富血小板血浆调控SOX9对缓解SD大鼠膝骨关节炎的影响

目的 探讨富血小板血浆细胞(PRP)与Y染色体上的性别决定基因区域(SOX9)受体激动剂对缓解SD大鼠膝骨关节炎综合征(KOA)的影响。方法 实验自2021年4月至2022年3月,体外用脂多糖(LPS)诱导SD大鼠关节软骨细胞炎症模型,用不同浓度的PRP与SOX9激动剂干预经LPS处理后的SD大鼠软骨细胞,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)与实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测相关疾病的mRNA表达水平。体内注射实验通过在局部麻醉作用下假手术离断SD大鼠的前交叉韧带而建立了KOA模型,分为实验组(10只)、对照组(10只)和假手术组大鼠(10只),采用苏木精-伊红(HE)染色、番红固绿染色及双甲苯胺蓝染色均显示无病理损伤,采用免疫组化染色检测软骨中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和低聚蛋白多糖酶-4(ADAMTS-4)。结果 体外实验,ELISA法结果显示,与正常组比较,在LPS的影响下白细胞介素(IL)-1β(81.65±1.37比58.3±2.26)、IL-6(73.3±1.75比34.75±1.75)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)(22.76±0.37比13.41±0.23)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)(1.06±0.01比0.84±0.02)浓度明显上升,加入不同浓度的PRP后各炎症因子均明显下降(P<0.05),在加入SOX9激动剂后各炎症因子下降更明显(64.29±1.87、47.01±1.75、19.24±0.16、0.92±0.01)(均P<0.01);RT-PCR结果显示,在LPS的影响下MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1β、IL-6、环氧化酶-2抑制剂(COX-2)的mRNA表达上升,而软骨蛋白聚糖抗体(ACAN)和Ⅱ型多肽胶原酶(COL2A1)的表达量明显下降(均P<0.05),在加入不同浓度的PRP和SOX9激动剂后在各指标均得到明显恢复,其中以SOX9激动剂影响下最为明显(均P<0.01)。体内病理实验,通过膝关节软骨大体观检查和关节病理组织切片及染色等结果的显示,实验组关节软骨的局部病理软组织损伤及程度可较对照组明显减轻。结论 富血小板血浆可能会通过调控SOX9受体的表达,减少高聚蛋白多糖的丢失和抑制软骨细胞肥大因子及软骨细胞基质中的Ⅱ型胶原质的诱导降解,并还能直接有效地抑制由于LPS所致软骨的各种炎症因子蛋白的异常表达生成和诱导释放,从而可减少对软骨细胞的外源基质因子的诱导降解,达到缓解骨关节炎病程发展的目的。

地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制研究

目的研究地榆皂苷Ⅰ对大鼠膝骨关节炎的作用机制。方法选择SD雄性乳鼠8只,提取乳鼠软骨细胞,采用CCK-8实验检测细胞增殖率以确定最佳药物浓度。将软骨细胞随机分为对照组、炎症组和治疗组,对照组在完全培养基中进行培养,炎症组在含有10μg/mL白细胞介素-1β(IL-1β)的培养基中培养,治疗组在含有10μg/mL IL-1β和最佳浓度地榆皂苷Ⅰ的培养基中培养。采用Calcein-AM/PI染色观察各组软骨细胞生长情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组软骨细胞中白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA相对表达量。取8周龄左右的SD雄性大鼠24只随机分为对照组、炎症组和治疗组,每组8只,对炎症组和治疗组建立骨关节炎模型,建模完成4周后,炎症组和对照组的关节腔内注射等体积生理盐水,治疗组的关节腔内注射100μL最佳浓度的地榆皂苷Ⅰ溶液,1次/周,连续给药4周。采用HE染色和番红O-固绿染色观察各组膝关节组织结构。采用免疫组化染色观察各组膝关节组织中IL-6、MMP13蛋白表达情况。结果CCK-8实验结果显示,各实验浓度均未表现明显细胞毒性,当地榆皂苷Ⅰ的浓度为20 mg/L时,软骨细胞增殖率最高。Calcein-AM/PI染色结果显示,炎症组和治疗组细胞增殖率低于对照组,治疗组细胞增殖率高于炎症组,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR检测结果显示,炎症组和治疗组IL-6、MMP13 mRNA相对表达量高于对照组,治疗组IL-6、MMP13 mRNA相对表达量低于炎症组,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色和番红O-固绿染色结果显示,对照组的膝关节组织结构比炎症组和治疗组完整,与炎症组相比,治疗组膝关节组织损伤有所减轻。免疫组化染色结果显示,炎症组IL-6、MMP13蛋白表达水平最高,治疗组IL-6、MMP13蛋白表达水平高于对照组。结论地榆皂苷Ⅰ可通过维持软骨细胞活力、降低炎症因子的释放以及减少软骨细胞外基质(ECM)的降解发挥抗炎作用,对膝骨关节炎有一定的药用潜力。

