类风湿因子阴性类风湿关节炎患者血清抗瓜氨酸肽或蛋白抗体、IL-10及IL-18检测分析

目的探讨抗瓜氨酸肽或蛋白抗体(ACPAs)、白细胞介素(IL)-10和IL-18在类风湿因子(RF)阴性类风湿性关节炎(RA)诊断中的临床意义。方法分别收集RF阴性的RA患者56例、系统性红斑狼疮(SLE)患者40例和RF阴性骨关节炎(OA)患者44例的血清,采用间接免疫荧光法检测抗角蛋白抗(AKA),采用酶联免疫吸附法检测anti-Sa、抗环瓜氨酸(CCP)多肽抗体、IL-10和IL-18。结果 AKA、anti-Sa和抗CCP抗体在RF阴性RA、SLE和OA患者中的阳性率分别为33.9%、50.0%和64.3%,抗CCP抗体阴性、RF阴性RA患者IL-10水平低于抗CCP抗体阳性、RF阴性RA患者(P<0.05),而IL-18则相反(P<0.05)。结论 ACPAs检测有助于提高RF阴性RA患者的诊断率。早期的炎症因子失衡可能与RA早期病变有关。IL-10、IL-18检测对于抗CCP抗体阴性、RF阴性临床可疑RA患者具有一定的早期预测价值和鉴别诊断价值。

ANA、抗ds-DNA和ENA多肽抗体与自身免疫性疾病的关系

目的:探讨抗核抗体(ANA)、抗ds-DNA和ENA多肽抗体检测对自身免疫性疾病的检出率和诊断价值。方法:用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗ds-DNA,用欧蒙斑点法检测ENA多肽抗体。待检测的血清样品来自65例已确诊自身免疫性疾病的患者和50例正常体检者。结果:自身免疫性疾病组与正常对照组之间的自身抗体的检出率存在着明显的差别(P<0.05)。其中ANA阳性检测率为72%,抗ds-DNA阳性检出率为52%,ENA多肽抗体的阳性检出率为62%。抗ds-DNA对SLE的阳性检出率为78%。而且,ENA多肽抗体的检测有助于多种自身免疫性疾病的诊断分型和鉴别诊断。Sm对SLE的阳性检出率为50%,SSA和SSB对SS的阳性检出率分别为75%和60%,抗Sc l-70对PSS的阳性检出率为47%。结论:ANA可作为自身免疫性疾病的筛选抗体。抗ds-DNA可作为SLE的诊断和治疗监测指标。ENA多肽抗体可作为自身免疫性疾病鉴别诊断的指标。三种抗体的联合检测可应用于自身免疫性疾病的早期诊断和治疗观察。

cDNA微阵列分析人apoE_4转基因鼠肾脏基因表达谱的变化

目的研究人apoE4转基因鼠肾脏的基因表达谱变化。方法分别提取人apoE4转基因鼠和正常C57BL/6J小鼠的肾脏总RNA,经逆转录合成cDNA探针后分别与鼠cDNA表达点阵杂交,再用ESTblot软件进行分析,并用Northern印迹证明基因表达的改变。结果人apoE4转基因鼠肾脏中有38个基因的mRNA表达升高,22个基因的mRNA表达降低。其中血浆谷胱甘肽过氧化物酶前体、视黄酸γ受体和白介素5受体等基因的表达明显增加。B-raf原癌基因、促红细胞生成素受体、整联蛋白α4的基因表达显著降低。Northern杂交证明转基因鼠肾脏的c-Jun基因表达升高。结论人apoE4转基因鼠肾脏的c-Jun、血浆谷胱甘肽过氧化物酶前体、白介素5受体等基因的表达增加;促红细胞生成素受体、整联蛋白α4等基因的表达减少。

尿β_2-m及Alb联合检测对糖尿病患者肾功能的评价

糖尿病肾病是糖尿病慢性微血管病变的一个重要表现形式。近年来,随着糖尿病患者的大量增加,人们通过研究发现,尿β_2-m、Alb与肾功能受损之间有着密切的关系,为进一步探索尿β_2-m、Alb与糖尿病肾功能损害间的关系,本文对55例Ⅱ型糖尿病患者及50例健康对照者尿中β_2-m、Alb水平进行观察,并与血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量之间的相互关系进行了分析。

