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响应面法优化重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apcA)的发酵条件
被引量:
4
1
作者
周孙林
陈华新
+2 位作者
姜鹏
李富超
唐东山
《海洋科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期56-63,共8页
采用响应面法对重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apc A)的发酵条件进行优化,提高了蛋白的表达量。以对重组别藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中表达量影响较大的几种因素用于中心组合设计;中心组合设计试验结果表明诱导温度、培养基初...
采用响应面法对重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apc A)的发酵条件进行优化,提高了蛋白的表达量。以对重组别藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中表达量影响较大的几种因素用于中心组合设计;中心组合设计试验结果表明诱导温度、培养基初始p H和诱导时机对诱导结果影响显著;经Design Expert 8.0软件优化后的最佳诱导条件为:诱导温度28℃,培养基初始p H 8.5,IPTG终浓度0.1 mmol/L,以及诱导时机3 h。最后验证试验得到的蛋白表达量在已有文献报道结果的基础上提高了70%-580%。中心组合设计-响应面法能够在有限的实验次数下,对影响生物过程的因子进行优化及对其交互作用进行评价,蛋白表达量达20.4 mg/L;IPTG用量由原来的1 mmol/L减少至现在的0.1 mmol/L,降低了发酵成本。
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关键词
重组别藻蓝蛋白α亚基
诱导表达
优化
响应面法
中心组合设计
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职称材料
铀胁迫对两种蓝藻生长及抗氧化酶活性的影响
被引量:
5
2
作者
唐东山
张容芳
+3 位作者
周孙林
吕俊文
张晓文
谢水波
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期609-614,共6页
研究了不同浓度铀(0.1、1.0、10.0和30.0mg·L-1)胁迫对满江红鱼腥藻(Anabaena azollae)和爪哇伪枝藻(Scytonemaj avanicum)生长及抗氧化酶活性的影响。结果表明,低浓度铀(0.1和1.0mg·L-1)条件下,两种蓝藻的超氧化物歧化酶(SOD...
研究了不同浓度铀(0.1、1.0、10.0和30.0mg·L-1)胁迫对满江红鱼腥藻(Anabaena azollae)和爪哇伪枝藻(Scytonemaj avanicum)生长及抗氧化酶活性的影响。结果表明,低浓度铀(0.1和1.0mg·L-1)条件下,两种蓝藻的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量均无明显变化;叶绿素a含量和可溶性蛋白质含量均较对照上升,表明低浓度铀对A.azollae和S.javanicum均未形成明显胁迫,对生长表现为刺激和促进作用。10.0mg·L-1浓度的铀对A. azollae的生长影响不大,对S. javanicum却产生了明显的抑制作用。30.0mg·L-1铀胁迫下,两种蓝藻中的MDA显著增加,抗氧化酶系统受到破坏,生长严重受阻。实验结果显示,A. azollae和S. javanicum的耐铀极限分别在10.0~30.0mg·L-1和1.0~10.0mg·L-1之间,A. azollae的抗铀性比S. javanicum强。
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关键词
满江红鱼腥藻
爪哇伪枝藻
抗氧化酶
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职称材料
城市固体废物倾倒对附近土壤理化性质的影响研究
3
作者
周孙林
《中国新技术新产品》
2022年第24期136-138,共3页
该文研究了城市生活垃圾倾倒对土壤质量的影响。在距离垃圾场10 m、20m、30 m和对照100 m的4个试验坑中分别于深度为0.3 m、0.6 m、0.9 m处采集土壤样品。对采集的土壤样品进行了理化分析和岩土学分析。然后将理化参数与未污染土壤中化...
该文研究了城市生活垃圾倾倒对土壤质量的影响。在距离垃圾场10 m、20m、30 m和对照100 m的4个试验坑中分别于深度为0.3 m、0.6 m、0.9 m处采集土壤样品。对采集的土壤样品进行了理化分析和岩土学分析。然后将理化参数与未污染土壤中化学成分的最大允许浓度进行比较。结果表明,垃圾场附近土壤质地属于砂壤土,pH(6.3~8.32)、电导率(241 s/cm~2018 s/cm)、总有机碳(0.24~2.16%)和总有机质(0.41%~3.73%)在垃圾场附近较高,随着深度和距离的增加而降低。可提取微量元素和重金属(Pb、Cd、Cr、Ni)浓度在垃圾场附近较高,随着土壤深度和距离垃圾场的远近逐渐降低。土壤的土工性质变化受城市固体废弃物倾倒的影响,随着深度的增加而减少。
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关键词
固体废物
土壤
理化性质
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职称材料
重组别藻蓝蛋白(holo-apcB)的抗氧化活性研究
被引量:
2
4
作者
周孙林
陈华新
+2 位作者
姜鹏
李富超
唐东山
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2014年第8期112-116,共5页
本研究利用代谢工程技术原理在重组大肠杆菌表达合成了嗜热聚球藻(Thermosynechococcus elongatus BP-1)别藻蓝蛋白β亚基(holo-apcB),并利用亲和层析的方法对holo-apcB进行了分离纯化。SDS-PAGE电泳胶图显示,holo-apcB分子量与18.4 ku...
