人参皂甙Rg1对帕金森病小鼠黑质JNK细胞凋亡通路的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1(ginsenosideRg1)抗帕金森病 (PD)小鼠黑质神经元凋亡的可能机制。 方法采用MPTP制备帕金森病 (PD)小鼠模型 ,经人参皂甙Rg1预处理后 ,用尼氏染色、TH和活化型caspase 3组织化学染色及TUNEL染色法观察黑质神经元的损害情况 ,并计算神经元的凋亡率 ,同时应用蛋白免疫印迹法检测黑质神经元磷酸化JNK(c Jun氨基末端激酶 )及磷酸化c Jun蛋白表达水平。 结果 人参皂甙Rg1预处理可减轻PD小鼠黑质致密带Nissl阳性神经元和TH阳性神经元的丢失现象 ,同时减少磷酸化JNK及磷酸化c Jun蛋白表达水平 ,活化型caspase 3表达减少 ,降低黑质神经元的凋亡率。 结论 人参皂甙Rg1能减少MPTP诱导的小鼠黑质神经元凋亡 ,其机制与阻断JNK细胞凋亡通路激活有关。

人参皂苷Rg1可能通过抗氧化作用来保护帕金森病鼠黑质神经元

目的 :研究人参皂苷Rg1对 1 甲基 4 苯基 1 ,2 ,3 ,6 四氢吡啶 (1 methyl 4 phenyl 1 ,2 ,3 ,6 tetra hydropyridine,MPTP)诱导的小鼠黑质神经元凋亡的抗氧化保护作用。方法 :采用MPTP制备帕金森病(PD)小鼠模型 ,经人参皂苷Rg1预处理后 ,用尼氏(Nissl)染色和TH组化染色观察黑质神经元的存活情况 ,通过活化型Caspase 3的免疫组化染色和TUNEL染色了解黑质神经元的凋亡情况 ,并用生化技术对黑质区域谷胱甘肽 (GSH)浓度及超氧化物歧化酶 (SOD)活力进行检测。结果 :人参皂苷Rg1预处理能提高黑质区域GSH的浓度及降低SOD活力 ,相应地减少PD鼠黑质致密带Nissl阳性神经元和TH阳性神经元的脱失现象 ,使活化型Caspase 3表达阳性细胞减少 ,降低黑质神经元TUNEL染色的阳性率。结论

亚低温配合自由基清除剂治疗脑梗死的临床研究

目的探讨亚低温与自由基清除剂治疗脑梗死的方法和疗效。方法139例脑梗死患者随机分为3组,对照组47例常规治疗;治疗组1:46例采用亚低温治疗;治疗组2:46例给予亚低温配合自由基清除剂治疗。分别评定治疗前后的神经功能缺损评分(NDS)、重要脏器功能指标及预后。结果与对照组相比:亚低温治疗能提高患者治疗有效率(P<0.01),降低NDS(P<0.05)和血乳酸水平(P<0.01),亚低温配合自由基清除剂治疗能显著提高患者治疗有效率(P<0.01),降低NDS(P<0.01)和血乳酸水平(P<0.01),并能显著降低患者肝、肾功能不全和心律失常的发生率(P<0.01 VS对照组);结论亚低温配合自由基清除剂辅助脑梗死的综合治疗可明显改善患者预后、提高患者治疗有效率,降低并发症,值得临床推广。

JNK通路可能介导MPTP诱导的黑质神经元凋亡

目的 探讨氧化应激激活的 c- jun NH2 - term inal kinase(JNK)细胞凋亡通路在 1-甲基 - 4 -苯基 - 1,2 ,3,6 -四氢吡啶 (MPTP)诱导帕金森病 (PD)小鼠黑质神经元凋亡中的可能作用。 方法 采用 MPTP制备 PD小鼠模型 ,应用生化技术检测黑质区域谷胱甘肽 (GSH)浓度及超氧化物歧化酶 (SOD)活力 ,尼氏体染色和酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组织化学染色观察黑质神经元的损害情况 ,原位缺口末端标记 (TUNEL )染色和活化型 Caspase 3免疫组织化学染色观察黑质神经元的凋亡情况 ,同时采用蛋白免疫印迹法检测磷酸化 JNK及磷酸化 c- jun蛋白表达水平。 结果 MPTP诱导的 PD小鼠黑质区域 GSH浓度明显降低 ,SOD活力明显升高 ,黑质致密带尼氏体阳性神经元和 TH阳性神经元显著脱失 ,磷酸化 JNK及磷酸化 c- jun蛋白表达水平上升 ,同时活化型 Caspase 3表达阳性细胞增多 ,黑质神经元 TUNEL 染色的阳性率增高。 结论 MPTP可诱导小鼠黑质神经元凋亡 ,机制与增强氧化应激并激活 JNK细胞凋亡通路有关。

