正常组比较差异均有显著性(P<0.01);两组间的收缩期、舒张末期的血流速度、阻力指数的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论中、晚期慢性青光眼患者血流速度尤其舒张末期血流速度明显减慢,阻力指数增大导致视神经局部的血流循环障碍。青光眼患者视功能损害与视神经的血供不足有关。

HAD房水引流物植入术治疗新生血管性青光眼观察

目的 探讨HAD房水引流物在治疗新生血管性青光眼的有效性和安全性。方法 采用HAD房水引流物植入治疗有视功能的新生血管性青光眼20例，术后平均随访10.5个月。结果 术后1月手术成功率为65％，6个月时手术成功率为55％。术后的并发症有：早期低眼压、浅前房，前房出血、引流管接触晶状体或角膜、脉络膜脱离、引流盘周围瘢痕化。结论 HAD房水引流物植入术为治疗新生血管性青光眼提供一种安全、有效的方法。

青光眼教学查房体会

青光眼发病机制具有复杂性、抽象性的特点,是眼科学教学查房中的重点和难点之一,同时眼科学是一门专科性实践很强的临床学科,针对不同层次的学生,教学查房的内容及重点应进行适当的调整。

慢性青光眼血流动力学及其影响因素分析

目的:探讨慢性青光眼眼部血流情况及其影响因素和青光眼的可能发病机制。方法:采用彩色多普勒成像检测中、晚期原发性开角型青光眼(POAG)54例(65眼)、原发性慢性闭角型青光眼(PCACG)32例(53眼)和正常组30例(30眼)的眼动脉、睫状后短动脉、视网膜中央动脉的收缩期峰值血流速度、舒张末期血流速度及阻力指数。应用计算机进行多因素Logistic回归分析。结果:POAG、PCACG的阻力指数显著增高,与正常对照组比较差异均有统计学意义(均P<0·01)。两组青光眼舒张末期的血流速度明显减慢,与正常对照组比较差异均有统计学意义(均P<0·05)。多因素Logistic回归分析,筛选出影响青光眼的3个显著因素。眼动脉的舒张末期血流速度是影响PCACG的显著因素(P=0·000);眼动脉、睫状后短动脉的舒张末期血流速度是影响POAG的显著因素(P<0·01)。结论:慢性青光眼的视功能损害与眼部血流速度尤其舒张末期血流速度及阻力指数密切相关。眼动脉的舒张末期血流速度减慢可能是PCACG前房角关闭的诱发因素。眼动脉、睫状后短动脉的舒张末期血流速度减慢可能是POAG视神经缺血的主要原因。

针刺分离结膜下注射干扰素治疗失败的滤过泡

目的观察青光眼滤过性手术后早期失败的滤过泡进行针刺分离和应用干扰素α-2b（INFα-2b）的疗效。方法将50例（50眼）早期失败的滤过泡（术后3月内）的病例随机分为INF组和对照组，各25眼。INF组应用干扰素α-2b行滤过泡针刺分离和结膜下注射，对照组采用单纯滤过泡按摩。随访6～12月。结果治疗前INF组与对照组平均眼压之间差异无统计学意义（P〉0．05）．INF组治疗前平均眼压为（31．00±5．57）mmHg，治疗后为（9．3±1.13）mmHg，治疗前，后眼压差异有统计学意义（P〈0．01）。冶疗1月后，INF组平均眼压为（12．30±3．56）mmHg，功能性滤过泡形成率为80％，条件成功率为88％；而对照组此3参数依次为（17．37±5．79）mmHg，48％和56％，两组相应参数之间的差异均具有统计学意义（P〈0．05）。6月后INF组上述3参数为（14．15±4．6）mmHg，76％和84％；对照组为（23．35±6．05）mmHg、40％和52％，两组相应参数之间的差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论应用干扰素α-2b对早期失败的滤过泡行针刺分离和结膜下注射治疗，可挽救一部分濒临失败的病例。

