金属冶炼厂工人尿金属水平与肾结石发病的关联

[背景]砷、钴、钡等单个金属暴露被证实与肾结石发病存在关联,然而目前关于金属混合暴露与肾结石发病的研究较少,尤其是在职业人群中金属混合暴露与肾结石发病的关系尚不明确。[目的]探讨冶炼厂职业人群中金属混合暴露与肾结石发病风险的关联性。[方法]通过问卷调查的形式收集2021年7月—2022年1月广东某冶炼厂1158名金属混合暴露工人的社会人口学特征、既往史、生活方式等信息。收集工人中段晨尿,以电感耦合等离子体质谱法测定工人尿锂、钒、铬、锰、钴、镍、铜、锌、砷、硒、锶、钼、镉、铯、钡、钨、铊、铅18种金属水平,以冷原子吸收光谱测定法测量尿汞水平。根据纳入标准最终纳入919名金属混合暴露的工人为研究对象,其中肾结石组117人,非肾结石组802人。以尿金属检出率大于80%为标准,最终纳入16种金属进行后续分析。使用参数或非参数方法比较非肾结石组和肾结石组的连续型变量或离散型变量之间的差异。通过构建logistic回归模型探讨单一金属暴露与肾结石发病的关联。采用加权分位数和(WQS)回归模型以评价金属混合暴露与肾结石发病的关联及各金属对肾结石发病影响的权重。随后采用贝叶斯核机器回归(BKMR)模型探讨金属混合暴露对肾结石发病的整体影响及各金属之间的交互作用。[结果]本研究发现非肾结石组工人和肾结石组在性别、年龄、工龄、体质量指数(BMI)差异有统计学意义(均P<0.05),肾结石组工人尿钼、尿钡水平高于非肾结石组,且差异有统计学意义(均P<0.05)。logistic回归分析结果显示,尿钴、尿砷、尿钼、尿钡与肾结石发病呈正相关(均P趋势<0.05)。WQS回归分析结果显示,钒、钴、砷、钼、钡混合暴露与肾结石发病存在正向关联(P<0.05),其中钼、砷和钡权重分别为0.391、0.337、0.154。BKMR结果显示金属混合暴露与肾结石发病风险存在正向关联(P<0.05);当其他金属固定在第25或50或75百分数时,砷、钼、钴和钡对肾结石发病风险表现出正效应(均P<0.05),而钒对肾结石发病风险表现出负效应(P<0.05);交互分析显示钡、钒分别与钴存在交互作用(均P<0.05)。[结论]在该冶炼厂职业人群中,职业金属混合暴露可引起肾结石发病风险升高,其中起主要作用的金属为钼、砷、钡、钴。

某冶炼厂工人铅、镉、砷混合暴露与血压的关联

[背景]职业性铅、镉、砷暴露是引起血压升高的潜在危险因素。目前研究主要集中在单个金属与血压的关系,而实际工作环境中经常存在多种金属的混合暴露,多金属间的相互作用对血压影响及量效关系尚不明确。[目的]探究职业性铅、镉、砷混合暴露对血压影响的权重和三种金属间交互作用与血压的关联。[方法]2021年1—12月选取南方地区某冶炼厂工人为研究对象。通过问卷调查和体格检查,收集工人的人口学特征、身高、体重、血压资料;同时采集工人尿样,采用电感耦合等离子体质谱仪检测其尿铅、尿镉、尿砷,并用尿肌酐校正。采用线性回归和逻辑回归分析尿铅、尿镉、尿砷与血压之间关联;采用加权分位数之和回归分析尿铅、尿镉、尿砷与血压的剂量-反应关系及各金属影响血压的权重;采用广义线性回归和相加与相乘交互量表分析上述三种金属影响血压的交互作用。[结果]本研究共纳入1075名工人,其年龄为(44.68±5.11)岁,工龄为(24.66±5.23)年,男性891名(88.9%),女性184名(17.1%),24.7%工人为饮酒者,45.7%为吸烟者,302名(28.1%)工人为高血压患者,其中37人正在服用高血压药物。工人尿铅、尿镉、尿砷的P50(P25,P75)质量分数分别为6.11(3.71,11.08)、3.88(2.68,5.44)、26.04(19.99,35.11)μg·g-1。调整混杂因素性别、年龄、工龄、体重指数、吸烟、饮酒、高血压药物服用情况后,铅、镉、砷混合暴露每增加10%,收缩压和舒张压分别增加0.772、0.418 mmHg。尿铅、尿镉、尿砷中,对收缩压和舒张压影响权重最大的均为尿镉,权重(w)=0.523、0.551。尿铅、尿镉交互作用对高血压的发生存在正向交互作用,乘法交互指标(ORint)=1.88(95%CI:1.09~3.63),归因比例(AP)=1.19(95%CI:0.40~8.18)。[结论]本研究表明铅、镉、砷混合暴露可致血压升高,其中镉发挥主要作用;尿铅、尿镉交互作用对高血压的发生存在正向作用,该交互作用主要是影响收缩压。