miR-129对阿尔茨海默病细胞模型的调控作用

目的探究miR-129的表达水平与阿尔茨海默病(AD)的相互关系。方法用β淀粉样蛋白(Aβ)取新生SD大鼠原代海马神经元细胞培养,Aβ处理神经元细胞复制AD模型,将培养的原代细胞分为对照组、模型组、miR-129敲低组、miR-129过表达组、miR-129敲低+Aβ处理组、miR-129过表达+Aβ处理组、淀粉样前体蛋白(APP)siRNA组。Q-PCR和Western印迹检测基因和蛋白水平;膜联蛋白(Annexin)V/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞凋亡,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力。结果与对照组相比,模型组miR-129表达水平显著降低,细胞凋亡率显著增高,细胞活力显著减弱(P<0.05);而过表达miR-129能够显著降低凋亡率,增加细胞活力,起到保护神经元细胞的作用,敲低miR-129则起不到保护作用;通过抑制Aβ前体可以有效减少模型组的凋亡率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-129参与了AD的发病过程,且过表达miR-129可以有效减少对于脑神经元细胞的损伤。

N-乙酰半胱氨酸防止帕金森病鼠黑质神经元凋亡

目的 :研究N 乙酰半胱氨酸 (N acetylcystein ,NAC)对 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (1 methyl 4 phenyl 1,2 ,3,6 tetrahydropyridine ,MPTP)诱导的帕金森病小鼠黑质神经元凋亡的保护机制。 方法 :采用MPTP制备帕金森病 (Parkinsondisease,PD)小鼠模型 ,应用生化技术检测黑质区域谷胱甘肽 (GSH)浓度及超氧化物歧化酶 (SOD)活力 ,用尼氏 (Nissl)染色、TH组化染色、活化型Caspase 3组化染色及TUNEL染色观察黑质神经元的损害情况 ,并计算神经元的凋亡率 ,同时应用蛋白免疫印迹法检测黑质神经元磷酸化JNK及磷酸化c Jun蛋白表达水平。另经NAC预处理该模型后 ,对上述指标进行检测。结果 :NAC预处理能提高黑质区域GSH的浓度及降低SOD活力 ,减轻PD鼠黑质致密带Nissl阳性神经元和TH阳性神经元的脱失现象 ,减少磷酸化JNK及磷酸化c Jun蛋白表达水平 ,使活化型Caspase 3表达减少并降低黑质神经元的凋亡率。结论 :NAC能减少MPTP诱导的小鼠黑质神经元凋亡 ,其机制与抗氧化及阻断JNK细胞凋亡通路的激活有关。

一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及人参皂苷Rg1的保护作用

目的 探讨一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及人参皂苷Rg1保护作用的可能机制。 方法 DNA凝胶电泳观察DNA的断裂情况 ,流式细胞仪检测线粒体跨膜电位 ,West ernblotting检测胞浆细胞色素C和活化型半胱氨酸蛋白水解酶caspase 3P2 0 水平。结果 一氧化氮供体SNAP(5 0 0μmol·L-1)可诱导PC12细胞凋亡 ,细胞线粒体跨膜电位明显下降、胞浆细胞色素C水平增加及caspase 3得到激活 ;预先经过 5 0、10和 2 0 μmol·L-1等浓度人参皂苷Rg1处理后 ,SNAP诱导的PC12细胞凋亡明显减少 ,同时明显减弱SNAP对细胞线粒体跨膜电位、胞浆细胞色素C水平及cas pase 3激活的影响。 结论 人参皂苷Rg1可抑制一氧化氮诱导PC12细胞凋亡 ,其作用机制可能与其稳定细胞线粒体跨膜电位、减少线粒体细胞色素C向胞浆释放及抑制cas pase

