PBL前期少学时医学信息检索辅导效果研究

尝试采用少学时的方式进行医学信息检索辅导,参与九江学院医学免疫学PBL教学。运用随机对照的方法对比研究,对学生进行测评,结果显示在医学专业课PBL教学前期对学生少学时集中讲解信息检索相关知识将有利于提高PBL教学效果。

Wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞的促分化作用

目的观察wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠成肌细胞向成熟肌细胞分化作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用含不同浓度胰岛素的DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法和Western blot法检测生肌素(myogenin)表达。用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂wortmannin和MEK特异性抑制剂U0126干预后,观察胰岛素对骨骼肌成肌细胞分化的影响。结果胰岛素能明显促进骨骼肌成肌细胞形成肌小管,诱导2 d开始有肌管形成并逐渐增多到7 d达到高峰;胰岛素促进骨骼肌成肌细胞的生肌素阳性细胞核和生肌素蛋白表达增多,而wortmannin和U0126能下调胰岛素的这种作用。结论 Wortmannin和U0126可阻断胰岛素促进骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化,使肌管生成减少,生肌素表达下调。

PBL教学方法应用于医学免疫学教学研究

为了探讨PBL种教学方法在医学免疫学课程教学效果,文中对2005～2007级临床医学本科生进行跟踪研究。采用教学测试及问卷调查的方法,研究学生在校期间PBL教学方法应用于医学免疫学的教学效果以及实习期间对PBL学习方法的后续应用效果。通过对三届本科生的连续性跟踪研究,可见随着PBL教学方式逐步完善,不仅对在校学生的教学效果有很大提高,同时能被学生灵活应用于自主学习中,值得推广。

论高校开发利用情报资源的协调模式

“开发利用情报资源的协调”是由高校图书馆和系资料室的属性及其情报职能所决定的。是新时期高校发展的需要。是利用有限经费有效开发和利用情报资源，最大限度地满足学校教学科研，所面临的新课题。

miRNA-140-5p在人骨髓间充质干细胞成脂分化中的表达及其靶基因的预测

目的筛选出人骨髓间充质干细胞(h MSCs)成脂分化中具有潜在价值的mi RNA及其靶基因,为人类成骨细胞与脂肪细胞分化平衡调控机制的深入研究提供有力实验依据。方法收集h MSCs成脂分化过程中的0、7、14、21 d的细胞样品,应用mi RNA芯片和转录组测序(m RNA-seq)技术,分析4个点细胞中mi RNA和m RNA的表达水平,并将mi RNA与m RNA的表达趋势进行关联分析,聚焦具有研究价值的mi RNA与m RNA相互调控关系,同时,采用Target Scan、Pic Tar和mi Randa等数据库进行靶基因的预测。结果发现mi R-140-5p在成脂分化中表达量呈逐渐下降的趋势,而白血病抑制因子受体(LIFR)表达量呈逐渐升高趋势,二者呈现负调控的对应关系。同时经3个靶基因数据库预测,LIFR为mi R-140-5p共有的靶基因。结论 mi RNA-140-5p可能与人骨髓间充质干细胞的成脂分化密切相关,且通过调控其靶基因LIFR的表达而参与成脂分化。

双氢青蒿素、甲硝唑及两药联合应用体外抗阴道毛滴虫效果的研究

目的观察双氢青蒿素(DHA)、甲硝唑及两药合用体外抗阴道毛滴虫的效果。方法用肝汤培养基37℃无菌培养阴道毛滴虫滋养体。每实验管含滴虫2.5×106个/ml。实验分4组:双氢青蒿素组,甲硝唑组,两药合用组,对照组。观察不同药物浓度,不同作用时间杀滴虫效果。用杀虫率评价两药合用的杀虫效果。结果两药联合应用有以下特点:(1)增效作用明显,两药配伍剂量合适时杀虫效果最佳;(2)杀虫时间缩短,双氢青蒿素1.0mg/ml+甲硝唑0.004mg/ml杀虫率为100%的时间比单用减少8h;(3)药物用量减少,同在8h,杀虫率近100%,双氢青蒿素单用最低药量为1mg/ml,甲硝唑单用最低药量为0.008mg/ml,两药合用最低药量为双氢青蒿素0.5mg/ml+甲硝唑0.004mg/ml。两药合用药量比单用各减少1倍。双氢青蒿素破坏虫膜,裂解死亡,甲硝唑主要作用于胞内结构,两药作用靶位不同是联合应用增效的基础。结论双氢青蒿素、甲硝唑杀虫机理各不相同,两药联合应用有明显增效作用。

论市场经济下的电力企业档案管理

从宏观的角度分析了在市场经济条件下 ,电力企业档案工作要生存和发展 ,就必须紧跟时代步伐 ,调整更新管理模式 ,增强自身的生机和活力 ,在提高服务质量上狠下功夫。建立适应市场经济的档案管理体制和管理队伍 ,是提高服务质量的基础和关键 ,促进电力企业的进步发展 。

