载脂蛋白E基因与阿尔茨海默病的遗传相关性研究

目的 :研究乌鲁木齐地区人群中载脂蛋白E(ApoE)基因型与阿尔茨海默病 (AD)的遗传相关性。方法 :采用PCR -RFLP方法检测ApoE各等位基因和基因型。结果 :5 1例散发性AD的ApoEε2、ε3和ε4等位基因频率分别为 7.8% (8)、71 .6 % (73)和2 0 .6 % (2 1 ) ,而 5 2例正常对照为 1 6 .4 % (1 7)、79.8% (83)和 3.9% (4 )。AD组ε4频率明显高于对照组 (χ2 =1 3.5 4 ,P <0 .0 1 )。结论 :ApoEε4是AD的易感基因和发病危险因素 ,其频率在不同人群中存在差异。

小鼠神经细胞cdc2类蛋白激酶调节亚基p35^(Nck5a)基因的克隆和鉴定

目的： 获取小鼠神经细胞ｃｄｃ２ 类激酶（Ｎｃｌｋ）调节亚基ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ，用于构建基因重复性打靶载体。方法： 用噬斑原位杂交法从λＰＳ基因文库中克隆小鼠ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因；用限制性内切酶酶切图谱分析和序列测定进行基因组结构分析。结果： 获得较完整的ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ酶切图谱；该基因由一个外显子组成，长９２４ ｂｐ，编码３０７ 个氨基酸的蛋白质，内含子长２０８ ｂｐ，位于５′端侧翼序列中。测定的序列（－ １ ０８０ 至＋ ９２４ ｂｐ 和＋ ３ ７２１至＋ ４ ２２２ ｂｐ）与已报道的序列基本一致，仅在－ １３５和－ ２９５位各插入一个碱基Ｇ。结论： 得到的ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因组ＤＮＡ 片段长约１１ ｋｂ， 其５′端侧翼序列含有一些已知的调控序列，３′端含有ｐｏｌｙ Ａ 的信号序列。

p35^(Nck5a)基因重复性打靶载体的构建和ES细胞基因打靶研究

为了在小鼠胚胎于细胞（ＥＳ）中引起神经细胞ｃｄｃ２类激酶调节亚基ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因的定点 重复，采用常规的分子克隆技术，构建得到长约１２．２ｋｂ的基因重复性打靶载体ｐＧＤＴＶ。用电 穿孔法将线性化的ｐＧＤＴＶ载体转入ＥＳ细胞，经过Ｇ４１８和ＧＡＮＣ分组药物选择，获得２４５个 双药物抗性的细胞克隆，细胞存活率为６．２２ × １０－５。经ＰＣＲ和基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定，２个 ＥＳ细胞克隆发生了ｐ３５Ｎｃｋ５ａ基因的重复，同源重组率为５．０８×１０－７、负向选择系统的应用使 同源重组事件的富集效率提高了７倍。为建立Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的转基因小鼠模型打下了基础。

新疆1例汉族家系β地中海贫血IVS-Ⅱ-654(C→T)的基因分析

应用聚合酶链反应结合等位基因特异的寡核苷酸探针斑点杂交技术(PCR/ASO),对新疆首例β地小海贫血(β地贫)家系进行基因分析,从12名家系成员中检出7例β地贫基因突变(IVS-Ⅱ-654,CT)的杂合子。结合家系调查、临床症状及血液学检查结果,证实先证者的致病基因来源于父方。

载脂蛋白E基因多态性和帕金森病的相关性

背景与目的:探讨乌鲁木齐地区人群中载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的相关性。材料与方法:用PCR-RFLP方法检测51例散发性PD和52例正常对照的ApoE基因型。根据有无痴呆将所有PD患者分为二组,即PDD组和PI)组。用X2检验进行关联分析。结果:PD+PDD组、PD组和PDD组与对照组间的ApoE基因型频率差异无显著性(P>0.05)。PD组ApoE等位基因频率与对照组相近。PD+PDD组和PDD组的ε2和ε3频率类似于对照组,但是,ε4频率(分别为12.8％和16.7％)明显高于正常对照组(3.9％),组间比较差异有显著性(P<0.05)。结论:ApoEε4等位基因对PD的发生无明显影响,但是,它是伴有PD的痴呆患者的发病危险因素。