人参皂苷Rg1可能通过丝裂素活化蛋白激酶途径抑制细胞凋亡

目的 探讨人参皂苷Rg1对MPP+ 诱导细胞凋亡保护作用的可能信号传导途径。方法 用吖啶橙 溴化乙锭染色观察SHSY5Y细胞凋亡率 ,流式细胞仪检测细胞内活性氧ROS水平 ,WesternBlotting法检测JNK(c junNH2 terminalkinase)激酶活性 ,免疫细胞化学染色法检测裂解的Caspase 3阳性细胞的表达率。结果 经 10 μmol·L- 1 Rg1或 2 5mmol·L- 1 N 乙酰半胱氨酸预处理后 ,MPP+ 诱导的SHSY5Y细胞凋亡受到明显抑制 ,同时细胞内ROS下降 ,JNK激酶的活性减弱 ,裂解的Caspase 3阳性细胞表达率下降。结论 Rg1可抑制MPP+ 诱导的SHSY5Y细胞凋亡 ,其作用机制可能是通过清除ROS、减弱JNK激酶的活性 ,从而减少Caspase 3的激活。

JNK的激活在MPP^+诱导SHSY5Y细胞凋亡的信号转导中的作用

目的 :探讨MPP+ 诱导SHSY5Y细胞凋亡的可能信号转导途径。方法 :用吖啶橙 -溴化乙锭染色观察SHSY5Y细胞凋亡率 ,Westernblot法检测JNK激酶的活性 ,用JNK反义寡核苷酸转染SHSY5Y细胞抑制JNK激酶的活性。结果 :MPP+ 可诱导SHSY5Y细胞凋亡 ,在凋亡过程中JNK激酶活性增强 ,用NAC预处理或用JNK反义寡核苷酸转染后MPP+ 诱导的SHSY5Y细胞凋亡减少 ,同时JNK激酶活性增强可被抑制 ,裂解的caspase 3阳性细胞数减少。结论 :MPP+ 诱导SHSY5Y细胞凋亡 ,其可能的信号转导途径是通过JNK激酶的激活从而激活caspase 3。

人参皂甙Rg1保护多巴胺能神经元的实验研究

帕金森病(PD)是中老年人常见的一种中枢神经系统变性疾病,其特征性病理变化是中脑黑质多巴胺能神经元变性坏死.近年来许多证据显示氧化应激反应增强是导致帕金森病黑质多巴胺能神经元凋亡的主要因素.传统的帕金森病治疗包括多巴胺替代疗法、抗胆碱能药物等,近年神经元保护治疗也逐步成为新的治疗热点.人参皂甙是从祖国传统中药人参中提取的有效成分之一,已有的研究提示,人参皂甙Rg1可保护大鼠大脑皮质神经细胞,防止细胞凋亡的发生.但是,人参皂甙Rg1对多巴胺能神经元是否也有保护作用,国内外尚未见文献报道.

CDK4-pRB-E2F1通路是Aβ_(1-40)诱导皮层神经元凋亡的可能途径

目的 :探讨 β淀粉样肽1-40 (beta -amyloidpeptide1-40 ,Aβ1-40 )诱导大鼠皮层神经元凋亡的可能分子机制。方法 :以 4 0mg/L的Aβ1-40 诱导离体培养的大鼠皮层神经元凋亡 ,流式细胞仪及免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶 4 (CDK4 )、磷酸化的视网膜神经胶质瘤蛋白 (pRB)水平 ;RT -PCR技术检测E2F1mRNA表达水平 ;荧光分光光度计检测半胱氨酸基天冬氨酸特异性蛋白酶 3(caspase - 3)活力 ;观察在Aβ1-40 诱导凋亡过程中是否伴随上述指标的变化。结果 :①CDK4、磷酸化pRB水平在Aβ1-40 作用后 2 - 4h显著升高 ;②Aβ1-40 孵育 3h后皮层神经元E2F1基因表达上调 ;③Aβ1-40 作用 12 - 2 4h后caspase- 3活力明显升高。结论 :CDK4 -pRB -E2F1信号转导通路可能在Aβ1-40 诱导的大鼠皮层神经元凋亡中起主要作用。