糖尿病患者GAD-Ab、IA2-Ab和ICA联合检测的临床意义

目的探讨抗谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)、抗酪氨酸磷酸酶抗体(IA2-Ab)和抗胰岛细胞抗体(ICA)联合检测在糖尿病中的临床意义。方法选择糖尿病患者136例,其中1型糖尿病54例、2型糖尿病82例,同时选择健康对照者(正常对照组)65名,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测GAD-Ab和IA2-Ab,并采用间接免疫荧光法检测ICA。结果 1型糖尿病组ICA、GAD-Ab和IA2-Ab的阳性率分别为22.2%、61.1%和11.1%,明显高于2型糖尿病组(2.4%、4.9%、1.2%)及正常对照组(0%、0%、0%)(P均<0.05)。1型糖尿病组GAD-Ab阳性率明显高于ICA和IA2-Ab(P<0.001)。GAD-Ab诊断1型糖尿病的敏感性和诊断符合率均高于ICA和IA2-Ab(P<0.05);GAD-Ab+ICA、GAD-Ab+IA2-Ab、ICA+GAD-Ab+IA2-Ab联合检测的敏感性和诊断符合率亦均高于ICA和IA2-Ab单项检测(P<0.05)。结论 GAD-Ab、IA2-Ab和ICA联合检测对糖尿病的诊断分型具有一定的意义。

丙型肝炎患者血清自身抗体检测的临床研究

目的:了解丙型肝炎患者血清中自身抗体检测的检出率,探讨自身免疫在丙型肝炎病毒感染中的意义。方法:采用间接免疫荧光法,对125例丙型肝炎病毒感染者血清进行抗核抗体、抗平滑肌抗体、抗线粒体抗体和抗肝肾微粒体抗体检测;应用聚合酶链反应定量检测血清HCV-RNA含量,HCV抗体的检测用ELISA法。结果:丙型肝炎患者自身抗体总阳性率为35.2%;HCV-IgG(+)HCV-RNA(-)的检出率为24.6%;HCV-IgG(+)HCV-RNA(+)的检出率为42.8%,HCV-IgG(+)HCV-RNA(+)和HCV-IgG(+)HCV-RNA(-)组差异比较有显著的统计学意义(P<0.05)。各组与正常对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。自身抗体以低滴度为主,主要为抗核抗体。自身抗体的阳性检出率与患者的性别无关(P>0.05),与年龄有关(P<0.05)。结论:HCV感染能诱导自身免疫反应,使患者出现多种自身抗体,自身抗体的检出率与年龄关系密切且与病毒的复制有关。检测丙型肝炎患者自身抗体对丙型肝炎重叠自身免疫性肝炎患者的诊断和治疗有一定的指导意义。

白细胞介素33及其受体在系统性红斑狼疮患者表达研究

目的明确白细胞介素33(IL-33)及IL-33受体(IL-33R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病过程中的作用。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测系统性红斑狼疮(SLE)患者和性别年龄匹配组对照人群血清IL-33表达水平,应用流式细胞方法检测外周血白细胞表面IL-33受体(IL-33R)表达水平。共检测140例SLE患者和140例正常对照者。参照美国风湿病学会1997年修订的标准判定SLE。结果 SLE患者血清IL-33表达水平明显高与正常对照者,显示出明显的相关性。各细胞亚群表面的IL-33R(ST2)表达水平在SLE和正常对照组中相似,在CD4+、CD14+和CD19+等细胞亚群内IL-33R表达没有显著差异,但SLE患者CD8+细胞亚群内IL-33R表达明显高于对照组。结论IL-33在系统性红斑狼疮发病过程中可能具有重要的作用。

肿瘤放射增敏剂及增敏机制研究进展

放射增敏剂是指能增强射线对肿瘤内乏氧细胞的杀灭作用而对有氧的正常组织一般损伤较小的一些化学物质。本文主要介绍了放射增敏剂的研究进展。从影响肿瘤放射敏感性因素入手 ,详细叙述了放射增敏剂的种类、主要作用机制和发展趋势。

系统性红斑狼疮自身抗体的检测

目的 对系统性红斑狼疮和正常人进行抗核抗体 (ANA)、抗双链DNA(ds -DNA)和抗ENA抗体的测定。方法 采用间接免疫荧光法检测ANA ;采用胶体金技术检测抗ds -DNA ;采用免疫印迹技术检测抗ENA抗体。结果 ANA阳性率最高 (96 % ) ;抗ds -DNA阳性率较低 (5 4% )。SLE患者血清中存在多种自身抗体。结论 SLE患者自身抗体的测定对自身免疫性疾病的诊断和分型具有重要意义。

