PTEN-Long在胃癌细胞中的表达及其过表达对PI3K/AKT信号通路及细胞生长和凋亡的影响

目的探讨PTEN-Long在胃癌细胞中的表达及其对胃癌细胞(SGC-7901)增殖、凋亡的影响。方法RT-qPCR与Western免疫印迹检测胃癌细胞中PTEN-Long mRNA及蛋白表达水平,选择最佳干预细胞系,将携带PTEN-Long基因的重组慢病毒载体转染SGC-7901细胞(PTEN-Long组),转染空载慢病毒作为NC组,未转染细胞作为Control组,检测转染效率;MTT法与Edu染色检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期与细胞凋亡;Western免疫印迹检测P27、cyclin D1及PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果PTEN-Long mRNA及蛋白在胃癌细胞表达水平显著降低(P<0.05),在SGC-7901细胞中表达水平最低,选择SGC-7901细胞进行后续实验;RT-qPCR与Western免疫印迹证实慢病毒转染成功;与Control组和NC组相比,PTEN-Long组细胞增殖活性显著降低,G_(0)/G_(1)期的细胞比例显著升高,G_(2)/M、S期细胞比例显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高,P27蛋白表达水平显著升高,p-PI3K、p-AKT、Cyclin D1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论PTEN-Long在胃癌中下调表达,过表达PTEN-Long可通过抑制PI3K/AKT信号通路激活抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

生长抑素联合双氯芬酸钠对胆总管结石ERCP术后胰腺炎的预防作用

目的观察生长抑素联合双氯芬酸钠对胆总管结石内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)术后高淀粉酶血症及胰腺炎的预防作用。方法行胆总管结石ERCP取石患者80例,随机分为实验组和对照组各40例。两组术前均给予镇静、麻醉等常规药物;实验组术前30 min给予双氯芬酸钠50 mg塞肛,生长抑素0.25 mg/h持续泵入,维持24 h。所有患者ERCP术前3 h及术后3、12、24 h检测血清淀粉酶水平,并观察有无急性胰腺炎的临床表现。结果实验组ERCP术后3、12、24 h血清淀粉酶分别为(195.6±101.4)、(353.3±128.5)、(260.6±85.7)U/L,对照组分别为(323.7±180.7)、(495.5±181.1)、(386.9±119.8)U/L,P均<0.05。实验组ERCP术后高淀粉酶血症、术后胰腺炎发生率(40%、2.5%)低于对照组(72.5%、15%),P均<0.05。结论生长抑素联合双氯芬酸钠可以有效预防ERCP术后高血清淀粉酶血症及术后胰腺炎的发生。

沉默P-REX2a对胃癌细胞SGC7901增殖、阿霉素敏感性的影响及其机制

目的观察沉默P-REX2a对胃癌细胞SGC7901增殖、阿霉素敏感性的影响,并探讨其机制。方法将胃癌细胞SGC7901分为正常培养组(NM组)、阴性对照组(NC组)、干扰组(siRNA组)。NM组正常培养,NC组细胞转染阴性对照序列,siRNA组转染P-REX2a siRNA,转染24 h时采用实时荧光定量PCR法检测各组P-REX2a mRNA,转染24、48、72 h时用MTT法观察各组细胞增殖情况(以OD570表示)。另取胃癌细胞SGC7901同法分组并转染48 h后加入0.3μmol/L阿霉素培养24 h,用流式细胞术测算各组细胞凋亡率,用Western blotting法检测各组Bcl-2、Bax、PTEN、Akt、p-Akt蛋白,用基于PIP3底物的定磷比色法测定PTEN磷酸酶活性。结果 siRNA组P-REX2a mRNA低于NC组、NM组(P均<0.05),转染24、48、72 h时OD570高于NC组、NM组(P均<0.05),加入阿霉素培养后细胞凋亡率高于NC组、NM组(P均<0.05),Bax蛋白表达量、PTEN磷酸酶活性高于NC组、NM组(P均<0.05),Bcl-2、p-Akt蛋白表达量低于NC组、NM组(P均<0.05)。三组PETN、Akt蛋白表达量相比P均>0.05。结论沉默P-REX2a可以抑制胃癌细胞SGC7901增殖,提高胃癌细胞SGC7901对阿霉素的敏感性。这可能是由于沉默P-REX2a可以提高PTEN磷酸酶活性、抑制PI3K/Akt通路活化、抑制Bcl-2表达。

胃癌中PTEN/PI3K信号通路蛋白水平的调节

有关磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)/磷脂酰激醇3-激酶(PI3K)信号通路在胃癌中的研究不断深入,人第10号染色体缺失的PTEN主要通过抑制PI3K及其下游信号通路阻碍胃癌的发生、发展。其中蛋白水平的调节主要包括PTEN的翻译后修饰及多种结合蛋白的作用,各种调节方式间又相互促进或抑制,在胃癌发生、发展中扮演重要角色。伴随肿瘤化疗药物应用而来的是肿瘤耐药,研究表明,PI3K信号通路与胃癌化疗耐药相关,PTEN/PI3K调节机制的研究将进一步丰富胃癌化疗耐药理论基础,为临床合理用药及新化疗方案的开发提供指导。