赤芍801对大鼠脑缺血/再灌注损伤后脑源性神经营养因子表达的影响

目的:探讨赤芍801(propyl gallate,PG)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后神经功能损伤、细胞凋亡及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法:线栓右侧大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)制成SD大鼠短暂局灶性脑缺血模型,实验大鼠随机分成:正常对照组、假手术组、模型组、溶媒组、PG组(分PG23.5、47、94μmol/kg3个亚组)等5组。采用Longa等评分法进行大鼠神经功能评分;TUNEL染色法观察缺血/再灌注不同时段(1、2、4、7d)模型鼠缺血区周边组织阳性神经元数量;免疫组织化学、蛋白免疫印迹法检测缺血/再灌注后不同时段各组缺血区周边组织BDNF的表达情况。结果:脑缺血/再灌注后1d,模型大鼠神经功能缺损评分、TUNEL阳性细胞数均达到高峰。与此相仿,该时段缺血周边区的BDNF表达亦达到高峰,此后逐渐下降。该时段TUNEL阳性细胞数和BDNF表达与其它各时段(2、4、7d)比较均有升高(P<0.01)。予上述不同剂量组的PG干预后,47、94μmol/kg组大鼠的神经功能缺损评分、TUNEL阳性细胞数均有明显下降,同时缺血周边区的BDNF表达有明显增加;并以94μmol/kg组为著。结论:脑缺血/再灌注后BDNF的早期表达增加可能对促进缺血周围区的损伤修复有重要作用;PG能有效减轻脑缺血/再灌注损伤后神经细胞凋亡,改善神经功能缺损症状,机制可能与其促进BDNF的表达有关。

β淀粉样肽_(1-40)通过激活caspase-3诱导大鼠皮层神经元凋亡

目的 探讨半胱氨酸蛋白酶caspase 3在 β淀粉样肽1 4 0 (β AP1 4 0 )诱导大鼠皮层神经元凋亡中的可能作用。 方法 用 β AP1 4 0 诱导神经元凋亡 ,同时检测caspase 3活力和caspase 3活性片段及caspase 3mRNA的表达水平。 结果 4 0mg·L- 1 的凝聚态 β AP1 4 0 诱导大鼠皮层神经元凋亡过程中 ,caspase 3活力和caspase 3mRNA的表达水平均有明显增高 (P <0 0 1) ;特异性的caspase 3抑制剂Ac DEVD CHO对caspase 3的激活和皮层神经元细胞凋亡均有明显的阻断作用。 结论 caspase 3可能是 β AP1 4 0

尤瑞克林治疗高危型椎—基底动脉系统短暂性脑缺血发作的疗效观察

目的观察尤瑞克林治疗高危型椎—基底动脉系统短暂性脑缺血发作(TIA)的临床疗效。方法选择90例高危型椎—基底动脉系统TIA患者,随机分为治疗组、对照组各45例。在常规治疗的基础上,治疗组给予尤瑞克林0.15 PNAU,1次/d;对照组给予波立维75 mg,1次/d。治疗14 d后,观察两组患者凝血指标及临床症状改善情况。结果治疗后,治疗组和对照组总有效率分别为100.0%、77.8%(P<0.05),凝血指标无明显变化(P>0.05)。两组患者均未出现严重不良反应。结论尤瑞克林治疗高危型椎—基底动脉系统TIA起效快、疗效好、不良反应少。

