响应面法优化超声辅助提取烟叶废渣蛋白工艺条件

烟叶废渣提取蛋白是其综合利用途径之一,超声辅助碱提有助于获得更多的烟叶废渣蛋白。在单因素试验基础上,采用响应面法优化烟叶废渣超声辅助提取蛋白工艺。结果表明:当缓冲液pH为10、缓冲液体积为32.77 mL、超声温度为70.9℃、超声时间为46.1 min时,烟叶废渣的蛋白提取量达(19.13±0.21)mg·g^(-1),相比优化前提高了140.6%,该工艺能为再造烟叶脱蛋白提供技术参考。

红曲中红曲菌的鉴定及优质菌的筛选

红曲由红曲菌发酵而得,为提高红曲质量,需对红曲菌进行分离鉴定并筛选优质菌株,而当前红曲菌的鉴定方法和优质菌的筛选方法仍有不足。为此,本文在构建红曲菌菌株库的基础上,对比形态学鉴定和分子生物学鉴定对红曲菌物种鉴定的异同,通过相关性分析提出合理鉴定方案,同时对不同形态学分型的菌株测定色素和桔霉素产量,结合产量换算方法筛选出优质红曲菌。结果:单个红曲中可能存在多株形态不同的红曲菌,以44个红曲样本为菌源构建了45个不同形态学分型,共计148株红曲菌的菌株库。形态学分析表明多数红曲菌与紫色红曲菌、橙色红曲菌及丛毛红曲菌形态相似,而ITS rDNA测序和18S rDNA测序易将未知红曲菌匹配至紫色红曲菌、丛毛红曲菌和红色红曲菌。相关性分析表明ITS rDNA测序相比于18S rDNA测序更接近于形态学分析结果。由于ITS rDNA测序的基因对比库中可参照菌株的种类与数量较多,在多种鉴定方法存在结果差异时,建议优选ITS rDNA测序结果。最后同时参考色素产量、桔霉素产量、桔霉素产量与色素产量之比值3个指标筛选出高产色素(83.3 U/mL)和低产桔霉素(81.5 ng/mL)的菌株红曲菌MZT27,以黄色素与总色素的比值筛选出高产黄色素的菌株红曲菌MZT39(黄色素占比70.06%)。本文旨在为红曲霉种质资源的挖掘和红曲质量的提升提供借鉴。

桔霉素分子印迹预组装体系的量子化学模拟及吸附性能研究

为解决桔霉素分子印迹聚合物在构建和应用过程中模板分子泄露和功能单体筛选工作量大的问题,以1-羟基-2-萘甲酸为假模板分子,基于液相色谱法构建桔霉素和1-羟基-2-萘甲酸的同时检测方法,该方法对分子印迹洗脱液中的两种目标物具有良好的回收率(≥95%),也能对功能红曲醇提液中桔霉素进行分离。运用量子化学方法,通过分子构型优化、原子电荷分布计算和结合能计算优选了构建分子印迹聚合物的功能单体2,6-二氨基吡啶。以响应面对其制备工艺进行优化,优化后的聚合物对桔霉素的吸附载量为(195.10±13.21)ng/g,相比优化前提高了0.79倍。以甲基丙烯酸为功能单体构建的桔霉素分子印迹聚合物为对照,对比了优化后的聚合物和对照聚合物的吸附性能,前者对桔霉素的吸附载量为后者的3倍,证实计算机模拟技术在桔霉素分子印迹聚合物构建中的实用性,旨在为分子印迹聚合物的构建和桔霉素富集与检测提供参考。

红曲色素组分分析与功效评估研究进展

介绍了红曲色素的提取与分离纯化方法;总结了红曲色素结构及性质表征的常用手段;从体外实验和动物实验两方面归纳了红曲色素功效评估的研究概况;分析了当前红曲色素在组分分析与功效评估方面的发展趋势。

红曲黄酒酿造过程中红曲霉生长抑制因素初探

红曲霉对红曲黄酒的色、香、味及其功能性组分至关重要。然而,红曲霉在酿酒过程中被抑制,其抑制机理并未明确。本研究采用PCR-DGGE与qPCR技术相结合的方法,对平湖红曲黄酒传统酿造过程中的优势真菌菌群动态进行定性、定量分析,并根据红曲霉的菌量变化推测可能原因,同时构造相应的体系进行验证,寻找影响红曲霉生长的关键因子。结果表明:传统酿造过程中,红曲霉和酿酒酵母是优势菌,且随着酿造时间的延长,红曲霉的菌量逐渐降低;验证体系表明溶氧量的暂时减少、红曲米的物理束缚和红曲浸泡液中的物质并不会显著抑制红曲霉的生长,而酒精度的增加是影响红曲霉生长的关键因素;传统酿造过程进一步验证酒精度的变化与红曲霉生长的关系,发酵初期的酒精度(0~4%,体积分数)对红曲霉无影响,而随着酒精度的增加,红曲霉的生长逐渐受到抑制,至发酵后期的酒精度(17%,体积分数)对红曲霉的抑制作用明显。