抗环瓜氨酸多肽抗体和类风湿因子在类风湿性关节炎诊断中的比较

目的:检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体在类风湿性关节炎(RA)中的阳性率,探讨抗CCP抗体检测在RA中的意义。方法:用ELISA方法检测30例RA,35例其他风湿性疾病,20例非风湿性疾病中的抗CCP抗体的分布。用免疫比浊法测定类风湿因子(RF),比较抗CCP抗体与RF的相关性。结果:30例RA病人中,抗CCP抗体的阳性率为73.33%。抗CCP抗体对RA的敏感性和特异性分别为73.33%和94.54%。RF的阳性率为76.67%。RF抗体对RA的敏感性和特异性分别为76.67%和80.0%。抗CCP抗体与RF之间呈正相关性。结论:抗CCP抗体对RA具有良好的敏感性和特异性,可视为RA新的血清学诊断指标,能用于RA的诊断。同时联合检测抗CCP抗体和RF有助于提高RA检测的敏感性和特异性。

神经营养因子和许旺细胞在脊髓损伤修复中的作用

目的:观察局部注射给予神经营养因子和许旺细胞,对大鼠脊髓损伤的修复作用。方法:实验于2004-07/12在深圳第二人民医院完成。68只大鼠被分为正常对照组4只、空白对照组16只、神经营养因子组16只、许旺细胞组16只和神经营养因子复合许旺细胞组16只。空白对照组、神经营养因子组、许旺细胞组和神经营养因子复合许旺细胞组大鼠脊髓半横断手术后损伤部位分别给予生理盐水、神经生长因子和大鼠原代培养的许旺细胞,28d后考察大鼠运动能力和脊髓损伤节段背根节中神经元降钙素基因相关肽表达水平。结果:68只大鼠均进入结果分析。①大鼠协调运动行为评价结果:脊髓半横断后损伤大鼠后肢运动明显受损,驻杆时间减少超过30%,单独的神经营养因子和单独许旺细胞处理能够在一定程度上恢复大鼠后肢协调运动能力,分别为对照的36%和65%,神经营养因子和许旺细胞协同作用效果理想,可达到正常对照的93%以上。②背根节中神经元降钙素基因相关肽表达水平检测结果:许旺细胞组和神经营养因子复合许旺细胞组阳性神经元数量和平均吸光度明显多于神经营养因子组[阳性神经元数量:(22.7±1.9),(31.3±5.3),(12.9±3.0)个/视野;平均吸光度:0.035±0.021,0.075±0.033,0.023±0.011,P均<0.01]。结论:外源性给予神经营养因子的同时给予许旺细胞,能够更加优化神经修复微环境,有利于神经损伤后修复。

SARS冠状病毒S蛋白部分序列的克隆与表达

〔目的〕表达SARS冠状病毒S蛋白部分序列S1。〔方法〕采用逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)技术从SARS冠状病毒RNA中扩增出编码S1蛋白的基因片段 ,鉴定后将目的片段与原核表达载体pQE3 0连接 ,构建重组表达质粒pQE3 0 -S1,IPTG诱导该重组质粒转化的大肠杆菌产生S1重组蛋白。〔结果〕(1)RT -PCR扩增获得长约 115 0bp的S1基因片段。 (2 )SDS -PAGE证明 ,S1重组蛋白的分子量约为 40kDa。 (3 )表达的蛋白能与SARS病人血清反应。〔结论〕成功构建了SARS冠状病毒S1蛋白的重组表达质粒 。

自组织神经网络算法在低氧大鼠脑细胞凋亡相关基因表达谱分析中的应用

运用自组织神经网络算法分析复方党参对模拟高原低氧条件下大鼠脑神经细胞凋亡基因表达谱的作用 ,从中药与生物体基因网络相互作用的角度 ,探讨了复方党参的作用机制。将 Wistar大鼠置于模拟海拔 70 0 0 m的低压氧舱建立高原低氧大鼠脑细胞凋亡模型 ,于上舱前 7d开始灌复方党参液。提取空白对照组、低氧 8d对照组、常氧复方党参组及低氧 8d复方党参组大鼠脑组织总RNA,经逆转录合成 c DNA探针 ,用 [α-32 P]标记探针 ,各自与 Atlas c DNA Array膜杂交 ,经严格的冲洗后用磷屏检测 c DNA表达水平。获得的基因表达谱数据集采用自组织神经网络算法 (SOMs)分析。结果显示 ,低氧可以启动细胞凋亡的线粒体途径 ,导致细胞死亡 ;而复方党参以凋亡相关基因网络中的多种成分为靶点 ,从不同层次上发挥抑制细胞凋亡的作用。