双氢青蒿素对体外培养阴道毛滴虫作用的电镜观察

目的观察双氢青蒿素(DHA)对阴道毛滴虫超微结构的影响。方法在2.5×106个/ml滴虫培养液中加入双氢青蒿素1 mg/ml。37℃培养3和3.5 h,进行扫描电镜观察,培养2.5和4 h进行透射电镜观察。结果双氢青蒿素作用滴虫后,虫体细胞膜受损明显,表面皱褶加深、表膜凹陷,并出现裂隙。细胞核膜破损,细胞核和细胞质均出现裂隙。内质网呈囊状肿胀,氢化酶体受损、变形。细胞质从细胞膜破裂处溢出。细胞膜剥脱后细胞核、氢化酶体和盾等结构裸露。最后虫体变性、坏死。结论双氢青蒿素能破坏阴道毛滴虫膜系结构并导致虫体裂解死亡。

热休克诱导结直肠癌细胞外泌体的免疫效应

目的探讨热休克影响结直肠癌细胞外泌体诱导树突状细胞肿瘤相关蛋白因子的释放和细胞毒效应。方法临床经病理学确诊的结直肠管状腺癌细胞分离培养,43℃热休克1h,四步离心获得细胞上清外泌体。诱导树突状细胞刺激细胞毒反应。酶联免疫测定树突状细胞释放TNF-α、MIP-1α、RANTES,MTT法测定对结直肠癌细胞的杀伤作用。结果结直肠癌细胞热休克获得的外泌体刺激DC分泌TNF-α、MIP-1α、RANTES,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。热休克促进外泌体诱导的结直肠癌细胞杀伤活性,与未经热休克培养获得的外泌体诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05),与结直肠癌细胞裂解物诱导组比较差异具有统计学意义(P<0.01),未经热休克培养获得的外泌体诱导组与癌细胞裂解物诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05)。100μg/ml剂量诱导效应强于50μg/ml组。结论热休克培养可以通过促进效应细胞肿瘤相关蛋白因子释放,增强对结直肠癌细胞的杀伤活性,有剂量依赖性,为开拓高效无细胞疫苗来源提供了实验基础。

活化转录因子ATF1、ATF2对USP22基因启动子活性的调节

目的克隆人活化转录因子ATF1基因和ATF2基因蛋白编码序列,分别构建真核细胞表达载体,进而研究高表达ATF1和ATF2对泛素水解酶22(ubiquitin-specific processing enzyme 22,USP22)基因启动子转录活性的影响。方法 RT-PCR扩增ATF1基因和ATF2基因蛋白编码序列,分别与pVAX1真核表达载体连接;测序、酶切鉴定重组载体;Western Blot检测外源性ATF1和ATF2在靶细胞Hela细胞中的表达;pVAX1-ATF1、pVAX1-ATF2分别与含野生型USP22启动子的萤光素酶报告质粒或其CREB位点突变体质粒共转染,双萤光素酶报告系统检测萤光素酶活性的表达。结果重组质粒pVAX1-ATF1、pVAX1-ATF2构建成功,外源性ATF1、ATF2在Hela细胞内有效表达;转染pVAX-ATF1促进USP22启动子活性升高(83%±11%),转染pVAX-ATF2促进USP22启动子活性升高约(52%±8%);而突变CREB位点均可导致上升作用的消失。结论成功构建了ATF1、ATF2真核表达质粒,高表达外源性ATF1和ATF2均可通过CREB位点激活USP22启动子的转录活性。

全方位深层次档案信息网络化服务是新世纪档案管理的发展方向

根据信息网络化的发展趋势 ,提出新世纪档案现代化管理的发展方向 ,是档案信息网络化服务。并从全方位和深层次两个方面对此进行了论述。

IPO8基因启动子区rs35100176位点变异对基因表达的影响

目的:研究人importin 8(IPO8)基因启动子区rs35100176多态性位点CCT插入/缺失对基因表达的影响。方法:PCR扩增IPO8基因启动子区包含rs35100176多态位点的342 bp序列,通过测序获得了49例DNA样本的基因多态性分布。以CCT/CCT插入纯合子或-/-缺失纯合子DNA样本为模板,扩增含有不同插入/缺失序列的IPO8基因启动子片段,插入萤光素酶报告质粒pGL3-Basic,构建pGL3-3N Insertion和pGL3-3N Deletion重组表达载体。重组质粒经Fugene 6.0转染入细胞,采用双萤光素酶报告系统,检测携带不同多态性序列的重组质粒中报告基因的表达活性;real-time PCR检测各不同基因型细胞中IPO8 mRNA表达。结果:通过测序发现rs35100176多态位点存在CCT/CCT、CCT/-和-/-3种表型,其基因分布频率分别为18.37%、55.10%和26.53%。成功构建pGL3-3N Insertion和pGL3-3N Deletion重组表达载体。双萤光素酶报告基因活性检测结果显示,pGL3-3N Insertion启动下游报告基因表达的相对活性与pGL3-3N Deletion相比显著减弱,两者存在显著差异(P<0.05);real-time PCR结果显示,CCT纯合插入的HEK293细胞中IPO8 mRNA的表达显著低于CCT纯合缺失的Saos-2细胞。结论:IPO8基因启动子区rs35100176位点的CCT碱基插入变异能显著抑制启动子活性,从而影响IPO8基因的转录。

