啤酒酵母Ubr1野生型和缺失型菌株的比较蛋白组学分析

目的寻找并验证Ubr1泛素化底物蛋白大规模筛选方法的可行性。方法通过对啤酒酵母RJD347(Ubr1野生型)和AVY26(Ubr1缺失型)的差异蛋白质组学比较,分析酵母中可能存在的Ubr1直接或间接作用的底物蛋白。进一步通过外源表达实验验证差异蛋白与Ubr1之间的相关性。结果组学研究得到249个差异表达蛋白,其中145个蛋白在AVY26(Ubr1缺失型)中表达上调。选取其中40个并外源表达验证5个差异蛋白MLC2、SCD6、AR G1、HO G1及R TF1与Ubr1具有相关性,受泛素连接酶Ubr1的泛素化调控。结论建立Ubr1泛素化底物候选蛋白库,同时验证出5个潜在Ubr1泛素化底物蛋白。