东亚马氏钳蝎部分纯化的神经毒素对GH＿3细胞钠电流的影响

马氏钳蝎粗毒经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析分离后可得到几个组分。其中峰Ⅱ毒素对蜚蠊毒性较大，而峰Ⅲ毒素对小白鼠毒性较大，可以认为它们是部分纯化的昆虫类毒素和哺乳类毒素。用膜片箝全细胞记录方式研究了峰Ⅱ、峰Ⅲ毒素对大鼠垂体前叶克隆化细胞ＧＨ＿３细胞钠电流的影响，结果表明峰Ⅲ毒素使钠电流失活变慢，是典型的α型哺乳类毒素；而峰Ⅱ毒素使电压依赖性钠激活曲线显著地向负的方向移动。这种部分纯化的昆虫类毒素对一种哺乳动物细胞钠电流的影响表现出典型的β型哺乳类毒素的性质。

蜚蠊尾须单个细毛型感受器对机械刺激的反应

用钨丝微电极插入蜚蠊尾须细毛感受器的园盘作胞外记录.研究了感受器自发脉冲的统计特性.利用电磁驱动装置控制毛杆的偏转,研究了感受器电位和脉冲对正弦波、方波和阶梯波机械刺激的反应特性,并测定了六列细毛的兴奋方向.

甲状腺素诱导的豚鼠肥厚心肌中延迟整流钾电流离子通道特征

目的在甲状腺素诱导的豚鼠心肌肥厚模型上，研究肥厚心肌细胞延迟整流钾电流（ＩＫ）中快激活成份（Ｉｋｒ）及慢激活成份（Ｉｋｓ）离子通道特征。方法采用全细胞膜片钳技术。结果在甲状腺素诱导的肥厚心肌细胞中，Ｉｋｒ及Ｉｋｓ的电流幅度随去极化电压的增加较正常心肌细胞明显增大，且Ｉｋｒ ｔａｉｌ及Ｉｋｓ的增加程度分别大于Ｉｋｒ及Ｉｋｓｔａｉｌ°心肌肥厚使Ｉｋｓ激活曲线向负的电压方向偏移，对Ｉｋｒ激活曲线无明显影响。结论甲状腺素诱导的肥厚心肌使Ｉｋｒ及Ｉｋｓ明显增加。

棉铃虫对菊酯类杀虫剂抗药性的神经电生理研究

本文用神经电生理方法研究了氰戊菊酯、氯菊酯对棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hubner）相对敏感（HD－S）种群和抗性（HJ－R）种群的神经毒理作用。10－5mol／L的氰戊菊酯、10－5mol／L，的氯菊酯诱发腹神经索自发发放频率的增加和随后的神经传导阻断，10-4mol／L的氯菊酯抑制HD－S种群的神经兴奋，直接阻断神经传导。以兴奋时间、神经传导阻断时间、对药剂作用反应时间的个体分布频率3个参数比较两种群对杀虫剂的反应，均发现HJ－R种群比相对HD-S种群表现了2～3倍的神经不敏感机制，并且发现这种神经不敏感机制对毒理Ⅰ型和Ⅱ型拟除虫菊酯同样有作用。

芍药苷对大鼠心肌细胞L钙通道的阻断作用

目的 在单个大鼠心肌细胞上 ,研究芍药苷对L型钙通道的阻断作用。方法 采用全细胞膜片钳技术。结果 芍药苷浓度依赖性阻断ICa ,L,其IC50 为 387μmol·L- 1 。应用 40 0 μmol·L- 1 芍药苷后 ,ICa,L最大电流幅度下降 51 % ,但I U曲线的形态和反转电位没有变化 ,激活曲线也没有明显的改变 ;失活曲线向较负电压的方向偏移约 8 3mV ,通道从失活中恢复的时间明显延长 ,由给药前的 (96± 1 7)ms增至 (1 85± 2 8)ms ;芍药苷的阻断作用没有显示出频率依赖性。结论 芍药苷对心肌细胞ICa 。