石杉碱甲联合来士普对血管性痴呆患者的疗效观察

目的评价石杉碱甲联合来士普治疗血管性痴呆的疗效及安全性。方法选择108例血管性痴呆患者,随机分为3组,每组36例。各组均给予相同的基础药物治疗。此外,A组(石杉碱甲治疗组)予石杉碱甲100mg,bid口服;B组(来士普治疗组)予来士普10mg,qd口服;C组(石杉碱甲联合来士普治疗组)予石杉碱甲100mg,bid加用来士普10mg,qd口服,疗程均为12周。治疗前及治疗后分别做简易精神状态量表(MMSE)、日常生活自理量表(ADL)及神经电生理P300等检测,评价其疗效,并进行安全性评价。结果治疗12周后,各治疗组认知、行为能力均有改善,P300潜伏期均有缩短(P<0.05),说明石杉碱甲与来士普对血管性痴呆均有治疗作用。其中石杉碱甲联合来士普组与单独使用石杉碱甲或来士普组相比改善更明显,差异有显著性(P<0.05);不良反应少见且轻微。结论石杉碱甲联合来士普治疗血管性痴呆有较好的疗效及安全性。

卡巴拉汀治疗血管性痴呆疗效观察

目的:观察重酒石酸卡巴拉汀(艾斯仁)治疗血管性痴呆的疗效及安全性:方法:选择32例血管性痴呆患者,予卡巴拉汀口服治疗12周,按简易精神状态量表(MM SE)、临床痴呆量表(CDR)、日常生活自理量表(ADL)及神经电生理P 300等检测,评价其疗效,并进行安全性评价。结果:卡巴拉汀治疗12周后,患者以上各项指标均有明显改善,差异有显著性。治疗过程中有6例(18%)出现轻度胆碱能兴奋性副作用,未发现严重不良反应。结论:卡巴拉汀能有效治疗血管性痴呆,并具有较好的安全性。

盐酸沙格雷酯治疗Bell麻痹的疗效

Bell麻痹是茎乳孔内面神经非特异性炎症所致的周围性面神经麻痹,属于常见的周围神经疾病之一。国内流行病学调查发现,该病发病率高达49.77万/年。治疗本病多采用激素、维生素等药物,但仍有部分患者恢复不佳。我科采用盐酸沙格雷酯治疗Bell麻痹,疗效较佳。

人参皂苷Rg1可能通过CDK4-pRB-E2F1通路减少神经元凋亡

目的 探讨人参皂苷Rg1是否通过CDK4 pRB E2F1通路对抗Aβ1～ 4 0 诱导的神经元凋亡。方法 用TUNEL染色、DNA琼脂糖凝胶电泳方法观察神经元凋亡形态学和生化改变 ;免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶4(Cyclindependentkinase 4,CDK4)、磷酸化的视网膜神经胶质瘤蛋白 (Retinoblastomaprotein ,pRB)水平 ;RT PCR技术检测E2F1mRNA表达水平 ;荧光分光光度计法检测凋亡效应分子Caspase 3活力的变化。结果 人参皂苷Rg1预处理可降低Aβ1～ 4 0 诱导的大鼠皮层神经元的凋亡率 ;凋亡细胞特有的DNA梯形条带消失 ;CDK4、磷酸化pRB水平降低 ;E2F1基因表达下调 ;Caspase 3活力下降。结论 人参皂苷Rg1可通过抑制CDK4 pRB E2F1信号传导通路及Caspase 3的激活 ,减少Aβ1～ 4 0 诱导的大鼠皮层神经元凋亡。

细胞色素c的释放是多巴胺诱导PC12细胞凋亡的重要环节

通过末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口翻译法和DNA凝胶电泳观察多巴胺 (DA)对PC12细胞凋亡的诱导作用 ,并经蛋白质印迹法检测胞浆细胞色素c、Bcl 2和Bax蛋白以及活化型半胱氨酸蛋白酶 3(caspase 3)水平 .结果表明 ,在DA诱导PC12细胞凋亡的过程中 ,可见PC12细胞中活化型caspase 3蛋白表达 ,胞浆中细胞色素c水平明显增高 ,同时Bcl 2蛋白水平下降 ,而Bax蛋白水平明显增加 .环孢菌素A预处理对细胞色素c释放和caspase 3激活有明显的抑制作用 ,而对Bcl 2和Bax蛋白影响不明显 .结果提示 ,Bcl 2和Bax蛋白、细胞色素c以及caspase 3可能参与DA诱导PC12细胞凋亡 ,线粒体细胞色素c向胞浆释放可能是其中的中心环节 .