可调整缝线在小梁切除术中的临床观察

目的 观察可调整缝线在小梁切除术中的疗效。方法 将5 0例(5 5眼)病例随机分为对照组和治疗组,观察两组术后视力、眼压、前房、滤过泡及并发症的情况,并作统计学分析。结果 治疗组术后浅前房发生率为6 . 9% ,对照组术后浅前房发生率为38 4 6 % ,经统计学分析差异有显著性(P <0 . 0 5 ) ;出院时两组眼压、滤过泡及视力的差异无显著性(P >0 . 0 5 )。术后6个月,治疗组中眼压控制、形成功能性滤过泡者均占93 10 % ,对照组中眼压控制、形成功能性滤过泡者均占6 5 . 38% ,经统计学分析差异有显著性(P <0 . 0 5 ) ;治疗组中视力不变与提高者占89. 6 6 % ,对照组中视力不变与提高者占6 1 .5 4 % ,经统计学分析差异有显著性(P <0 . 0 5 )。结论 可调整缝线在小梁切除术中可使术后前房迅速形成,减少浅前房发生率,形成功能性滤过泡,达到理想眼压、保持或提高视力,从而提高青光眼手术的成功率。

20例眼内硅油并发症及治疗体会

２０例眼内硅油并发症及治疗体会广西医科大学一附院眼科周卫为１９９６年以来我院行眼内硅油注入术共５６例，因并发症需行硅油取出者２０眼占３５．７１％，现报告如下。１临床资料１．１一般资料：２０例中，男１４例，女６例；年龄１５～６２岁。右眼１１例，左眼９例...

牛角膜基质细胞的两步酶消化法高效分离及体外培养观察

背景高效、低成本分离出生物学功能活性高的角膜基质细胞是开展角膜基础研究的需要。目前的分离方法成本高、分离效率低，而通过培养达到扩增细胞数会导致细胞表型快速改变。应用成本较低的Ⅰ型胶原酶，通过改良的两步酶消化法可能达到高效、快速、低成本分离牛角膜原代基质细胞的目的。目的评价设计的Ⅰ型胶原酶两步酶消化法分离原代牛角膜基质细胞的效果，并观察体外培养原代牛角膜基质细胞的形态学变化。方法分别用基础培养液配制的0．5g／L及1．0g／L Ⅰ型胶原酶以两步酶消化法顺序消化牛角膜组织，分离角膜基质细胞，以细胞计数板进行计数，检测基质细胞收获效率；锥虫蓝染色法检测收获细胞的存活率；分离的细胞进行原代培养，倒置显微镜下观察细胞形态和生长的变化；应用Alexa488标记的鬼笔环肽检测原代培养的牛角膜基质细胞中F—actin的分布。结果牛角膜经两步酶消化法基质逐步解离和降解，绝大多数细胞得以释放和分离，分离的牛角膜基质细胞呈圆形，透亮且大小均匀。每个角膜收获（2．109±0．142）×10。个基质细胞，细胞存活率（91．693±3．551）％，贴壁率（81．195±1．214）％。原代培养的牛角膜基质细胞贴壁呈树突样，铺伸至星状，融合时树突连接呈网状，其F—aetin局限性分布于细胞皮质。结论两步酶消化法可使牛角膜基质完全消化降解，具有高细胞收获率、高细胞存活率和操作简便等特点。原代培养的牛角膜基质细胞呈树突状，F—actin分布于细胞皮质。