甲状腺素诱导的豚鼠肥厚心肌中快速激活的延迟整流钾电流和内向整流钾电流离子通道特征

在甲状腺素诱导的豚鼠心肌肥厚模型上，采用膜片钳全细胞技术，研究病变心肌细胞APD，Ikr及Ik1离子通道特征，以及药物治疗后其离子通道的改变。结果表明，肥厚心肌细胞APD明显缩短，静息电位及动作电位幅度不变，Ikr及Ik1均显著增加，反转电位不变。经propranolol治疗后，心肌APD，Ikr及Ik1均有明显改善，不影响Ikr的反转电位，但使Ik1反转电位向负的方向偏移。以上结果提示，甲状腺素诱发的心肌肥厚加重心律失常的严重性与增加Ikr及Ik1有关，作用多通道的复合型抗心律失常药有较好的治疗作用。

大鼠海马CA_1区锥体细胞的急性分离和鉴定

目的：建立一种适用膜片钳技术的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞的急性分离方法，并对其进行鉴定。方法：采用酶加机械分离法制备７～１０ｄ鼠龄的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞，用免疫荧光技术鉴定神经元，其电生理学特性测定用全细胞膜片钳技术。结果：分离的锥体细胞是海马ＣＡ１区锥体细胞，且具有正常的电生理学特性，并保存了某些主要的电压依赖性和受体依赖性离子通道特性。结论：成功地建立了一种简单、快速、高产的适用于膜片钳技术的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞的急性分离方法。

氯苄律定对豚鼠心肌细胞钾通道的抑制作用

氯苄律定是四氢小檗碱的衍生物，具有抗心律失常作用，常规电生理发现其延长ＡＰＤ５０及减少心肌钾的丢失，本文研究它对心肌钾通道的影响。采用膜片钳全细胞记录的方法，研究氯苄律定对豚鼠心肌钾离子通道的作用。氯苄律定在３μｍｏｌ／Ｌ，１０μｍｏｌ／Ｌ和３０μｍｏｌ／Ｌ抑制延迟整流钾电流分别为１５．７％±２．４％，３６％±３％，５９％±６％，同样浓度下对内向整流钾通道无明显抑制作用。氯苄律定抗心律失常作用与抑制延迟整流钾通道有关。

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ-(HWTX-Ⅰ)28肽类似物的化学合成与活性鉴定

虎纹捕鸟蛛毒素-(huwentoxin-,HWTX-)是从我国虎纹捕鸟蛛毒素中分离纯化得到的一种多肽类神经毒素.该多肽分子由33个氨基酸残基组成,含三对二硫键.其一级结构和三级结构均已测定.弄清该毒素的活性部位,是研究其结构功能关系的基础.用固相Fmoc化学合成的方法,合成了虎纹捕鸟蛛-的28肽类似物.该突变体去掉了天然毒素分子N端的Alal和C端的Lys30-Trp31-Lys32-Leu33共5个残基.用氧化还原型谷胱甘肽法完成二硫键配对,并用HPLC进行纯化,所得突变体与天然HWTX-的紫外光谱相似.质谱鉴定确认合成产物正确,分子量为3124,浓度为1×10-5g/ml的突变体能可逆阻断小白鼠膈神经-膈肌的接头传递,阻断时间为60～70min.与天然毒素比较,活性有所下降.结果说明HWTX-的N端、C端残基对其生物活性有一定影响,但不是位于活性中心的重要残基.由结果推测。

谷氨酸对大鼠海马CA_1区神经元的短暂性外向K^+电流的影响

为了在离子通道水平探讨谷氨酸对急性分离海马ＣＡ１区神经元的短暂外向Ｋ＋电流的影响。用７～１０ｄ大鼠，以链霉蛋白酶Ｅ酶解加吸管吹打法制备海马ＣＡ１区神经元；利用全细胞膜片箝技术，观察了谷氨酸对海马ＣＡ１区锥体细胞的短暂性Ｋ＋电流的影响。结果观察到谷氨酸对短暂性Ｋ＋电流有明显抑制作用，且呈明显浓度依赖性、时间依赖性和部分电压依赖性。上述结果表明，谷氨酸对Ｋ＋通道的影响在中枢神经系统中具有重要作用。