红曲霉分离纯化、分类和鉴定研究进展

红曲霉是一类小型丝状腐生真菌,其代谢产物在食品、药品领域应用广泛。为更好地挖掘红曲霉种质资源,需要大量获得红曲霉菌株并对其进行分类和鉴定。该文介绍了可培养的红曲霉分离纯化方法,并分析其优缺点和应用示例;列举了目前红曲霉的分类概况,从形态分类、美国国家生物技术信息中心(NCBI)物种分类和国际公开报道提及之分类这三个方面来对比分析其认可度;简述了形态学鉴定、同工酶分析、脱氧核糖核酸(DNA)标记技术三种常见的红曲霉鉴定方法;提出了潜在的分离纯化和分类鉴定方法。旨在为高效获得红曲霉、明确菌种信息等工作提供参考。

福建红曲黄酒产业的发展现状及对策分析

福建红曲黄酒在中国古酒中独树一帜,具有活血化瘀、健脾燥胃等功效。尽管红曲黄酒的产量及产值逐年攀升,但市场占有率持续低迷,红曲黄酒产业亟待升级转型。该文基于当前福建红曲黄酒的产销现状,以生产力和生产关系、政府和市场四个角度分析红曲黄酒产业的发展方向,为推动产业优化升级及带动产业经济发展献计献策。

制酒废弃物的来源、成分分析及综合利用途径

制酒厂在生产各种酿制酒的同时也会生成废渣和废水,废水排放后又产生污泥。制酒废弃物的年排放量巨大,中国每年的制酒废渣排放量达上百万吨,制酒废水排放量达上亿吨。排放的废弃物都有高营养、低毒性的特点,可对其进行综合利用。本文阐述中国白酒、黄酒、葡萄酒、啤酒的废弃物的来源并预估排放量,再以成分分析为基础,根据废弃物的特点提出综合利用方案,旨在为制酒废弃物的回收利用提供参考。

凝胶珠固定化细胞发酵研究进展

固定化细胞技术具有保护细胞免受损伤、实现细胞重复利用等优点,其中凝胶珠固定化技术因其生物相容性好、制备简单、成本低廉而备受关注。该文介绍了凝胶珠固定化发酵技术即用凝胶将生物催化载体包裹后进行催化发酵的技术,分析了固定化技术中聚电解质成膜和自凝聚成膜的制备原理和方法,从固定化动植物细胞和微生物细胞的角度列举了该技术目前的应用状况,根据技术本身的瓶颈,提出改善物质传递效率、改良固定化方式、探索提取和检测囊内物质检测方法三个发展方向,为凝胶珠固定化细胞技术的研究和应用提供借鉴。

C57BL/6J小鼠黑色素瘤肺转移模型的构建

目的探讨建立C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式、细胞接种数量和成瘤周期。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10。1)取6~8周龄,雄性小鼠18只,随机分三组,每组6只,分别采取尾静脉注射、腹腔注射和皮下注射方式,每只小鼠注射100μL(3×10~6个细胞)B16F10细胞悬液,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;2)分3组,同上,经尾静脉分别注射3×10~6个细胞、1×10~6个细胞、3×10~5个细胞,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;3)分3组,同上,尾静脉注射1×10~6个细胞,分别于1周、2周、3周解剖小鼠,观察黑色素瘤的生长和转移情况。结果 1)尾静脉注射小鼠黑色素瘤细胞,小鼠发生肺转移的成功率为100%,而腹腔注射和皮下注射未发生肺转移。2)接种小鼠黑色素瘤细胞数量为1×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量适中;接种细胞数量为3×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量过多;接种细胞数量为3×10~5时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量较少。3)尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,饲养2周后,可以观察到黑色素瘤细胞明显的肺部转移,且不会导致小鼠死亡;饲养3周,黑色素瘤细胞肺部转移数量过多,且小鼠死亡过半;饲养1周,黑色素瘤细胞肺部转移数量较少。结论经尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,生长2周时间,为构建C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的推荐方法。