转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调节作用

目的研究转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调控作用。方法基于PCR技术,分别突变和剔除IPO8基因启动子片段P-732/+134上RUNX2结合位点(-497^-502 bp),改造后的启动子片段定向插入荧光素酶表达载体PGL-3 Basic。重组质粒分别转染Saos-2与He La细胞,检测报告基因荧光素酶活性。应用染色质免疫共沉淀(Ch IP)证实RUNX2与IPO8启动子在Saos-2细胞内结合。慢病毒介导RUNX2在Saos-2细胞的靶向沉默,定量PCR检测相应组别中IPO8 m RNA的表达。结果成功突变和剔除IPO8启动子上RUNX2结合位点,破坏RUNX2结合位点导致IPO8启动子活性在Saos-2细胞中显著下降(P<0.05)。转录因子RUNX2在Saos-2细胞与IPO8启动子有效结合,下调RUNX2的表达导致IPO8转录水平下降(P<0.05)。结论转录因子RUNX2正性调控IPO8基因的转录。

含猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因片段的重组腺病毒构建与鉴定

目的构建猪链球菌2型(SS2)溶菌酶释放蛋白(MRP)基因片段的重组腺病毒并对其进行鉴定。方法根据MRP的基因序列,设计合成1对引物,以SS2型基因组为模板,扩增MRP基因片段(467-1351)序列。将PCR产物通过pMD18-T载体克隆后,再连接至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-MRP,再经PmeⅠ酶切,然后转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞中,经同源重组获得重组腺病毒质粒pAdeno-CMV-MRP。PacⅠ酶切线性化该重组腺病毒质粒,再转染AD-293细胞进行病毒包装,最后对细胞包装的病毒液进行PCR和Western blot法鉴定。结果重组腺病毒质粒pAdeno-CMV-MRP转染AD-293细胞8 d后出现明显的细胞病变,在培养细胞的上清病毒液中也检测到了MRP基因片段及其表达的蛋白。结论成功构建了SS2型MRP基因片段的重组腺病毒(rAdeno-MRP)。

IPO8基因启动子的克隆及转录活性分析

目的:克隆IPO8基因5'端非编码序列,探讨其转录活性。方法:应用cDNA 5'末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,5'RACE)方法定位IPO8基因转录起始点;在此基础上针对其5'端非编码区包括转录起始点在内的–3302^+134区域分段进行PCR扩增,将产物克隆入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。经酶切鉴定后,将重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染人骨肉瘤细胞Saos-2,用双荧光素酶活性检测以确定其转录活性。结果:成功确定IPO8基因转录起始位点,酶切结果证实IPO8基因5'端非编码区6条续减片段正确插入到荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic。重组质粒转染Saos-2细胞后检测到荧光素酶的高表达(P<0.05)。结论:成功构建具有转录活性的IPO8启动子片段,为进一步研究IPO8表达调控机制奠定了基础。

对医学类“专升本”学历教育的几点思考

成人继续教育中的“专升本”教育是我国医学教育的重要组成部分，是提高在职医务工作者业务素质和枝术水平的重要途径。意在通过因人施教、整合课程、沟通教学等教学手段。

猪链球菌2型MRP和EF双基因共表达重组腺病毒载体的构建

旨在构建猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外因子(EF)双基因共表达重组腺病毒载体。根据猪链球菌2型MRP和EF的基因序列设计合成2对引物,以猪链球菌2型基因组为模板,扩增MRP基因(第1 801-2 513位)和EF基因(第1 783-2 563位)序列,并克隆到pMD18-T载体。然后将MRP基因、IRES元件和EF基因依次定向克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-MRP-IRES-EF,再经PmeⅠ酶切,然后转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞中,经同源重组获得重组腺病毒载体质粒rAdeno-CMV-MRP-IRES-EF。PacⅠ酶切线性化该重组腺病毒载体质粒,再转染AD-293细胞进行病毒包装,最后对细胞包装的病毒液进行PCR鉴定。结果表明,克隆的MRP和EF基因测序正确,酶切重组穿梭质粒和腺病毒载体质粒得到特异酶切产物;线性化的重组腺病毒载体质粒rAdeno-CMV-MRP-IRES-EF转染AD-293细胞6 d后也出现明显的细胞病变(CPE),在培养细胞的上清病毒液中也检测到了MRP和EF基因片段。