EGFR m^(6)A修饰参与肺动脉高压发病机制的研究进展

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是一种严重的心血管疾病,其发病机制尚不十分明确.N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m^(6)A)修饰是真核生物mRNA最普遍的内部修饰,m^(6)A通过调节mRNA的转录、翻译和降解,调控多种生物过程.最近的研究表明,mRNA m^(6)A修饰与PH的形成有关,同时,m^(6)A结合蛋白YTH-DF2在该过程中发挥重要作用.YTHDF2通过调控表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)mRNA的稳定性和转录水平,影响PH的发病过程.文章以m^(6)A修饰、YTHDF2和EGFR的关系为切入点,对近期PH领域相关研究成果进行综述.

大鼠Hes1腺病毒干扰载体构建及功能鉴定

目的构建高滴度大鼠Hes1腺病毒干扰载体(Ad-Hes1-shRNA)。方法设计3对Hes1-shRNA寡核苷酸序列,通过定向克隆构建pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA干扰质粒,将pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA和pHBAd-BHG共转染293T细胞,以包装Ad-Hes1-shRNA,利用改进TCID50法进行病毒滴度测定。Ad-Hes1感染H9c2心肌细胞,Western blot检测Hes1表达。结果 pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA构建成功,Ad-Hes1-shRNA包装顺利,滴度为1.0×10^(11) PFU/mL,并可在H9c2心肌细胞内发挥干扰效应。结论 Ad-Hes1-shRNA包装成功,在心肌细胞中具有Hes1的干扰效应。

Notch1胞内结构域真核表达质粒构建及在H9c2心肌样细胞的表达和生物学功能

目的构建Notch l胞内结构域(N1ICD)真核表达质粒,确定能在H9c2心肌样细胞内表达,并发挥生物学效应,为后续Notch1信号通路的研究提供实验依据。方法设计并合成1对含有BamH I和EcoR I酶切位点的特异性引物,以小鼠cDNA文库为模板,经PCR扩增得到了1 122 bp的目的片段,定向克隆至pcDNA 3.1/myc-His质粒,构建pcDNA3.1/N1ICD-myc-His真核表达质粒。通过双酶切及基因测序鉴定,经Lipofectamine 2000转染至H9c2心肌样细胞,48 h后提总蛋白,Western-blotting检测myc和Hes1,确定N1ICD能在H9c2细胞表达,并启动下游基因表达。结果表达质粒pcDNA3.1/N1ICD-myc-His双酶切及基因测序正确,N1ICD可在H9c2心肌样细胞内高效表达,具有Notch1生物学效应。结论真核表达质粒pcDNA3.1/N1ICD-myc-His构建成功,为Notch1信号通路在心血管领域的功能研究奠定了基础。

浅谈篮球运动员的无球移动意识

篮球的意识是随着运动员篮球技能的形成而产生,随着篮球技战术的发展而提高。意识的好坏取决于无球队员对球场上复杂情况的观察、分析、思维、判断。意识能力的高低是影响比赛质量和结果的关键。

Notch1 miRNA干扰质粒构建及功能鉴定

目的设计及构建大鼠Notch1微小干扰核糖核酸(miRNA)干扰质粒,最终筛选出效果最好的干扰质粒。方法针对大鼠Notch1基因分别设计3对pre-miRNA序列,通过T4连接酶克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miRNA表达载体构建干扰质粒,基因测序鉴定,经Lipofectamine 2000转染至H9c2心肌样细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光确定转染效率,Western blot检测3对干扰质粒、阴性对照质粒对Notch1胞内结构域(N1ICD)表达的影响。结果测序表明,Notch1干扰序列及读码框完全正确,荧光显微镜观察H9c2心肌样细胞miRNA瞬时转染效率在80%左右。Western blot显示miRNA6637对Notch1干扰效果最强。结论成功构建大鼠Notch1 miRNA的有效干扰质粒,为Notch1信号通路在心血管领域的功能研究奠定了基础。