新疆一例汉族家系β地中海贫血IVS-Ⅱ-654(C→T)的基因分析

应用聚合酶链反应结合等位基因特异的寡核苷酸探针斑点杂交技术(PCR/ASO),对新疆首例β地中海贫血(β地贫)家系进行基因分析,从12名家系成员中检出7例β地贫基因突变(IVS-(?)-654,C→T)的杂合子。结合家系调查、临床症状及血液学检查结果,证实先证者的致病基因来源于父方。该研究对了解新疆地区β地贫基因突变类型和频率,以及开展产前诊断具有重要意义。

32例β地中海贫血的血液学分析及其临床意义

３２例β地中海贫血的血液学分析及其临床意义兰州军区乌鲁木齐总医院周常文，李厚钧，余伍忠，陈荣耀，路西春β地中海贫血（β地贫）是一种小细胞低色素的遗传性贫血。１９９３年５～８月在我院门诊和住院的贫血病人中做了一次β地贫的调查，应用血液学指数和部分生化指...

布依族中发现一种新的β-地中海贫血[-28(A→G)·CD17(A→T)/N]双重突变杂合体

β地中海贫血(β地贫)是β珠蛋白基因突变引起的遗传性溶血性贫血.我们在对新疆昌吉市少数民族进行β地贫群体调查时检出一布依族家系,遂应用聚合酶链反应(PCR)结合等位基因特异的寡核苷酸(ASO)探针杂交技术进行基因分析,现将结果报告如下。先证者:男,20岁。呈轻度贫血貌,体弱、乏力,时常头晕、胸闷、巩膜轻黄染、肝、脾未触及。其父症状与之类似,但尤感心悸不适,体弱多病。其母和兄长无临床症状.家系调查见附图:

用增强化学发光法检测β-地中海贫血的基因突变

使用生物素-14-dATP于3＇末端标记等位基因特异性寡核苷酸(ASO)探针,结合增强化学发光法(ECL)检测β-地中海贫血的基因突变。经过对已知突变类型的15例β-地贫杂合子,1例双重突变杂合子DNA的检测,证明本法具有良好的敏感性和特异性,能准确区分上述样品的4种基因型,与放射性同位素^(32)p标记ASO探针的分析结果相一致。将本法应用于15例临床新病例的基因分析,其中鉴定出4例为CDs41-42(-TCTT)突变,7例为IVS-Ⅰ-654(C→T)突变。本法操作简便,结果可靠,不依赖同位素,适用于临床实验室开展β-地贫的基因诊断和大样本人群的基因调查。

新疆一例汉族家系β地中海贫血ⅣS-Ⅱ-654(C→T)的基因分析

本文报道应用聚合酶链反应(PCR)结合等位基因特异的寡核苷酸(ASO)探针斑点杂交技术,对新疆首例p地中海贫血(p地贫)家系进行基因分析,从12名家系成员中检测出7例p地贫基因突变(ⅣS-Ⅱ-654,C→T)的杂合子。结合家系调查、临床表现及血液学检查结果,证明先证者的致病基因来源于父方。该研究对了解新疆地区p地贫基因突变类型和频率以及开展产前诊断具有重要意义。

中国“丝绸之路”地区血红蛋白病的遗传流行病学特点

对“丝绸之路”沿线陕、甘、新等省区的 2 2万余人进行了血红蛋白病调查 ,应用蛋白质一级结构分析技术 ,从 2 71例异常血红蛋白先证者中 ,发现变异体 2 4种 ,以HbDPunjab、HbGTaiPei、HbGCoushatta频率较高 ,呈梯度分布 ,其中HbJTashikuergan和HbTianshui为世界新种异常血红蛋白。采用基因鉴定技术 ,于 85例 β地中海贫血携带者中 ,确定基因突变类型 12种 ,以CD1 7(A→T)频率最高 ,其中 [- 2 8(A→G) .CD1 7(A→T) /N]双重突变杂合子 ,为同一染色体上的双重基因突变 ,极为罕见 ,CD8(-AA)、CDs 8/9(+G)为在中国人中首次发现。根据“丝绸之路”地区异常血红蛋白和地中海贫血的类型特点、地理及民族分布规律 ,本文认为①我国西北部民族主要由中亚高加索人 ,黄河流域汉族人和蒙古高原的古代游牧民族组成。②β地贫CD1 7突变基因可能起源于甘肃的陇原大地 ,随华人迁徙传入东南亚各地。③该地遗传背景复杂 ,突变基因具有高度的异质性 ,存在显著的遗传流行病学特点。

