两种新型支架材料的细胞相容性

背景:利用骨组织工程原理,通过观察成骨细胞在生物材料上的形态、测定成骨细胞在生物材料上的黏附率等方法,可评估生物支架材料的生物相容性。目的:通过扫描电子显微镜下细胞-生物材料的观察和细胞-生物材料黏附率的测定,探讨骨组织工程材料的细胞相容性。设计、时间及地点:动物实验,成骨细胞形态学观察,于2007-02/2007-09在华南理工大学材料科学与工程学院生物材料研究所教育部重点实验室完成。材料:健康SD乳鼠30只,2种支架材料分别是:复合海藻酸钠和聚乳酸羟基乙酸的磷酸钙骨水泥以及卵磷脂改性聚乳酸羟基乙酸/生物活性玻璃复合支架。方法:取SD乳鼠颅骨成骨细胞,经体外培养、扩增,与两种新型可降解生物活性支架材料进行复合,通过扫描电镜观察细胞形态并测定细胞在生物材料上的黏附率。主要观察指标:观察接种于生物材料表面上的成骨细胞形态、黏附情况,对生物材料生物相容性进行描述。结果:生物活性材料与细胞复合后,材料出现了矿化,同时在海藻酸钠/聚乳酸羟基乙酸磷酸钙骨水泥通过扫描电镜观察发现其上游生长形态良好的成骨细胞;成骨细胞在生物卵磷脂改性聚乳酸羟基乙酸生物活性玻璃上的黏附率最高达到了95.2%。结论:从细胞形态和细胞黏附率上看,海藻酸钠/聚乳酸羟基乙酸磷酸钙骨水泥和生物卵磷脂改性聚乳酸羟基乙酸生物活性玻璃具有较好的生物相容性。

溶胶-凝胶生物活性玻璃与胶原复合多孔支架的生物相容性研究

实验前期用冷冻干燥法合成一种溶胶?凝胶生物活性玻璃(BG/COL)与粗胶原纤维复合的组织工程支架.本实验将支架与鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)共同培养,评价支架材料的细胞相容性.并将复合了成骨细胞的支架材料植入裸鼠皮下,探讨其异位成骨的性能.研究结果显示rMSCs可以在BG/COL多孔支架材料表面成功粘附、铺展、并向多孔支架内部迁移,随着培养时间的延长,双链DNA(ds DNA)数量增多,细胞增殖情况与对照组差异明显.将种在复合材料上的骨髓间充质干细胞诱导培养14d后切片染色,其碱性磷酸酶(ALP)和钙素表达均呈强阳性.体内植入实验的裸鼠健康状况良好,伤口完全愈合,6w后BG/COL周边及内部有骨组织和血管生成.由此证明,这种新型的复合多孔支架材料具有良好的生物相容性,其复合了成骨细胞的组织工程骨具有良好的诱导成骨的性能,因此这种材料是理想的应用于骨组织修复和再生的组织工程支架材料.

58S生物玻璃/壳聚糖复合多孔支架材料的制备

背景:在前期研究的基础上用壳聚糖溶液与纯的58S生物玻璃支架进行复合,通过体外测试考察其生物活性,以确定是否符合组织工程对支架材料的要求。目的:观察58S生物玻璃/壳聚糖复合多孔支架的生物矿化特性及其与鼠骨髓间充质干细胞之间的体外相容性。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-03/10在华南理工大学材料科学与工程学院生物材料研究所完成。材料:选用58S生物活性玻璃粉体为原料,利用预先处理过的聚氨酯泡沫作为模板,通过浸渍法制备58S生物玻璃支架基体,与壳聚糖复合后制成生物玻璃/壳聚糖复合支架。方法:①将试样放置于37℃恒温静态的100mL模拟生理溶液中,分别浸泡1,3,7,15d后取出样品,测试备用。②将第6代的小鼠骨髓间充质干细胞悬液以2×105/每个材料的密度接种到12孔培养板中的支架材料上复合培养。主要观察指标:采用X射线衍射分析和红外光谱分析方法对支架矿化不同时间表面生成的矿物进行分析和表征;利用扫描电子显微镜观察支架表面矿物生成情况和小鼠骨髓间充质干细胞在多孔支架材料上的生长情况。结果:①X射线衍射分析结果显示支架在模拟生理溶液中矿化7d后即出现标志羟基磷灰石形成的弱衍射峰,矿化15d后这些衍射峰变得更强,说明材料表面形成了低结晶度的羟基磷灰石。②红外光谱分析测试结果显示支架在矿化7d后即出现了标志羟基磷灰石形成的特征峰。③扫描电镜观察支架表面在矿化1d后有颗粒状的矿物生成,矿化15d后所形成的矿物成绒毛状,几乎覆盖整个支架表面。④小鼠骨髓间充质干细胞在支架材料上培养5d后黏附生长良好,进一步表明此支架材料具有较高的生物矿化特性和细胞相容性。结论:制备的58S/壳聚糖复合生物玻璃多孔支架具有较高的生物活性、与鼠骨髓间充质干细胞相容性良好。