转化生长因子-β1介导的角膜基质细胞外基质纤维化体外三维培养模型的构建

背景 角膜损伤修复过程中细胞外基质（ECM）纤维化是角膜瘢痕形成的基础,转化生长因子-β1（TGF-β1）可引起角膜基质过度产生ECM.我们在前期的研究工作中构建了角膜基质三维培养模型,而将TGF-β1添加于该三维培养体系中是否可达到构建角膜基质ECM纤维化的体外三维培养模型有待研究.目的 评估TGF-β1对该三维培养模型中ECM纤维化相关基因表达的影响,确定该三维培养体系是否可以作为角膜基质ECM纤维化的体外三维培养候选模型.方法分离新鲜成年牛角膜,并在基础培养液（DMEM/F12＋体积分数10％胎牛血清）中进行角膜基质细胞的培养,将5＆#215;105个牛角膜基质细胞收集于15 ml离心管中构建体外三维培养模型（Pellet）,根据培养液中添加的TGF-β1质量浓度的不同分为基础培养液组（无TGF-β1）、基础培养液＋0.5 ng/ml TGF-β1组和基础培养液＋1.0 ng/ml TGF-β1组,于培养2周时用钙黄绿素-AM/碘化丙啶法（Calcein-AM/PI）法进行细胞活性测定;分别于培养后48 h、1周和2周应用实时荧光定量PCR（real-time PCR）和Western blot法检测各组Pellet中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）、ColⅢmRNA及其蛋白的表达. 结果 Pellet模型培养后48 h,角膜基质细胞开始抱团,培养后2周经Calcein AM/PI染色证实绝大多数细胞存活.培养后48 h、1周和2周,基础培养液＋0.5 ng/ml TGF-β1组和基础培养液＋1.0 ng/ml TGF-β1组角膜基质细胞中α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢmRNA的相对表达量均明显高于基础培养液组,3个组间的总体差异均有统计学意义（F分组=696.745,P＜0.001;F分组=35.166,P＜0.001;F分组=33.677,P＜0.001）,且随着培养时间的延长,α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢmRNA的相对表达量逐渐升高,差异均有统计学意义（F时间=5.863,P＜0.05;F时间=298.614,P＜0.001;F时间=607.472,P＜0.001）;ColⅢmRNA合成速率均大于Col Ⅰ mRNA的合成速率;Western blot检测发现,培养后48 h和1周α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢ蛋白的表达量为微量,培养后2周基础培养液＋0.5 ng/ml TGF-β1组Pellet模型中α-SMA、Col Ⅰ和ColⅢ蛋白的相对灰度表达量分别为0.395±0.208、1.060±0.175和0.629±0.382,基础培养液＋1.0 ng/ml TGF-β1组o-SMA、Col Ⅰ和ColⅢ蛋白的灰度表达量分别为0.758±0.228、1.201±0.187和0.753 ±0.468,组间总体比较差异均有统计学意义（α-SMA：F=10.691,P＜0.05;Col Ⅰ：F=14.094,P＜0.05;ColⅢ：F=10.995,P＜0.05）. 结论 培养液中添加TGF-β1和血清促进角膜ECM的纤维化,表现为Pellet三维培养模型中牛角膜基质细胞高表达纤维化特异性标志物.该培养体系可作为角膜基质ECM纤维化研究的体外三维培养模型.

鼻咽癌放疗后视觉通路损伤相关因素的分析

目的探讨鼻咽癌(NPC)放疗对视觉通路损伤及相关因素。方法观察进行首程放疗的254例NPC患者在治疗前、中及后视功能改变,包括远视力、眼底、视野及视诱发电位(PVEP)检查;对发生放疗性视网膜病变或有脑损伤临床表现的患者予以CT或MRI检查。结果放疗性视网膜病变发生率9.4%(24/254),放射性脑损伤发生率6.3%(16/254);视网膜病变早期(Ⅰ～Ⅱ级)PVEP的P100潜伏期(PL)正常[(84.2～102.9)ms],晚期(Ⅲ～Ⅳ级)以及出现视神经、脑损伤时,P100PL均明显延长,分别为112.2～123.2ms、112.4～137.6ms和127.5～168.6ms。本组91.7%(22/24)放疗性视网膜病变和8例脑干损伤发生在治疗后3年内。38.1%(8/24)视网膜损伤后(15.6±8.3)个月发生颞叶损伤,颞叶损伤者均先有放疗性视网膜损伤。有2例在放疗后2和3个月时发生视野损害,于首程放疗结束后9和30个月发生脑干损伤。照射剂量75～79Gy组视网膜病变和脑损伤发生率都明显比70～74Gy组高(均P<0.05)。结论NPC放疗后颞叶损伤均发生在视网膜病变之后,观察放疗性视网膜病变对发现早期放射性颞叶脑损伤可能有一定意义;放射性视网膜病变和脑损伤与照射剂量相关;视野检测对放疗后视路损伤评估有一定意义。