过氧化氢对蚕豆气孔运动和质膜K^+通道的影响

不同浓度H2 O2 可使蚕豆 (ViciafabaL .)叶片气孔关闭 ,抑制气孔张开 ,10mmol/L的H2 O2 最有效 ,10 μmol/L的H2 O2 仍明显使气孔关闭。且 10 μmol/L的H2 O2 抑制气孔张开作用能被EGTA所消除 ,表明Ca2 +参与低浓度H2 O2 使气孔关闭的过程。 2mmol/L的H2 O2 可使质膜内向K+通道电流明显减小 ,而外向K+通道电流显著增加。因此 ,H2 O2 促进蚕豆气孔关闭主要是通过抑制K+通过保卫细胞质膜内向流入 。

川楝素对粘虫幼虫拒食作用的电生理学研究

1×10^(-4)g/ml川楝素溶液能诱发记录到粘虫(Mythimna separata)幼虫下颚瘤状体栓锥感器的传入发放。其发放频率有一个逐步发展的过程,并可引起几个感受器细胞的爆发性发放。若用1×10^(-4)g/ml川楝素溶液处理栓锥感器,则经过一段时间后,能抑制粘虫幼虫侧栓锥感器对10mmol/L蔗糖和中栓锥感器对50mmol/L肌醇的诱发反应。用二硫苏糖醇及川楝素的混合液处理上述感器,则能解除川楝素的抑制效应。对川楝素作为拒食剂对昆虫化学感受器的可能作用方式作了初步探讨。对其拒食效应与活乐木醛作了比较。

不同光学异构体组成的氯氰菊酯对敏感及抗性家蝇的神经电生理学研究

采用敏感家蝇（ＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｖｉｃｉｎａＬ．）及由５种不同光学异构体组成的氯氰菊酯选育的抗性家蝇中胸足离体标本，观测五种药剂对足感觉神经纤维冲动发放的影响。各种异构体组成的氯氰菊酯均可引起感觉神经纤维发放的增加，然后逐渐降低，直至完全阻断。以阻断时间和加药剂量为参数，求出神经敏感度。结果表明：五种药剂作用于敏感家蝇的神经敏感度与室内生物测定的ＬＤ５０值（μｇ／头）无相关性，而与供试药剂中反α体与顺α体的比例有关，反α体所占比例越多的药物，神经敏感度越高。抗性家蝇的神经敏感度与敏感家蝇相比大幅度下降，可以认为神经敏感度降低是家蝇对氯氟菊酯产生抗性的主要机制。抗性家蝇中，氯氰菊酯品系（ＲＣ１）的抗生水平最高，但它的神经敏感度较其它抗性品系也高，由此推测，ＲＣ１的抗性机制与其它品系有所不同。

大白鼠海马CA_1区锥体细胞的急性分离及其电生理学特性

目的：建立适用于膜片组技术（Patchclamptechnigue，PCT）的大白鼠海马CA_4区锥体细胞（rathippocampalCApyramidalneuron，RHCPN）的急性分离方法，并测定该细胞的电生理学特性。方法：用7～21d大鼠，以链霉蛋白酶E酶解加吸管吹打法制备RHCPN，用全细胞PCT测定其电生理学特性。结果：分离的RHCPN易用于PCT，且具有正常的电生理学特性，并保存了主要的电压依赖性和受体门控性高于通道特性。结论：本法分离的RHCPN适用于PCT电生理学研究。