小产权房问题思考

冰冻三尺，非一日之寒。小产权房问题的出现．正说明了在我国目前房地产市场的游戏规则下有着深厚的生存基础，是市场参与主体自发选择的产物。尽管从现行法律体系来看，小产权房应该是不为所容的“异类”，但实际上这种现象存在已有十多年之久，俨然成为正规房地产市场的重要组成部分．是一个不容忽视的商品形式。

土地储备制度的政府让渡与组织合作优化机制探讨——以上海为例

上海作为土地储备制度的创始城市，在政府职能让渡、提高公共绩效方面取得了一定成绩。这不仅仅是一种示范效应，同时也是当代新公共管理发展的核心理念的重要体现。

富血小板血浆和弗林蛋白酶激动剂对大鼠膝骨关节炎的缓解作用实验研究

目的:探究富血小板血浆(PRP)和弗林蛋白酶(Furin)激动剂对SD大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响。方法:①体内实验部分,通过手术离断SD大鼠前交叉韧带建立KOA模型;实验组(10只)关节腔隔天注射0.5ml激活后的PRP,对照组(模型组,10只)和假手术组(10只)关节腔隔天注射0.9%氯化钠溶液0.5ml,持续4周;取大鼠膝关节组织采用HE、甲苯胺蓝和番红固绿染色显示病理损伤,采用免疫组化染色检测软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS)-5和白细胞介素(IL)-1β两种相关抗体的表达。②体外实验部分,采用脂多糖(LPS)诱导关节软骨细胞炎症模型,用递增浓度PRP和Furin激动剂干预LPS处理的SD大鼠软骨细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测相关基因[基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、IL-6、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1β和环氧化酶(COX)-2、聚蛋白多糖(ACAN)和Ⅱ型胶原A1(COL2A1)]mRNA的表达,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平。结果:①体内实验部分,膝关节大体观及病理切片染色结果均显示,与对照组相比,实验组关节软骨病理损伤程度明显减轻。②体外实验部分,ELISA结果显示,加入LPS后IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS浓度显著增加,加入不同浓度PRP后各炎症因子浓度随着PRP浓度的增加呈下降趋势,加入Furin激动剂后各炎症因子浓度亦有所下降(均P<0.05);RT-PCR结果显示,加入LPS后MMP-3、MMP-13、IL-6、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1β和COX-2的mRNA表达增加,ACAN和COL2A1的mRNA表达下降(均P<0.05),而加入不同浓度PRP和Furin激动剂后上述指标有所修复。结论:PRP和Furin激动剂对SD大鼠KOA均有明显的缓解作用。