碱性成纤维细胞生长因子对视神经损伤的保护作用

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对视神经损伤的保护作用。方法:以30只新西兰成年白兔制作视神经挫伤模型,随机分为bFGF 800 U组、bFGF 1 600 U组和对照组。伤前、伤后1 h和30 d,分别检测并记录闪光视觉诱发电位(F-VEP),取P1波峰潜时为观察指标。结果:眼挫伤后1 h,F-VEP的P1波潜时明显延长,与伤前比较差异有统计学意义(P<0.001);伤后30 d,对照组P1波潜时比急性损伤时明显延长(P<0.05)。两个bFGF治疗组F-VEP的P1波潜时与急性损伤时比较均明显缩短(P<0.05)并接近正常。结论:bFGF对损伤后的视神经具有显著的保护及促进功能修复作用。

外伤性泪小管断裂经泪囊逆行探通吻合术

目的 评价下泪小管断裂时经泪囊切开,逆行探查寻找下泪小管鼻侧断端吻合手术的效果。方法 对住院的外伤性下泪小管断裂患者105例(105眼),先采用直视法、试探法、注液法和上泪小管环钩法等均不奏效时,即改为泪囊切开,经泪囊逆行探查寻找鼻侧断端行下泪小管断裂吻合术。术后随访并进行统计分析。结果 105例均经半年至5年以上的随访观察,获得解剖复位,自觉不流泪,冲洗通畅者102例(97.14％);冲洗不通者3例(2.86％)。结论 泪囊切开法找到泪小管鼻侧断端把握性大,继而行下泪小管断裂吻合术成功率高,是疗效肯定可供选择或必须选择的方法。

碱性成纤维细胞生长因子治疗视神经疾病的初步观察

目的 :探索碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)对视神经疾病的临床应用价值。方法 :对住院 10 8例 ( 15 9眼 )视神经疾病患者随机分为 b FGF、脑活素及对照 3个组 ,按传统常规治疗方法加用 b FGF或脑活素。以远视力作为判断疗效。结果 :b FGF组盲目复明率 ( 61.11% )明显比对照组 ( 3 2 .14 % )和脑活素组 ( 3 1.0 1% )较高 ,P均 <0 .0 5。而脑活素组与对照组间差异无显著性 ( P >0 .90 )。b FGF组总有效率 ( 66% )明显比对照组 ( 3 8.6% )和脑活素组 ( 4 4.2 3 % )高 ( P <0 .0 5 ) ,脑活素组与对照组间无显著性差异 ( P >0 .5 0 )。结论 :临床应用 b FGF治疗视神经疾病显示较好近期疗效 ,对视神经炎、视神经挫伤。

酸性成纤维细胞生长因子及其改构体对培养大鼠RGCs存活与生长的影响

目的观察不同质量浓度aFGF、MaFGF对培养的大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)生长的影响,及aFGF的神经保护活性是否依赖促有丝分裂活性。方法用不同质量浓度的aFGF和MaFGF培养RGCs。免疫细胞化学染色,计数免疫阳性细胞,计算轴突生长细胞百分率,MTT法进行检测。结果培养第3d,大部分存活细胞为Thy-1免疫细胞化学反应阳性,5d、7d后逐渐减少。实验组存活时间3～4d;培养第3d,MTT法见各组A值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),培养第5d、7d,差异有统计学意义(P<0.01);培养相同天数不同质量浓度的aFGF及MaFGF比较,差异均有统计学意义(P<0.05);相同质量浓度的aFGF各组与MaFGF各组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论aFGF、MaFGF均能促进培养大鼠RGCs的存活,并延长其存活时间;aFGF保护及促进RGCs存活的作用不依赖其有丝分裂活性。