苄普地尔对豚鼠甲亢性肥厚心肌中延迟整流钾电流的抑制作用

目的 研究苄普地尔 (bepridil)对肥厚心肌细胞延迟整流钾电流 (IK)中快激活成份 (IKr)和慢激活成份(IKs)及内向整流钾电流 (IK1 )的作用。方法 全细胞膜片钳技术。结果 在肥厚心肌细胞中 ,Bepridil 30 μmol·L- 1 对IKr及IKs有阻断作用 ,抑制率分别为 2 0 9% (0mV)和 2 7 2 % (+5 0mV)。“Envelopeoftail”显示bepridil对IKs的阻断作用大于IKr。Bepridil(1- 10 0 μmol·L- 1 )浓度依赖性的阻断IKs及IKr,其IC5 0 分别为 2 3 8μmol·L- 1 和 46 7μmol·L- 1 。Bepridil30 μmol·L- 1 也能阻断IK1 ,抑制率为 15 1% (- 10 0mV) ,但不影响其反转电位。结论 Bepridil对甲亢性豚鼠肥厚心肌中IKs,IKr及IK1

谷氨酸对大鼠海马CA_1区锥体细胞电压依赖性Na^+电流的影响

本实验采用全细胞膜片钳技术，观察了谷氨酸对急性分离的海马ＣＡ_１区神经元的电压依赖性ＮＡ~＋通道的影响， 结果发现谷氨酸对电压依赖性Ｎａ~＋电流有明显抑制作用，其抑制方式呈电压依赖性、浓度依赖性和时间依赖性，表明 谷氨酸对电压依赖性钠通道有抑制作用。

人肝癌细胞膜离子通道特性研究

目的：研究人肝癌细胞系ＢＥＬ７４０２细胞膜离子通道特性。方法：膜片钳技术的全细胞记录方式。结果：人肝癌细胞系ＢＥＬ７４０２细胞获得稳定高阻封接的最佳培养时间是细胞传代培养７２ｈ，细胞的静息膜电位为（－２２．２±－２．８）ｍＶ，几乎每一次记录都发现相似的跨膜电流，该跨膜电流具有电压依赖及不失活特性，翻转电位在－８０～－６０ｍＶ，能被已知的Ｋ＋通道阻断剂阻断。结论：在人肝癌细胞系ＢＥＬ７４０２细胞膜上存在类似于神经元和肌肉细胞的延迟整流性Ｋ＋通道。

马氏钳蝎毒昆虫类神经毒素的分离、纯化及性质研究

经Sephadex G-50,sp-Sephadex C-25二步柱层析法,从山东马氏钳蝎(Bu-thus martensii Karch)粗毒中分离出四种对美洲(虫非)蠊有强直麻痹反应的毒性蛋白组份。其中二个组分在SDS聚丙烯酰胺电泳和等电聚焦电泳上均呈现单一区带,命名为BmK IT-Ⅰ,BmK IT-Ⅱ其pI分别为8.2和8.4,分子量分别为8400和7560。同时还分析了二个组份的氨基酸组成。经DABITC/PITC双偶合法测定了BmKIT-Ⅰ和BmK IT-Ⅱ的N端部份氨基酸排列顺序,它们分别为H_2NVal.Arg.Asp.Ala……H_2NVal.Arg.Asp.Gly……。 电生理学研究表明,纯化的BmK IT-I(1×10^(-5)g/ml)对(虫非)蠊腹Ⅵ神经节的突触传递有阻断作用,阻断后用生理溶液洗,则突触传递可恢复。从同一蝎毒粗毒中分离纯化的哺乳动物类神经毒素BmKⅢ在浓度高出100倍(1×10^(-3)g/ml)时也可以阻断(虫非)蠊腹Ⅵ神经节的突触传递,但用生理溶液冲洗没有观察到恢复。

β-淀粉样肽对海马CA1区神经元的短暂性外向K^+电流的影响

目的：为了在离子通道水平探讨β淀粉样肽（βＡＰ）在Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病中的作用。方法：用７～２１ｄ大鼠，以链霉蛋白酶Ｅ酶解加吸管吹打法制备海马ＣＡ１区神经元；利用全细胞膜片钳技术，观察了βＡＰ２５～３５对急性分离海马ＣＡ１区锥体细胞的短暂性Ｋ＋电流的影响。结果：βＡＰ２５～３５对短暂性Ｋ＋电流有明显抑制作用，且呈明显浓度依赖性、时间依赖性和部分电压依赖性。结论：βＡＰ对Ｋ＋通道的影响在Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的发生机制中具有重要作用。