人类资源库生物安全概要及自检表单

根据经济合作与发展组织(OECD)的定义,“生物样本库是一种集中保存各种人类生物材料,用于疾病的临床治疗和生命科学研究的生物应用系统”^([1])。

支撑高质量转化研究的临床研究全流程样本管理体系的建立

临床研究与基础研究中人员结构和工作重点各有不同,如何利用生物样本库加强两者之间的沟通、提高转化研究水平,是目前亟待解决的问题。1临床研究日益受到重视1.1临床研究的类型简介临床研究是以患者为主要研究对象,以疾病的诊断、治疗、预后、病因和预防为主要研究内容,以医疗机构为主要研究场所的医学科研活动的总称,其目的在于解决临床问题、服务于临床实际工作[1]。

利用人胚胎干细胞和人羊水干细胞的神经分化模型建立体外神经毒性测试的实验研究(英文)

目的许多药物具有神经毒性,尤其是对于儿童的影响更大。目前常用的药物体内毒性实验既耗时又昂贵。人胚胎干细胞和人羊水干细胞的神经分化有望建立一种理想的用于评价药物神经毒性的体外评估系统。此项研究旨在利用红藻氨酸的神经毒性验证此系统的可行性。方法单层贴壁状态下,人胚胎干细胞和人羊水干细胞在化学成分明确的诱导条件下向神经细胞诱导。这些细胞经神经细胞特异性的抗体染色证实其特性。诱导得到的神经细胞在不同浓度红藻氨酸的培养液中进行培养和扩增,每代细胞进行计数,绘制细胞的生长曲线。结果人胚胎干细胞和人羊水干细胞均可被高效地诱导为神经细胞;人胚胎干细胞的神经诱导效率高于人羊水干细胞;红藻氨酸对诱导得到的神经细胞具有毒性,其浓度与毒性呈正相关。结论人胚胎干细胞和人羊水干细胞的体外神经分化可作为用于评价药物神经毒性的体外评估系统。

儿童专科医院特色生物样本库的建立与应用

生物样本库是一种集中收集、处理、存储和应用各种生物材料及其相关信息用于疾病的临床诊疗研究的生物应用系统（[1]）。一般由两部分组成：一是样本实体库,即可以从中提取到DNA、RNA、蛋白质等成分的组织或血液等生物样本;二是样本信息库,包括从生物样本中提取DNA、RNA、蛋白质等成分所得到的个人独有的遗传信息数据及临床诊疗信息（[2]）。

脊髓A1型星形胶质细胞在外周炎性痛中的动态变化

目的研究外周炎性痛小鼠痛行为以及脊髓A1型星形胶质细胞的动态变化,为阐明炎性痛的病理机制提供实验基础及理论依据。方法雄性C57BL/6小鼠16只,分为对照组8只和炎性痛组8只。小鼠右侧足底注射完全弗氏佐剂(CFA)建立外周炎性痛模型,对照组右侧足底注射相同体积生理盐水。在造模前以及造模后第1、3、5、7天检测小鼠机械刺激缩足阈值(MWT)和辐射热刺激缩爪潜伏期(PWL)的变化。以逆转录聚合酶链反应检测A1、A2型星形胶质细胞标志物在炎性痛不同时程脊髓内的动态表达变化。用免疫荧光法检测小鼠脊髓背角GFAP形态以明确星形胶质细胞激活,同时统计脊髓背角A1型星形胶质细胞标志物C3与GFAP共定位水平。结果炎性痛小鼠造模后患侧MWT、PWL均明显下降,小鼠出现机械性痛觉超敏与热痛觉过敏;且在造模后第3天,脊髓背角GFAP表达开始升高,表达量为1.84±0.10 vs 1.08±0.22(P<0.05);炎性痛第7天,A1型星形胶质细胞标志物Serping1、H2-T23的mRNA水平均显著升高(P<0.05),A2型星形胶质细胞标志物S100a10、Ptx3的mRNA水平降低(P<0.05);炎性痛组小鼠脊髓背角星形胶质细胞内C3的表达增加(P<0.05)。结论炎性痛小鼠脊髓反应性星形胶质细胞向A1型极化增加,提示A1型星形胶质细胞可能参与了炎性痛的发生发展。

人类高低位隐睾睾丸引带内肌肉组分的探究

目的探讨人类高位和低位隐睾患儿睾丸引带内肌肉组分与睾丸位置的关系。方法收集隐睾患儿术中废弃的睾丸引带,以麻醉下未降睾丸的位置位于内环口以上的腹腔型隐睾为高位组( n =11),已出内环口但未出外环口的腹股沟管型为低位组( n =62),分别进行组织切片染色观察其组织构成。结果11例高位组患儿均未观察到引带内肌肉或肌肉样结构;62例低位组患儿中43例可观察到横纹肌结构,且排列较分散。人类高位隐睾引带组织HE染色主要表现为较致密的结缔组织,含较多成纤维细胞、少量小血管,未见横纹肌组织结构;低位隐睾引带HE染色,则表现为混合性组织,可见较疏松排列的成纤维细胞、少量血管和较多纤维,可观察到横纹肌。高位引带Masson染色可见其组织中结构较致密,含有大量胶原纤维成分和少量小血管;低位引带Masson染色可见疏松的胶原纤维成分、小血管、横纹肌结构。横纹肌特异性免疫荧光MY-32染色在高位组未观察到阳性信号,低位组中可见明显横纹肌结构。结论人类隐睾睾丸引带在高位与低位时其组织肌肉成分存在差异,高位隐睾睾丸引带未见肌肉成分,低位隐睾睾丸引带中存在横纹肌。