尿白蛋白、β_2微球蛋白及T-H蛋白联合检测对早期糖尿病肾病的诊断意义

目的探讨糖尿病患者尿白蛋白(Alb)、β2微球蛋白(β2-M)及Tamm-Horsfall蛋白(T-H蛋白)的变化对糖尿病早期的诊断价值。方法 采用放射免疫法检测了52例糖尿病病人和50名正常人尿Alb、β2-M及T-H蛋白含量。结果糖尿病患者尿Alb、β2-M高于正常人(P<0.05),T-H蛋白低于正常人(P<0.05)。随病变进展尿蛋白的异常改变更趋显著。结论检测糖尿病病人尿Alb、β2-M及T-H蛋白有助于早期诊断肾脏病变的部位及病变程度。

乙型肝炎病毒感染者血清抗核抗体检测分析及临床意义

目的检测乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清中抗核抗体(ANA)的阳性率并探讨其临床意义。方法采用间接免疫荧光法(IIF)检测120例HBV感染者、82名正常对照者的ANA。结果 120例HBV感染者中ANA阳性率为30.0%,明显高于正常对照组(4.2%);HBV感染组的ANA以低滴度(1∶100)为主,占58.3%;ANA荧光模式以颗粒型(41.7%)最为常见。结论 HBV感染可诱导以低滴度为主的ANA,其在诊断、鉴别诊断及治疗中有一定的意义,发病机制可能与自身免疫有关。

钙离子浓度在大鼠海马神经元缺糖损伤过程中的作用研究

目的分析钙离子浓度在大鼠海马神经元缺糖损伤过程中的变化规律,观察三七总皂苷对培养大鼠海马神经元缺糖损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法新生当天大鼠取海马组织,分散原代培养,经免疫细胞化学鉴定后复制无糖损伤模型,观察无糖培养条件对神经元存活、凋亡和乳酸脱氢酶释放的影响,通过检测细胞内游离钙离子浓度,分析钙离子浓度在大鼠海马神经元缺糖损伤过程中变化规律。同时预先在培养液中添加不同浓度的三七总皂苷,在不洗脱三七总皂苷的条件下再行无糖损伤,评价三七总皂苷对无糖损伤的影响,并初步探讨三七总皂苷作用的机制。结果无糖培养明显影响神经元的存活,导致以细胞凋亡途径介导的细胞死亡增加,细胞乳酸脱氢酶释放增加,细胞内游离钙离子的浓度明显增加;而三七总皂苷明显抑制无糖条件引起的细胞死亡和凋亡,减少乳酸脱氢酶释放,并一定程度地降低了细胞内游离钙离子的浓度。结论细胞内游离钙离子浓度与神经元缺糖损伤密切相关,三七总皂苷显著抑制无糖培养条件导致的神经元死亡,其机制可能与抑制细胞内游离钙离子浓度的增加有关。

免疫印迹法和磁微粒化学发光法检测SLE自身抗体的比对分析

目的：比较免疫印迹法（Western blot）和磁微粒化学发光法（Magnetic particle Chemiluminescence method）检测系统性红斑狼疮（SLE）自身抗体的一致性。方法：用免疫印迹法和磁微粒化学发光法对123份血清进行检测，其中系统性红斑狼疮阳性患者63例，健康体检者60例，用卡方检验对两种方法结果进行比较分析。结果：免疫印迹法和磁微粒化学发光法中抗Sm抗体阳性率分别为27.0%和14.3%、抗RNP/Sm阳性率分别为54.0%和42.9%、dsDNA阳性率分别为41.3%和30.2%、抗核小体抗体阳性率分别为31.7%和20.6%、抗核糖体P蛋白抗体阳性率分别为28.6%和11.1%。两种方法的准确性无显著性差异（＞0.05）总符合率为80.6%，Kappa值为0.669。结论：免疫印迹法和磁微粒化学发光法检测系统性红斑狼疮自身抗体的检测结果具有可靠性，较好的符合率和准确性，磁微粒化学发光法可以作为简便、快速、经济的检测方法应用于系统性红斑狼疮自身抗体的检测。