芦荟苷体内外对大鼠骨关节炎模型的炎症抑制效应

目的探讨芦荟苷对SD大鼠骨关节炎保护作用机制。方法体外用LPS诱导关节软骨细胞损伤模型,分为模型组、低浓度芦荟苷组、中浓度芦荟苷组、高浓度芦荟苷组,并设对照组。通过CCK-8法检测芦荟苷的细胞毒性,筛选最适试验浓度,通过Calcein-AM/PI染色、HE及番红O染色检测软骨细胞增殖、形态及蛋白多糖的分泌,Hoechst 33258检软骨细胞测DNA含量,DMMB测定糖胺聚糖含量,实时q PCR检测相关基因的表达,ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α和iNOS等炎性因子的水平。手术离断SD大鼠前交叉韧带建立骨关节炎模型,隔日关节腔分别注射50μmol/L芦荟苷和生理盐水100μl,连续1月,HE及番红固绿染色显示病理损伤。结果芦荟苷可以促进软骨细胞增殖,且在50μmol/L时增殖作用最明显(P<0.01)。模型组糖胺聚糖分泌减少(P<0.001),软骨细胞活力明显降低(P<0.01),细胞形态呈细长的类成纤维细胞样,蛋白多糖分泌量降低,软骨特异性基因ACAN和COLA2A1的表达量明显下调,而MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1β、IL-6、环氧化酶-2(COX-2)的m RNA表达显著上调(均P<0.01),IL-1β、IL-6、TNF-α、i NOS水平显著增高(均P<0.01)。动物试验表明,与模型组相比,芦荟苷组关节软病理损伤程度明显减轻。结论芦荟苷可抑制LPS所致的炎症因子的表达和释放,减轻软骨细胞外基质降解,缓解骨关节炎的进展。

骨髓间充质干细胞治疗骨科疾病研究进展

骨髓间充质干细胞具有分化形成软骨细胞、成骨细胞、神经细胞等多向分化潜能,具有促进骨与软组织的修复且取材方便、易于培养的优势,目前已有大量研究显示,其在治疗骨科疾病领域得到了广泛的关注。近年来,骨髓间充质干细胞应用于骨科疾病治疗的基础和临床研究已成为热点,笔者就近年来骨髓间充质干细胞用于治疗骨科疾病的应用现状和疗效做一综述。

高压氧促进骨形成加速骨折愈合

背景:尽管大多数骨折能够治愈,但仍有5%-10%最后发展为骨不连,临床试验证实高压氧可以通过血液循环显著提高体内动脉血氧分压,促使新陈代谢,加速骨愈合。目的:探讨高压氧干预不同时间对家兔股骨骨折愈合的影响和相关机制。方法:12只新西兰大白兔建立股骨骨折模型,随机分成高压氧治疗1个月组、高压氧治疗2个月组、常氧治疗1个月组、常氧治疗2个月组,每组3只。高压氧治疗组于术后第1天开始将所有动物置入高压氧动物仓中行高压氧治疗1,2个月,采用酶联免疫吸附法检测血清骨钙素、Ⅰ型胶原C端肽水平,苏木精-伊红染色观察骨折愈合情况。结果与结论:①治疗1个月时,高压氧组血清骨钙素、Ⅰ型胶原C端肽水平与常氧组无明显差异(P>0.05);治疗2个月时,与常氧组比较,高压氧组血清Ⅰ型胶原C端肽水平明显减少(P<0.001)、骨钙素水平明显上升(P<0.01);②治疗1个月时,高压氧组与常氧组病理损伤程度无差异,治疗2个月时,高压氧组病理损伤程度较常氧组明显减轻;③结果表明,高压氧治疗2个月可有效提高骨形成指标骨钙素水平,提示可能促进成骨细胞形成进而对骨折愈合有积极作用。

富血小板血浆在骨科疾病治疗中的研究进展

富血小板血浆(PRP)内含多种促进组织修复的生长因子,在骨与软组织修复领域得到了广泛应用。近年来,有关PRP的基础和临床研究较多,特别在骨科疾病治疗方面。由于临床效果较明显,目前已用于多种骨科疾病的替代疗法。现结合近年国内外PRP的相关临床研究,就PRP制备及其在骨折、骨性关节炎、肌腱韧带损伤、肌肉创面损伤等骨科疾病中的应用现状及疗效研究进行综述。

基于利益相关者分析的公众参与城市更新研究

对城市更新本质进行解释,回顾欧美城市更新的经验教训和我国的特殊历史背景,借助利益相关者分析工具,研究城市更新过程中相关主体的多元利益诉求及其冲突的根源,提出引入实质性的公众参与机制,明确居民的平等、全过程参与权利,并设计相应的保障措施,为相关主体的利益博弈提供充分的时空平台,从而最终实现城市更新。