福建红曲产业的发展现状与对策

红曲在我国应用历史悠久,分布广泛,其中又以福建红曲最为著名。但目前福建红曲产业面临生产技术水平不高、产品研发创新不足等等问题,导致产业发展受阻。该文分析了福建省红曲产业发展的现状、发展潜力及所面临的问题,并从企业应对策略、政府引导扶持、产学研合作交流三方面提出对策,助力福建红曲产业的传承与发展。

蛋白激酶A活化对血小板聚集功能的影响

目的:研究蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)对体外血小板聚集功能的影响。方法:收集健康成年人外周血并获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用瑞斯托霉素(Ristocetin),凝血酶(Thrombin),胶原(Collagen),二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集,利用血小板聚集仪检测血小板聚集情况。结果:与对照组相比较,5μmol/L的Forskolin可显著抑制ADP和Collagen诱导的血小板聚集(P<0.001);对Thrombin诱导的血小板聚集也具有一定抑制作用(P<0.05)。而2.5-10μmol/L的Forskolin对Ristocetin诱导的血小板聚集无明显抑制作用(P>0.05);对ADP和Collagen诱导的血小板聚集也具有显著抑制作用(P<0.001)。结论:蛋白激酶A活化能抑制血小板的聚集功能。

小鼠尾静脉与内眦静脉丛回输血小板方法的比较

目的比较小鼠尾静脉与内眦静脉丛回输血小板的操作难度及回输效果。方法体外分离血小板(10×108/m L),分别采用尾静脉和内眦静脉丛注射法将等量的calcein标记的血小板回输到8周C57 BL/6小鼠体内,比较两种方法的操作时间和成功率;对注射血小板的小鼠立即从眼眶采血,通过流式细胞仪和荧光显微镜检测回输到小鼠体内的血小板数;对采用两种不同方法成功回输等量血小板的小鼠24 h采血一次,通过流式细胞仪和荧光显微镜检测回输到小鼠体内的血小板的生存周期。结果经尾静脉和内眦静脉丛回输等量血小板:(1)平均用时分别为94 s和45.3s,成功率分别为40%和100%(P<0.05);(2)在0 h,被标记的血小板数占总血小板数的百分比分别为12.38%和12.35%,两组间差异无统计学意义(P>0.05);(3)在48 h、96 h,回输进体内的血小板分别下降44%、64%和88%、89%,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论两种注射法回输到小鼠体内的血小板数没有差异,且不影响血小板的生存周期。小鼠眼内眦静脉丛回输血小板,操作更简单,成功率更高。

养蚕活动的开展有效培养了学生的科学素养

2003年春季．深圳市卓雅小学在有关科技部门的支持下，将“养蚕”这一容易参与、老少咸宜的科技活动资源引入校园科普教育活动，搭建起“学校科学养蚕”的教育平台．探索出“兴趣引导——搭建平台——全员参与——全程指导——全面关注——学科整合——家校互动”的科学教育经验．为学校“一体两翼三美”教育理念的落实奠定了基础。

古田红曲中优势真菌菌群及其成曲特性分析

选取3种典型古田红曲(Q01、Q02和Q03)作为研究对象,并以乌衣红曲(Q04)作对比,研究古田红曲的优势真菌菌群特征及其成曲特性。采用传统分离纯化、PCR-DGGE及q PCR技术研究酒曲中的真菌菌群结构及数量,并对3种红曲的糖化力、色价及挥发性风味物质进行检测,结果表明:3种古田红曲的真菌菌群结构相似,以红曲霉为主,其它杂菌少;红曲霉数量较高,分别为5.71 lg(CFU/g)、5.10 lg(CFU/g)及5.53 lg(CFU/g),远高于乌衣红曲。而对其成曲特性的研究发现古田红曲在糖化力、色价、色调、挥发性风味物质含量等几个方面均优于乌衣红曲。

青蒿琥酯抑制白血病耐药细胞株K562/ADM转铁蛋白受体表达

目的:观察青蒿琥酯对于白血病多药耐药细胞细胞株K562/ADM转铁蛋白受体表达的影响。方法:将K562/ADM(耐阿霉素)细胞分别经浓度为12.5、25、50μg/m L的青蒿琥酯处理48 h,同时25μg/m L实验组在12 h、24 h、36 h分别收集足量细胞。采用流式细胞术检测青蒿琥酯对细胞转铁蛋白受体(Tf R)密度的调控作用,Western blot检测青蒿琥酯对细胞Tf R蛋白表达的调控作用。CCK-8法分析青蒿琥酯对K562/ADM细胞生长增殖的影响。结果:K562/ADM细胞Tf R密度和Tf R蛋白表达水平分别经12.5、25、50μg/m L青蒿琥酯处理后均下降,呈浓度依赖性。25μg/m L青蒿琥酯处理K562/ADM细胞不同时间段后转铁蛋白受体蛋白表达水平随着Art作用时间延长而逐渐降低,表明呈时间依赖性。K562/ADM细胞经青蒿琥酯处理后其耐药性减弱:与对照组相比,12.5、25、50μg/m L实验组细胞耐药逆转倍数分别为1.38、2.12和2.95倍,从而抑制K562/ADM细胞增殖。IC50值为19.7μmol/L。结论:青蒿琥酯能降低细胞Tf R密度和下调Tf R蛋白的表达,逆转K562/ADM细胞的耐药性,从而起到抗肿瘤作用。