职业人群重金属联合接触与早期肾损伤标志物的关联

目的探究铅、镉、砷、汞4种重金属联合接触对职业人群早期肾损伤的影响。方法采用随机数表方法,选择广东省某有色金属冶炼厂384名重金属联合接触工人为研究对象。以电感耦合等离子体质谱法测定血铅、尿镉和尿砷水平,以冷原子吸收光谱测定法(酸性氯化亚锡还原法)测定尿汞水平;以酶联免疫吸附试验法检测尿中β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)、肾损伤分子-1(Kim-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的水平。采用Spearman相关分析、线性回归、加权分位数和(WQS)回归和贝叶斯核机器回归(BKMR)模型探究上述4种重金属联合接触与早期肾损伤标志物的关联。结果研究对象血铅、尿镉、尿砷、尿汞水平的中位数分别为0.47μmol/L和4.450、27.790和0.520μg/gCr,尿中β_(2)-MG、Kim-1、NGAL水平中位数分别为62.960、1.130和18.150μg/gCr。Spearman相关分析结果显示,尿中β_(2)-MG、Kim-1、NGAL水平与血铅、尿汞水平均呈弱相关(P值均<0.01),但与尿镉、尿砷水平均不相关(P值均>0.05)。多重线性回归分析结果显示,尿汞与尿中β_(2)-MG、Kim-1、NGAL水平均呈正向关联(P值均<0.01),尿砷与尿β_(2)-MG水平呈正向关联(P<0.01),血铅与尿中β_(2)-MG、Kim-1均存在负向关联(P值均<0.05)。WQS回归分析结果显示,4种重金属的联合效应与尿中β_(2)-MG、Kim-1、NGAL水平均存在正向关联(P值均<0.01);其中,影响权重最高的均为汞,权重最低的均为铅。BKMR模型分析结果显示,尿中β_(2)-MG、Kim-1和NGAL水平均有随4种重金属联合接触程度增加而上升的趋势;当尿汞水平从第25百分位数增加至第75百分位数且其他金属相应固定于某水平时,尿中β_(2)-MG、Kim-1和NGAL水平均随之降低;当其他金属内暴露水平保持在相应中位数的水平时,尿中β_(2)-MG、Kim-1、NGAL水平均与尿砷水平呈正向关联,但与其余3种重金属之间均未观察到明显的线性剂量-反应关系。结论在该有色金属冶炼职业人群中,铅、砷和汞与早期肾损伤标志物存在独立关联。4种重金属对尿中β_(2)-MG、Kim-1和NGAL均呈正向混合效应,其中以汞的权重最大。

miR-146a基因rs2910164 G/C多态性与miR-146a异常表达与胃癌风险相关性的研究

目的探讨miR-146a基因单核苷酸多态位点rs2910164 G/C是否影响miR-146a的表达并改变其对胃癌的易感性。方法选取53例胃癌患者和6株胃癌细胞株(AGS、BGC-823、HGC27、MKN-28、MKN-45和SGC-7901),采用Taqman定量PCR检测miR-146a的表达,构建miR-146a过表达细胞模型,探究miR-146a过表达对胃癌细胞AGS生长的影响,然后对417例胃癌患者和420名无癌对照者进行病例对照研究,检测miR-146a基因rs2910164位点的等位基因和基因型频率,基因分型采用Taqman等位基因判别法;用Taqman对65例已知基因型胃癌患者的成熟和pri-miR-146a转录本进行定量分析。结果miR-146a在53例胃癌和6种胃癌细胞系中表达下调,miR-146a的过表达通过抑制AGS细胞G1/S期转变抑制胃癌细胞生长;病例对照研究结果显示,与GG基因型受试者相比,携带GC/CC基因型的受试者患胃癌的风险显著降低;与GG基因型相比,GC/CC基因型miR-146a G/C SNP显著提高成熟miR-146a水平。结论miR-146a的下调在胃癌发生中发挥重要作用,miR-146a基因rs2910164多态位点可通过影响成熟miR-146a的加工过程而降低胃癌风险。