Notch1胞内结构域慢病毒表达载体及干扰载体的构建

目的构建高滴度大鼠N1ICD慢病毒过表达载体(LV-N1ICD)及N1ICD慢病毒干扰载体(LV-N1ICD-sh RNA)。方法以大鼠c DNA文库为模板,PCR法扩增N1ICD,通过定向克隆构建p GC-FU-N1ICD-3Flag穿梭质粒;设计4对N1ICD-sh RNA寡核苷酸序列,以构建GVC112-N1ICD-sh RNA干扰质粒,将p GC-FU-N1ICD-3Flag和GVC112-N1ICD-sh RNA共转293T细胞,检测Flag的表达,筛选理想的GVC112-N1ICD-sh RNA干扰质粒。将p GC-FU-N1ICD-3Flag或GVC112-N1ICD-sh RNA与p Helper 1.0、p Helper 2.0共转293T细胞,以包装LV-N1ICD和LV-N1ICD-sh RNA,分别利用Real-time PCR、药物筛选法进行病毒滴度测定。LV-N1ICD及LV-N1ICD-sh RNA分别感染H9c2心肌细胞,利用CCK-8检测细胞活力。结果 p GC-FU-N1ICD-3Flag和GVC112-N1ICD-sh RNA质粒经PCR、基因测序及Western-blotting验证构建成功,与p Helper 1.0、p Helper 2.0共转293T细胞后,取上清浓缩,分别获得高滴度LV-N1ICD和LV-N1ICD-sh RNA。LV-N1ICD可明显提高心肌细胞活力,LV-N1ICDsh RNA可降低心肌细胞活力。结论 LV-N1ICD和LV-N1ICD-sh RNA包装成功,具有Notch1信号通路生物学功能。

河南体育产业现状调查及对策研究

通过文献资料和调查访问,经过探索和研究河南体育产业的现状、发展趋势和自身的地理特点,提出开发对策和改进建议。期望为河南的体育产业可持续发展提供系统的理论指导。

肺癌侵袭转移分子学研究进展

肺癌目前主要采取以手术为主的综合治疗,但影响远期生存率的因素不是肺癌的局部复发,而是远处转移。有些早期肺癌（T1N0M0）一经诊断就有远处转移，或存在亚临床转移，且相同组织学类型、病理分期和细胞分化程度的肺癌．在不同的个体远处转移率可能完全不同．因此．如何早期发现或／和预测肺癌转移或亚临床转移．一直是困扰肺癌临床的难题。国内外学者将分子生物学的手段引入到肺癌侵袭转移研究领域．以图阐明肺癌发生以及转移的规律．本文就此作一综述．

将快乐体育理念引入高校排球教学的实施途径研究

高校排球课堂教学与快乐体育理念有着紧密的内在的关系,在排球训练与教学中如何合理科学选用体育游戏,更有效提高学生对学排球的兴趣,使学生更快掌握排球基本技术要领,从而提高教学效率有着重大的意义。本文首先引入快乐体育教学理念对排球教学过程中存在的一些问题进行分析,在此基础上提出了体育游戏在排球教学与训练中合理应用的具体办法进行分析。要实现大学生体育技能的掌握,重视培养大学生的自我锻炼能力。

基层田径运动会裁判方法研究

基层田径运动会的裁判工作方法是否得当将直接影响到运动会的进程与成败。如何提高基层田径运动会的裁判水平将成为基层田径运动会裁判工作的重中之重。本文根据基层田径运动会的规模、特点及对未来裁判的要求提出了实质性的建议及工作发展方向。

普通高中学生体育学习目标设置能力现状的调查研究

目标设置是学生"自主学习"过程中制定学习计划和进行学习监控的开始部分,只有制定了合理的学习目标,才能使学习计划顺利地进行下去,并且在学习过程中根据所制定的目标和学习情况,调整学习计划和学习方法等.普通高中学生在体育学习过程中的目标设置能力分为任务分析、自身能力判断和结果预期三个部分,通过分析,发现了其中存在的问题和不足,并提出了合理的建议.

河南普通高校体育课程设置与选项教学研究

通过查阅文献资料、专家询问和问卷调查等方法,结合教学经验,对河南省高校体育课程设置提出了新的构思,以及完善体育课选项教学的建议。

中老年患者瓣膜替换同期冠状动脉旁路移植术临床研究

目的对45岁以上风湿性心脏病患者行瓣膜置换合并冠脉搭桥手术后临床疗效进行研究,总结同期行瓣膜置换合并冠脉搭桥术的特点与经验。方法对193例患有风湿性心脏病合并高血压、高血脂、高血糖(三者至少一项)患者,建议冠脉造影,发现冠脉病变后施行瓣膜置换合并冠脉搭桥术,共计47例,其中单支冠脉病变23例,双支冠脉病变13例,三支冠脉病变11例,二尖瓣置换25例,主动脉瓣置换10例,二尖瓣和主动脉瓣双瓣置换12例。结果术后发生低心输出量综合征1例,无早期死亡患者。术后随访47例,心功能均明显改善。结论年龄较大风湿性心脏病患者,尤其有高血压、高血脂、高血糖病史,容易伴有冠状动脉粥样硬化,术前筛查非常重要,施行瓣膜置换联同冠脉搭桥术是治疗心瓣膜病合并冠脉病变的有效方法。