碱性成纤维细胞生长因子和Noggin诱导人羊水来源干细胞向神经细胞分化的差异比较

背景:相对于成体干细胞和胚胎干细胞自身存在的问题,羊水来源的干细胞系的建立,能为每一个个体建立一份自身的、具有高度增殖分化能力的干细胞储备,有望成为神经性退行性疾病细胞治疗的理想细胞来源。目的:观察Noggin和碱性成纤维细胞生长因子对人羊水来源干细胞向神经细胞分化的影响。方法:羊水标本来自怀孕16～22周行产前诊断的孕妇,在超声引导下行羊膜腔穿刺取得。利用CD117抗体,选用免疫磁珠法从人孕中期羊水标本中分离获得羊水干细胞,培养扩增后,通过流式细胞仪检测表面抗原表达进行鉴定。选取生长状态良好的第3代羊水干细胞,利用无血清的神经诱导培养液诱导其向神经细胞分化,分为空白对照组、基础诱导液组、Noggin诱导组和碱性成纤维细胞生长因子诱导组。倒置相差显微镜观察诱导后细胞形态的变化,细胞免疫荧光检测巢蛋白、β-Ⅲtubulin和神经丝蛋白在诱导后细胞中的表达。结果与结论:利用免疫磁珠方法分离出的羊水干细胞呈CD44和HLA-ABC表达阳性,CD45和HLA-DR表达阴性。诱导2周后,碱性成纤维细胞生长因子诱导组光镜下细胞形态发生显著变化,免疫荧光染色巢蛋白、β-Ⅲtubulin和神经丝蛋白表达阳性率较高。Noggin诱导组细胞形态和染色结果与基础诱导液组无显著性差异。提示利用羊水来源的干细胞诱导分化为神经细胞的过程中碱性成纤维细胞生长因子的作用远优于Noggin。

人诱导多能干细胞向视网膜色素上皮细胞分化及其应用于临床治疗的研究进展

视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞是位于视网膜最外层的单层细胞,呈六角形,胞内富含黑色素。其功能主要包括：（1）吞噬感光细胞外节段;（2）代谢视紫红质;（3）参与构成血-视网膜屏障;（4）合成黑色素等。RPE细胞的功能丧失会引起多种视网膜疾病,如年龄相关黄斑变性、Stargardt病等[1]。RPE细胞已经到达终末分化阶段,损伤后无法再生,

cGAS-cGAMP-STING信号通路在神经系统疾病中的研究进展

胞质病原体 DNA 或是线粒体 DNA 均可作为免疫原分子激活细胞的固有免疫反应。位于细胞内的模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR),如 ZBP1(Z-DNA-binding protein 1)和 AIM2(absent in melanoma 2)等可识别哺乳动物细胞内的胞质 DNA[1]。

己烯雌酚对人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞的影响

目的研究外源性雌激素己烯雌酚(DES)在体外对高位和低位隐睾患儿睾丸引带细胞的影响。方法以麻醉下未降睾丸的位置位于内环口以上的腹腔型隐睾为高位组,已出内环口但未出外环口的腹股沟管型隐睾为低位组,分别收集高、低位隐睾患儿术中的废弃引带,经IV型胶原酶消化后原代培养、比较其形态和细胞骨架的差别;将两组细胞分别培养于溶剂对照组(DMSO)和DES浓度梯度为0.01、0.1、1及10μg/ml的培养基内24 h。以鬼笔环肽标记法示DES作用前后细胞的形态学改变;CCK-8法检测其增殖能力的变化;荧光定量PCR法检测RXFP2基因相对表达量的差异。结果人类高位和低位隐睾睾丸引带细胞大部分为成纤维细胞样,其中低位组的细胞可自发融合成多核肌管样细胞。高浓度DES(10μg/ml)可抑制人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞的增殖、改变细胞的光镜特征和微丝骨架,但是其对两组细胞的影响没有统计学差异。高浓度DES上调两组细胞RXFP2的表达水平。结论人类高、低位隐睾的睾丸引带细胞具有不同的形态特征;高浓度外源性雌激素可改变高位和低位隐睾的睾丸引带细胞骨架、抑制细胞的增殖活力并上调人类引带RXFP2基因的表达。

化学实验的改进

化学是一门以实验为基础的科学。化学实验形象、直观、有趣,有利于激发学生的学习兴趣。然而,现行的中学课本中的某些实验,由于装置材料的搭配欠佳等原因而导致实验现象不明显或成功率不高，影响了实验的效果，对课堂教学起副作用。因此，实验的不断改进是认识深化的必然，也是表现教学创造能力的过程。