血清Hcy与多项肝酶学指标在肝病中的临床应用价值

目的:了解同型半胱氨酸(Hcy)与α-岩藻糖苷酶(AFU)、天冬氨酸氨基转移同工酶(ASTm)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)、腺苷脱氨酶(ADA)、血清天冬氨酸转氨基酶(AST)、丙氨酸转氨基酶(ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)和5’-核苷酸酶(5’-NT)等肝酶学指标在肝病诊断中的价值。方法:分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和全自动生化分析仪对Hcy及上述肝酶学指标在356例各种肝病患者和115例正常人血清中的变化进行检测和分析。结果:急性病毒性肝炎时Hcy、AFU、ASTm、GLDH、ADA、AST、ALT、GGT和5’-NT均显著增高,ALT、AFU、ASTm和AST的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.875、0.853、0.830和0.825,阳性率分别为100%、78.9%、87.8%和97.8%;肝炎肝硬化时Hcy、ASTm、GLDH、ADA、AST、GGT和5’-NT均显著升高,胆碱酯酶(CHE)显著降低,ADA、AST、5’-NT、GGT和CHE的AUC分别为0.764、0.761、0.752、0.748和0.721,阳性率分别为90.1%、73.2%、67.6%、76.1%和62.0%;重型病毒性肝炎时Hcy、AFU、ASTm、GLDH、ADA、AST、ALT、GGT和5’-NT均显著增高,CHE显著降低,AST、ALT、ASTm、CHE、AFU、GLDH和Hcy的AUC分别为0.876、0.840、0.792、0.792、0.751、0.729和0.725,阳性率分别为100%、100%、93.6%、100%、72.3%、91.5%和100%;原发性肝癌时Hcy、AFU、ASTm、GLDH、ADA、AST、GGT和5’-NT均显著升高,CHE显著降低,AFU、5’-NT和GGT的AUC分别为0.822、0.814和0.811,阳性率分别为90.9%、86.4%和97.7%。肝病患者血清Hcy与CHE活性呈显著负相关(r=-0.36,P<0.01)。结论:对急性病毒性肝炎诊断意义较大的指标为ALT、AFU、ASTm和AST;对肝炎后肝硬化诊断意义较大的指标为ADA、AST、5’-NT、GGT和CHE;对重型病毒性肝炎诊断意义较大的指标为AST、ALT、ASTm、CHE、AFU、GLDH和Hcy;对原发性肝癌诊断意义较大的指标为AFU、5’-NT和GGT;所有指标对慢性病毒性肝炎和酒精型肝炎的临床意义都较低。Hcy和CHE的联检或可更有助于全面准确地评估肝病患者肝损害的程度。

多粒度光网络故障定位

多种粒度光通道的存在,给多粒度光交换系统中的故障定位带了新的问题。文章在分析多粒度光通道故障定位的特点的基础上,提出判断多粒度系统中故障位置和粒度的原则,并基于此原则设计了故障定位的信息处理流程。

肺癌患者血清中炎症因子的水平研究

目的:检测临床收集得到的肺癌确证患者血清中TNF-α,IL-1α,IL-1β,IL-6,GM-CSF和IL-10水平,比较其与肺良性病变患者和健康志愿者血清中诸因子水平的差异,为肺癌的血清学检查和治疗预测提供参考。方法:酶联免疫试剂盒方法(ELISA)平行检测临床收集的确诊肺癌患者血清66例,确诊的肺良性病变患者血清样品22例和健康志愿者血清样品28例,比较分析TNF-α,IL-1α,IL-1β,IL-6,GM-CSF和IL-10水平在三组患者血清之间的差异,同时对有差异的炎症因子,进一步按照肺癌患者的性别、癌症类型、分化程度、有无转移以及临床分期分别分析,比较不同病理状态下炎症因子的水平差异。结果:肺癌患者血清中TNF-α和IL-6水平明显高于肺良性病变患者和健康志愿者,而IL-10水平显著低于后两者。肺癌患者血清中IL-1α和GM-CSF水平没有显著差别,IL-1β水平尽管高于健康志愿者,但与肺良性病变患者没有显著差别。肺癌患者血清中TNF-α、IL-6和IL-10水平与性别和癌症类型没有明显的相关关系,而与分化程度和转移与否有关,高分化程度患者和有淋巴转移患者血清的TNF-α、IL-6水平分别高于低分化程度患者和未转移患者,而IL-10水平与TNF-α、IL-6水平变化趋势相反。结论:肺癌患者血清中TNF-α、IL-6水平升高、IL-10水平下降可能作为肺癌的特征性指标,而且与肿瘤的分化程度和转移密切相关。