乌鲁木齐市老年人群中载脂蛋白E基因与Alzheimer病的相关分析

目的 分析乌鲁木齐市老年人群中载脂蛋白E(ApoE)基因与Alzheimer病 (AD)的相关性。方法应用聚合酶链式反应扩增技术及限制性片段长度多态性技术对乌鲁木齐市 6 0例散发性AD患者和 90例对照者的ApoE基因进行分型 ,分别计算两组ApoE各等位基因、基因型的频率。结果 (1)AD患者组中ApoEε2、ApoEε3、ApoEε4等位基因出现的频率分别为 6 6 7%、75 83%、17 5 0 % ,而对照组分别为 13 33%、79 4 5 %、7 2 2 % ;其中 ,ApoEε4等位基因在AD组中出现的频率明显高于对照组 (P <0 0 5 ) ,ApoEε2等位基因却低于对照组 (P <0 0 5 ) ;(2 )ApoEε4等位基因在不同性别、年龄、受教育程度中的分布差异具有显著性 (P <0 0 1,P <0 0 1,P <0 0 0 1)。结论 (1)ApoEε4等位基因与中国乌鲁木齐散发性AD有明显相关性 ,其基因型以ε3/ε4为主 ;(2 )ApoEε2等位基因在AD发生时可能具有一定保护作用 ;(3)评价AD发病风险时 ,性别、年龄、受教育程度的因素不容忽视。女性、75岁以下、低教育程度。

应用二次 PCR 技术提高体外基因扩增的效率

自从1985年 Kary Mullis 等创立 PCR 技术以来。作为一种基因研究的新方法已经在许多领域内得到广泛应用。PCR 方法简便、快速、灵敏、特异,但实验易受诸多因素的影响,可以造成非特异性扩增产物或扩增产物的产量不足等现象,使实验达不到预期的结果。为此,我们建立了 PCR 二次扩增方法,弥补了第一次扩增时出现的缺陷,提高了扩增效率。

应用PCR技术检测HBsAg携带者血清中HBV DNA

应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增38例 HBsAg 携带者和58例正常人血清中的HBV DNA 特异性片段,通过与 HBsAg 滴度及 HBV 血清标志物进行对比分析发现 HBV DNA 阳性率与 HBsAg 滴度呈正相关(r=0.981,p<0.005),与 HBeAg 减低,抗-HBe 产生以及其后的 e系统消失过程呈相应递减趋势。并且在单项抗-HBs 阳性的血清中,HBVDNA 检出率可达10%。

陕、甘、新地区β地中海贫血的突变基因分析

分析了丝绸之路沿线陕、甘、新三省区８５例β地中海贫血（β地贫）患者的基因突变。检出率最高的前４种突变为ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）、ＩＶＳ－Ⅱ－６５４（Ｃ→Ｔ）、－２８位（Ａ→Ｇ）和ＣＤｓ４１／４２（－ＴＴＣＴ），占总检出率的７８．７％，是该地区主要的β地贫突变类型。此外还检出了ＣＤ８（－ＡＡ）、〔－２８（Ａ→Ｇ）ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）／Ｎ〕、ＣＤｓ８／９（＋Ｇ）、ＣＤｓ２７／２８（＋Ｃ）等共１２种β地贫的基因突变型。其中〔－２８（Ａ→Ｇ）ＣＤ１７（Ａ→Ｔ）／Ｎ〕为同一染色体上的双重基因突变，未见文献报道；ＣＤ８（－ＡＡ）和ＣＤｓ８／９（＋Ｇ）为在中国人中首次发现；ＣＤｓ２７／２８（＋Ｃ）在我国也甚为罕见。研究表明，丝绸之路地区β地贫的类型及频率既与我国其他地区乃至东南亚各国不完全相同，又与邻近的中亚各地有一定差异。

新疆11例β地中海贫血CDs41/42(-TTCT)的基因分析

应用ＰＣＲ／ＡＳＯ技术对新疆的１１例β地中海贫血（地贫）进行基因分析。现已鉴定为ＣＤｓ４１／４２（－ＴＴＣＴ）基因突变，其中汉族８例维吾尔族２例，瑶族１例，均为杂合体。维吾尔族中的这种突变型系首次报道。这些先证者都有地贫症状，伴有程度不同的贫血和ＨｂＡ２增高（３．３９％～６．６７％），分散在新疆的广大地区。本文为了解这种突变类型在我国的分布情况提供了新的资料。