论我国民事诉讼中合意的理论基础

从我国的立法和司法实践看,合意已跨过私法的界限成为我国民事诉讼中一项重要的制度。笔者以为,合意在我国民事诉讼中的兴起直接导源于当事人主体性原则和新程序正义理论的推动作用,文章重点分析了两种理论中所蕴含诉讼合意的契机。

浅谈幼儿园教学中融合教育的实施对策

众所周知,融合的教育理念为有特殊需要的儿童提供了一种全新的视角,提出融合的教育理念能更好地服务于有特殊需要的儿童。同时,大家也发现了融合教育在对特殊儿童的学前教育方面有着独特的作用。本文将探究幼儿园教学中融合教育的实施的重要意义,以及面临的压力与发展途径,期望能够帮助一线教师更有效地进行学前特殊教育的进一步提升与发展。

可抑制I型胶原表达的siRNA重组腺病毒的构建

滑膜间质干细胞(SMSCs)与其他来源的间质干细胞相比,具有更强的生长能力和更大的软骨分化潜力.但由于SMSCs固有地表达I型胶原,这将会大大损害再生软骨的整体质量.为解决此问题,文中首先设计了可抑制I型胶原表达的shRNA,并将其构建到腺病毒载体上.接着通过Pac I酶切反应,使重组腺病毒载体线性化并通过脂质体转染293细胞进行病毒包装.收集的病毒初液进行滴度测定后,再次通过293细胞进行病毒扩增,经过纯化后,最终获得高滴度重组腺病毒.将重组腺病毒分别感染成纤维细胞和成骨细胞,通过荧光显微镜观察,检测转染效率,利用实时定量PCR实验验证siRNA的干扰效果.实验结果表明,包装后的重组腺病毒具有高的转染效率,能成功编译siRNA,并具有抑制I型胶原表达的能力.

两种软骨组织工程新型复合支架材料初步研究

目的利用聚谷氨酸苄酯-co-聚谷氨酸（PBLG-co-PGA）改性2种常规的生物可降解材料（胶原与壳聚糖），比较其性能及生物相容性，探索其用于软骨组织工程的可行性。方法用PBLG-co-PGA改性胶原和壳聚糖，对改性前后的材料进行接触角、体外降解性能、拉伸强度、细胞黏附率及细胞相容性等性能的检测和比较。结果随PBLG-co-PGA含量的增加，PBLG-co-PGM／胶原、PBLG-co-PGA，毒聚糖复合材料的降解速度减慢，接触角逐渐减小，PBLG-co-PGA，胶原复合材料的拉伸强度增加。选用PBLG-co-PGA质量分数为30％的复合材料，以兔软骨细胞进行细胞黏附率和细胞相容性实验，与无PBLG-co-PGA的单纯胶原或单纯壳聚糖材料比较，细胞黏附率差异无统计学意义（P0．05）；但兔软骨细胞在PBLG-co-PGA／言聚糖复合材料上生长增殖优于其他3种材料（P〈0．05）。结论经PBLG-co-PGA改性后的壳聚糖和胶原材料，可以调节材料的降解速度，改善壳聚糖亲水性，增加胶原拉伸强度，并且有良好的细胞相容性。其中PBLG-co-PGA，瘩聚糖复合材料具有更好的促细胞增殖特性，可以作为一种新的组织工程软骨支架材料。