本研究利用代谢工程技术原理在重组大肠杆菌表达合成了嗜热聚球藻(Thermosynechococcus elongatus BP-1)别藻蓝蛋白β亚基(holo-apcB),并利用亲和层析的方法对holo-apcB进行了分离纯化。SDS-PAGE电泳胶图显示,holo-apcB分子量与18.4 ku的蛋白条带相近,与理论分子量吻合。光谱学分析结果显示,其最大吸收峰为615 nm,最大荧光发射峰为640 nm,与天然别藻蓝蛋白β亚基具有相同的分子量和光谱学性质。在55℃条件下,holo-apcB的半衰期高达31.9 h。以嗜热聚球藻天然别藻蓝蛋白(APC)及脱辅基别藻蓝蛋白β亚基(apo-apcB)为参照,分析了holo-apcB的抗氧化活性。结果显示,holo-apcB具有最强的抗氧化能力,其清除羟自由基和氢过氧自由基半数抑制浓度(IC50)分别为224.9μg/mL和20.6μg/mL,显著低于apo-apcB和天然APC的IC50,这表明holo-apcB中的藻蓝胆素也参与了抗氧化过程。
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关键词
别藻蓝蛋白
抗氧化活性
自由基
原文传递
题名
响应面法优化重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apcA)的发酵条件
被引量:
4
1
作者
周孙林
陈华新
姜鹏
李富超
唐东山
机构
南华大学污染控制与资源化湖南省高校重点实验室
中国科学院海洋研究所
南华大学环境保护与安全工程学院
出处
《海洋科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期56-63,共8页
基金
国家海洋公益性行业科研专项经费项目(201205027-2)
国家863计划项目(2014AA093505
+1 种基金
2014AA039501)
国家自然科学基金项目(41276164)
文摘
采用响应面法对重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apc A)的发酵条件进行优化,提高了蛋白的表达量。以对重组别藻蓝蛋白α亚基在大肠杆菌中表达量影响较大的几种因素用于中心组合设计;中心组合设计试验结果表明诱导温度、培养基初始p H和诱导时机对诱导结果影响显著;经Design Expert 8.0软件优化后的最佳诱导条件为:诱导温度28℃,培养基初始p H 8.5,IPTG终浓度0.1 mmol/L,以及诱导时机3 h。最后验证试验得到的蛋白表达量在已有文献报道结果的基础上提高了70%-580%。中心组合设计-响应面法能够在有限的实验次数下,对影响生物过程的因子进行优化及对其交互作用进行评价,蛋白表达量达20.4 mg/L;IPTG用量由原来的1 mmol/L减少至现在的0.1 mmol/L,降低了发酵成本。
关键词
重组别藻蓝蛋白α亚基
诱导表达
优化
响应面法
中心组合设计
Keywords
Holo-α-allophycocyanin(holo-apc A)
induce and express condition
optimization response surface methodology
central composite design
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
铀胁迫对两种蓝藻生长及抗氧化酶活性的影响
被引量:
5
2
作者
唐东山
张容芳
周孙林
吕俊文
张晓文
谢水波
机构
南华大学污染控制与资源化湖南省高校重点实验室
南华大学环境保护与安全工程学院
南华大学城市建设学院
出处
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期609-614,共6页
基金
湖南省自然科学基金(09JJ6046)
湖南省高校重点实验室开放基金(09K071)
国家自然科学基金项目(11175081)联合资助
文摘
研究了不同浓度铀(0.1、1.0、10.0和30.0mg·L-1)胁迫对满江红鱼腥藻(Anabaena azollae)和爪哇伪枝藻(Scytonemaj avanicum)生长及抗氧化酶活性的影响。结果表明,低浓度铀(0.1和1.0mg·L-1)条件下,两种蓝藻的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量均无明显变化;叶绿素a含量和可溶性蛋白质含量均较对照上升,表明低浓度铀对A.azollae和S.javanicum均未形成明显胁迫,对生长表现为刺激和促进作用。10.0mg·L-1浓度的铀对A. azollae的生长影响不大,对S. javanicum却产生了明显的抑制作用。30.0mg·L-1铀胁迫下,两种蓝藻中的MDA显著增加,抗氧化酶系统受到破坏,生长严重受阻。实验结果显示,A. azollae和S. javanicum的耐铀极限分别在10.0~30.0mg·L-1和1.0~10.0mg·L-1之间,A. azollae的抗铀性比S. javanicum强。