腔内隔绝术治疗Stanford B型主动脉夹层动脉瘤的临床研究

目的:探讨Stanford B型主动脉夹层动脉瘤腔内治疗的意义。方法:对59例行Stan-ford B型主动脉夹层动脉瘤腔内隔绝术患者的临床资料进行回顾性分析,术前采用CTA对主动脉夹层动脉瘤进行评估,术中在数字减影血管造影监视下经股动脉或髂动脉将移植物导入胸主动脉封闭夹层裂口。结果:术中移植物全部释放成功,无夹层动脉瘤及手术相关的并发症。结论:腔内隔绝术治疗Stanford B型主动脉夹层动脉瘤是一种创伤小、恢复快的新方法。

简化太极拳技击教学模式探析

太极拳作为我国传统文化的一部分，蕴含着丰富的哲学思想，同时也是强身健体和修身养性的有效途径。在当前的高职院校中实行太极拳的技击教学，不仅是对我国传统文化的传承，更是提高学生身体素质的重要内容。在进行太极拳技击教学过程中，不同的教学模式，对教学的效果也有不同的影响作用。对简化太极拳技击教学模式的探析，是当前高职院校提高太极拳教学质量的重要课题。

试论体育教学方法实施及创新发展

体育教学方法突出教师的作用，因为传统教学思想的原因，体育教学方法单一，课堂目标背离了实践，导致学生体育课堂质量降低。本文阐述了体育教学方法，分析了体育教学方法实施情况，提出了体育教学创新对策，以期促使体育教学效果与质量的提高。

我国体育产业市场化融资渠道研究

本文从我国体育产业市场化融资渠道的基础与条件出发,探讨如何拓宽我国体育产业市场化融资渠道。

“升”、“降”级制教学法在跳高教学中的运用

跳高,是学校的基础教材。但在教学的过程中,常常会遇到这样或那样的问题、加上传统教学法的弊端,往往使教学工作难以推进。本文通过分析传统教学法的弊端,提出一种新的教学法：“升”、“降”级制教学法,并阐述了在跳高教学中的运用。

复合技术在冠心病中的临床应用

目的总结应用复合技术(hybrid技术)治疗冠心病的临床疗效。方法对8例冠心病患者用hy-brid技术进行心肌再血管化。所有患者术前肺功能检查结果基本正常,其中合并高血压6例、糖尿病4例、陈旧性心肌梗死5例、肾功能不全2例、心功能不全3例。术前冠状动脉造影提示左前降支(LAD)存在75%～100%狭窄,同时伴有右冠状动脉(RCA)或左回旋支(LCX)70%～98%狭窄。心脏彩超提示左室射血分数0.41～0.62(0.55±0.16)。结果全组无死亡、出血、脑卒中、心律失常、心肌梗死、伤口感染等并发症。心脏不停跳下冠状动脉旁路移植术(MIDCAB)手术时间1.6～2.7 h,平均(1.7±0.9)h。气管插管时间5～13 h,平均(7.8±2.9)h。胸腔24 h引流量为(65～410)mL,平均(213.4±189.3)mL。ICU滞留时间1～2 d,平均(1.4±0.5)d。术后住院5～9 d,平均(5.7±1.9)d。随访0.7～2.7年,平均(2.2±0.6)年,无远期死亡和心肌梗死,无再次手术。结论hybrid技术治疗多支冠状动脉病变是一项安全、有效的手术方式,其远期疗效仍有待于更多的临床应用和临床试验加以验证。

脂联素防治糖尿病心肌病的研究进展

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy, DCM)是一种基于糖尿病,排除心脏本身疾病导致的独立的缺血性心肌疾病。DCM的发病机制由多因素造成,目前并不十分明确,其主要由心肌细胞的损伤、血糖浓度增高、能量代谢紊乱及微血管病变引起。脂联素(adiponectin, APN)具有降血糖、调血脂、抗凋亡、抗炎症反应、抗氧化作用,也能预防动脉粥样硬化,与DCM的发生发展具有密切关系。本文就APN在DCM中作用的研究进展作一综述。