浅谈化学语言的规范化

高中化学教学中注意化学语言的规范化。教师在教学中不但要严格要求学生,而求要严格要求自己。同时在课堂上多给学生"说、练、写"的机会,使学生养成规范化习惯。确保考试时没有非智力因素的失分。

我国会计准则建设与国际协调问题研究

会计在实务方面的巨大差异和在会计理念上的本质差异给各国报表编制、合并报表、审计以及分析解释对外公布的财务报表带来巨大的障碍。缩小和消灭各国会计差异已成为国际会计界的共识和奋斗目标。联合国、欧盟、国际会计准则委员会等多个组织为会计的国际协调或使之标准化一直进行着不懈的努力。如何跨越各国会计间的巨大差异,制定出一套世界各国都可接受、严格而权威的国际会计准则仍然任重道远。

儿童专科医院样本库的生物样本特征分析及策略建议

生物样本库为转化研究提供重要的研究资源[1],其通过与疾病特征和研究目的相关联的顶层设计、系统规范地收集健康个体来源的和疾病个体来源的血液、组织、各种体液等样本,经过与样本特性相适宜的处理后再将样本冷冻保存[2]。

羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞向血管内皮细胞的体外诱导分化

背景:已证实将血管内皮细胞与具有良好组织相容性的生物材料复合,并移入体内后可增殖分化形成血管。但由于获取内皮细胞时创伤较大,所以细胞来源是一个急需解决的问题。目的:探讨羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞分化为内皮细胞的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/2009-03在上海交通大学医学院附属新华医院科研中心完成。材料:羊水标本来自孕16～22周行产前诊断的孕妇,在超声引导下行羊膜腔穿刺取得60mL羊水。方法:采用免疫磁珠细胞分选法去除人羊水细胞中CD44和SSEA-4阳性细胞,使OCT-4阳性胎儿间充质干细胞间接得到分离,并在体外进行培养扩增。取第3代羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞,诱导组换用含体积分数为15%胎牛血清的内皮细胞生长培养液,对照组持续用原培养液培养细胞。主要观察指标:倒置相差显微镜观察诱导过程中细胞形态变化,采用间接细胞免疫荧光法、内皮细胞吞噬DiI-acLDL法检测诱导效果。结果:诱导30d后,镜下观察细胞集落相互连接,呈典型的"鹅卵石"样外观,经诱导的羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞可在体外保持良好的增殖活力。诱导后的贴壁细胞eNOS和vWF呈阳性表达,细胞胞浆内可见发出红色荧光的DiI阳性细胞;对照组细胞免疫荧光染色eNOS和vWF均呈阴性,且无红色荧光细胞出现。结论:羊水来源的OCT-4阳性的胎儿间充质干细胞在适当的体外微环境下,可诱导分化为血管内皮细胞。

金融衍生工具风险管理

金融工具的衍生和发展为整个资本的配置市场注入了活力,但金融衍生工具自身的高风险及市场、信用、流动、操纵、法律等风险,对国际金融体系的安全和稳定产生严重的冲击,扩大了经济的虚拟化和泡沫程度,影响了中央银行宏观货币政策的有效实施。有效进行金融衍生工具的风险管理,建立完善的业务操作规程及信息报露制度,可将衍生产品业务的风险控制在合理的限度内。

egr-1在学习记忆中的作用及机制研究进展

学习和记忆是大脑对外界有关信息获取、处理、存储和提取的过程,其所依赖的生物学基础是神经元之间通过突触相互连接形成复杂的神经网络,启动一系列生化级联反应,导致突触可塑性变化,如长时程增强（long term potential,LTP）和长时程抑制（long term depression,LTD）,其中,LTP与学习记忆的关系尤为密切。

静滴低分子右旋糖酐对肾病综合征蛋白尿的影响

本文旨在对低分子右旋糖酐(低右)对肾病综合征患儿蛋白尿一过性影响的机理进行初步探讨,并提出建立药物性静电屏障来治疗肾病综合征的初步设想,现报道如下。

适应职工培训需求 提高《钳工工艺》课教学质量

需求广义上讲是人在社会群体生活中某种需要的具体体现。在职员工的需求转化为为了提升自身价值而想掌握更多的职业技能。《钳工工艺》是一门专业课,在职工培训教学实践和到基层调研使我深刻认识到,要提高该课教学效果并取得预期的教学目的,必须要针对职工的需求制定教学内容。本文通过职员工不同形式的培训需求说明了改进《钳工工艺》课教学内容的重要性及可行性,使职工培训具有针对性,更适合职工的需要。

试论工商部门变更登记中止程序的必要性和可行性

一、问题的提出：一则案例引发的思考 甲公司营业执照登记的股东乙公司和甲公司法定代表人孙某都主张自己是甲公司唯一的股东。登记股东乙公司授权张某试图办理法定代表人变更登记，但法定代表人孙某却说他才是真实股东，不同意变更，并出具司法裁定作为证据证明登记股东不能代表公司。最后工商部门作出暂缓办理变更登记的决定。