关键词
满江红鱼腥藻
爪哇伪枝藻
抗氧化酶
Keywords
uranium stress
A nabaena azollae
Scytonema javanicum
antioxidant enzyme
分类号
X171.5 [环境科学与工程—环境科学]
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职称材料
题名
城市固体废物倾倒对附近土壤理化性质的影响研究
3
作者
周孙林
机构
利诚检测认证集团股份有限公司
出处
《中国新技术新产品》
2022年第24期136-138,共3页
文摘
该文研究了城市生活垃圾倾倒对土壤质量的影响。在距离垃圾场10 m、20m、30 m和对照100 m的4个试验坑中分别于深度为0.3 m、0.6 m、0.9 m处采集土壤样品。对采集的土壤样品进行了理化分析和岩土学分析。然后将理化参数与未污染土壤中化学成分的最大允许浓度进行比较。结果表明,垃圾场附近土壤质地属于砂壤土,pH(6.3~8.32)、电导率(241 s/cm~2018 s/cm)、总有机碳(0.24~2.16%)和总有机质(0.41%~3.73%)在垃圾场附近较高,随着深度和距离的增加而降低。可提取微量元素和重金属(Pb、Cd、Cr、Ni)浓度在垃圾场附近较高,随着土壤深度和距离垃圾场的远近逐渐降低。土壤的土工性质变化受城市固体废弃物倾倒的影响,随着深度的增加而减少。
关键词
固体废物
土壤
理化性质
分类号
X705 [环境科学与工程—环境工程]
下载PDF
职称材料
题名
重组别藻蓝蛋白(holo-apcB)的抗氧化活性研究
被引量:
2
4
作者
周孙林
陈华新
姜鹏
李富超
唐东山
机构
南华大学污染控制与资源化湖南省高校重点实验室
中国科学院海洋研究所
南华大学环境保护与安全工程学院
出处
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2014年第8期112-116,共5页
基金
海洋公益性行业科研专项经费项目(201205027-2)
863计划项目(2014AA093505)
国家自然科学基金(41276164)
文摘
本研究利用代谢工程技术原理在重组大肠杆菌表达合成了嗜热聚球藻(Thermosynechococcus elongatus BP-1)别藻蓝蛋白β亚基(holo-apcB),并利用亲和层析的方法对holo-apcB进行了分离纯化。SDS-PAGE电泳胶图显示,holo-apcB分子量与18.4 ku的蛋白条带相近,与理论分子量吻合。光谱学分析结果显示,其最大吸收峰为615 nm,最大荧光发射峰为640 nm,与天然别藻蓝蛋白β亚基具有相同的分子量和光谱学性质。在55℃条件下,holo-apcB的半衰期高达31.9 h。以嗜热聚球藻天然别藻蓝蛋白(APC)及脱辅基别藻蓝蛋白β亚基(apo-apcB)为参照,分析了holo-apcB的抗氧化活性。结果显示,holo-apcB具有最强的抗氧化能力,其清除羟自由基和氢过氧自由基半数抑制浓度(IC50)分别为224.9μg/mL和20.6μg/mL,显著低于apo-apcB和天然APC的IC50,这表明holo-apcB中的藻蓝胆素也参与了抗氧化过程。
关键词
别藻蓝蛋白
抗氧化活性
自由基
Keywords
allophycocyanin
antioxidant activity
free radical
分类号
TS254.58 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
响应面法优化重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apcA)的发酵条件
周孙林
陈华新
姜鹏
李富超
唐东山
《海洋科学》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
下载PDF
职称材料
2
铀胁迫对两种蓝藻生长及抗氧化酶活性的影响
唐东山
张容芳
周孙林
吕俊文
张晓文
谢水波
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
5
下载PDF
职称材料
3
城市固体废物倾倒对附近土壤理化性质的影响研究
周孙林
《中国新技术新产品》
2022
0
下载PDF
职称材料
4
重组别藻蓝蛋白(holo-apcB)的抗氧化活性研究
周孙林
陈华新
姜鹏
李富超
唐东山
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2014
2
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