葛根淀粉为基质液态发酵生产红曲色素的培养基成分优化

葛根淀粉除含淀粉外,还含有丰富的矿物质和黄酮类物质,具有良好的保健功能。红曲色素是红曲霉的次级代谢产物,具有诸多生理活性。若以葛根淀粉为基质发酵生产红曲色素,可将两者的保健功效有机结合。本文探索以葛根淀粉为基质,复配不同碳源、氮源、金属离子,采用红曲霉菌株FZU-MP1501进行液态发酵生产红曲色素。结果显示:以葛根淀粉或籼米粉为基质,两者的红曲色素产量无显著差异。单因素试验表明,以葛根淀粉为碳源时,添加麦芽糖、谷氨酸钠及硫酸亚铁有利于其产色。三因素三水平响应面试验表明,麦芽糖、谷氨酸钠、硫酸亚铁的最佳添加质量浓度为麦芽糖32.50 g/L、谷氨酸钠22.33 g/L、硫酸亚铁0.70 g/L。在此基础上得到最优醇溶性色价为3 591.43 U/g,比优化前提高66.42%,其中黄色价、橙色价、红色价分别提高了104.90%,44.31%和45.19%。葛根淀粉可作为基质,通过液态发酵红曲霉生产红曲色素,且经培养基优化可大幅提高色素产量。

抗血小板GPⅠbα抗体诱导建立原发免疫性血小板减少症模型的研究

目的探讨应用抗血小板膜糖蛋白GPⅠbα抗体AN51、R300建立原发免疫性血小板减少症（ITP）动物模型。方法将20只6-8周豚鼠和裸鼠分别分为对照组和3个实验组，每组5只。豚鼠对照组和实验组分别静脉注射0.2 μg/g IgG和0.05、0.1、0.2 μg/g AN51，裸鼠对照组和实验组分别腹腔注射0.2 μg/g IgG和0.05、0.1、0.2 μg/g R300。在注射后不同时间点对豚鼠和裸鼠行眼眶后静脉丛采血，应用血细胞分析仪检测血小板水平。结果①静脉注射AN51后5 min，0.05、0.1、0.2 μg/g AN51组豚鼠血小板计数分别减低0-5%、50%-60%、70%-80%，0.2 μg/g组下降最为明显，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。②腹腔注射R300后6 h，0.05、0.1、0.2 μg/g R300组裸鼠血小板计数分别下降20%-30%、60%-70%、80%-90%，0.2 μg/g组下降最为明显，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。每天1次持续注射0.2 μg/g R300 1-2周的裸鼠出现典型ITP出血症状（全身大量瘀点、瘀斑，多见于四肢、头部和腹部）。结论0.2 μg/g AN51静脉注射、0.2 μg/g R300腹腔注射可以分别建立豚鼠、裸鼠ITP模型。

养蚕——对儿童进行科技教育的可行性策略——深圳市卓雅小学“养蚕实践与培养小学生科学精神教育行动”案例分析

“科学养蚕体验实践活动”是我校根据《国家科学课程标准》中生命世界的“常见的动物”和“动植物一生”等章节内容标准策划设计并广泛开展的。活动全程以国家教育方针和科学传播基本理论为指导,以国家《基础教育课程改革纲要(试行)》和科学(3～6年级)课程标准为依据;以促进全体学生科学精神和综合素质水平提高为目标,力求科学传播教育密切联系儿童生活实际。在“科学养蚕体验实践活动”这个科普平台上,教师通过精彩活动的设计与指导,带领儿童去探究科学、感受文化、关爱生命、学会合作、学会奉献,从而达到激发儿童讨论科学的兴趣,让学校科学传播教育行为更贴近儿童的生活,有益于儿童人生发展及素质优化,有益于社会、家庭、学校诸多教育资源的整合与利用。“科学养蚕体验实践活动”的科学、文化、教育多元价值及意义得到普遍认可。在本文中,我们将就该体验活动的设计策略、传播模式、成果及评价等因素进行分析,总结出针对青少年进行科学传播的有效策略与经验。