MiR-6129在BPDE致BEAS-2B细胞DNA损伤中的作用研究

目的探讨miR-6129在二氢二醇环氧苯并芘(BPDE)致BEAS-2B细胞DNA损伤中的作用。方法以人正常肺上皮细胞BEAS-2B作为对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测在不同剂量BPDE暴露下,BEAS-2B细胞中miR-6129的表达水平变化;采用CCK-8法分别检测过表达miR-6129和干扰miR-6129表达对BPDE暴露下细胞活性影响;通过单细胞凝胶电泳实验(彗星实验)分析miR-6129高表达和miR-6129低表达对BPDE致细胞DNA损伤的影响。结果不同剂量的BPDE染毒可诱导人正常肺上皮BEAS-2B细胞miR-6129表达水平的升高,且呈剂量—反应关系趋势(P<0.05);在BPDE染毒后,转染miR-6129 mimic的miR-6129高表达组细胞的存活率均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),同时彗星实验显示DNA损伤程度增加;而miR-6129低表达组细胞在BPDE染毒后细胞存活率明显增加(P<0.05),DNA损伤程度降低(P<0.05)。结论BPDE可能通过上调BEAS-2B细胞中miR-6129表达,导致细胞DNA损伤。

超保守长链非编码RNA uc.77在肺癌中的表达及其调控作用

目的探讨超保守长链非编码RNA uc.77(uc.77)在肺癌中的表达及其分子机制。方法肺癌组织及癌旁正常组织来自2014—2016年解放军南部战区总医院确诊肺癌并行手术的61例肺癌患者。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺癌细胞株中uc.77的相对表达水平,同时在61对肺癌组织及其癌旁正常组织中验证其表达趋势,分析uc.77的表达与肺癌患者临床病理特征的关系。转染uc.77 siRNA敲低uc.77的表达,采用细胞计数试剂盒8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化。将转染uc.77 siRNA的肺癌H1299细胞注射至BALB/c裸鼠构建荷瘤模型,观察uc.77对肿瘤生长的影响,对肿瘤组织进行HE染色和免疫组化检测,qRT-PCR和Western blot法检测p21 mRNA和蛋白表达水平。结果肺癌细胞系95-D、H1299、A549、H460、H446和16HBE-T中uc.77的表达水平高于正常支气管上皮样细胞16HBE(均P<0.05);61例肺癌组织中uc.77的表达水平高于旁正常组织(P<0.001)。肿瘤体积、有无淋巴结转移、TNM分期与uc.77的表达有关(均P<0.05)。转染uc.77 siRNA 48和72 h后,siRNA-1组H1299、95-D、16HBE-T细胞A值低于各自对照组和siRNA-NC组(均P<0.05)。转染uc.77 siRNA-1后,H1299 siRNA-1组细胞G0/G1期细胞比例[(71.86±3.46)%]高于H1299对照组[(47.62±5.48)%]和H1299 siRNA-NC组[(61.38±5.62)%,均P<0.05];H1299 siRNA-1组细胞S期细胞比例[(14.99±3.61)%]低于H1299对照组[(34.95±7.05)%]和H1299 siRNA-NC组[(23.75±5.87)%,均P<0.05]。H1299 siRNA-1组细胞凋亡率[(4.90±1.80)%]高于H1299对照组[(3.30±0.80)%]和H1299 siRNA-NC组[(2.80±1.20)%,均P<0.05]。H1299 siRNA-1组细胞克隆形成率[(19.20±2.00)%]低于对照组[(32.60±2.00)%]及siRNA-NC组[(34.40±1.00)%,均P<0.05]。H1299 siRNA-1组小鼠肿瘤体积低于H1299对照组和H1299 siRNA-NC组(均P<0.05),H1299 siRNA-1组小鼠肿瘤重量低于H1299-对照组和H1299 siRNA-NC组(均P<0.05)。Ki-67免疫组化结果显示,H1299对照组和H1299 siRNA-NC组肿瘤细胞增长标志物Ki-67呈阳性,而H1299 siRNA-1组呈弱阳性。qRT-PCR检测结果显示,H1299 siRNA-1组细胞中p21的mRNA表达水平(2.57±0.45)高于对照组(1.00±0.00,P=0.001)和H1299 siRNA-NC组(1.52±0.37,P=0.009)。Western blot结果表明,H1299 siRNA-1组细胞p21蛋白表达水平升高。结论超保守长链非编码RNA uc.77在肺癌细胞株和肺癌组织中均表达升高,敲低uc.77的表达可抑制肺癌细胞增殖和肿瘤生长,提示uc.77在肺癌中发挥促癌基因的作用,uc.77可能是肺癌的潜在治疗靶标。