“于无声处”的诊断学课程思政实践与体会

全国思想政治教育会议后,课程思政成为医学高等院校思政改革的重要任务,诊断学是基础医学与临床医学的桥梁课程,内容包括体格检查、症状学、实验室检查、辅助检查及临床技能和思维培养,针对不同章节及内容开展课程思政对于培养学生临床实践能力和临床专业素养具有促进作用。开展课程思政,在不影响教学的内容同时将思政内容自然引入是诊断学教师在教学过程不断努力和探索的目标,教学中教师将关心关爱学生、以身作则爱岗敬业作为课程思政基础,采用优秀案例引入、爱国主义、爱患者、爱奉献、正确学习方法等作为思政内容,将正确人生观、价值观和职业素养潜移默化地融入到专业课教学中,全方位激起学生学习兴趣,对培养具有我国特色的医学人才具有重要意义。

前列宁通过调控前列腺MMP-2、TIMP-2降解层粘连蛋白治疗良性前列腺增生的机制研究

目的探讨前列宁(QLN)通过调控前列腺MMP-2、TIMP-2降解层粘连蛋白(LN)治疗良性前列腺增生的机制。方法将50只SPF级6~7周龄雄性SD大鼠采用随机数字表法分为空白组,模型组和低、中、高剂量组,每组10只,除空白组外,其余组采用氯胺酮腹腔注射麻醉去势摘除双侧睾丸、1周后按5 mg/kg皮下注射丙酸睾酮造模,共28 d,造模期间,空白组、模型组按10 ml/(kg·d)灌胃生理盐水,低、中、高剂量组分别按3 g、6 g、12 g/(kg·d)灌胃QLN,1次/d,连续28 d。末次灌胃后禁食12 h,分离各组大鼠完整的前列腺组织并计算前列腺体积、前列腺湿重及前列腺指数(PI),免疫组化检测各组大鼠前列腺组织LN表达水平;取对数生长期的人前列腺增生细胞-1(BPH-1)分为空白组和低、中、高剂量组,分别按浓度为0、0.25、0.5、1.0 mg/mL QLN干预48 h,倒置显微镜观察各组细胞形态,CCK-8法检测各组细胞活性,Western blot分别检测各组细胞MMP-2、TIMP-2、LN蛋白表达量。结果与空白组比较,模型组大鼠前列腺体积、前列腺湿重及PI均明显增大(P<0.01),前列腺组织LN表达水平均明显增强(P<0.05);与模型组比较,低、中、高剂量组大鼠前列腺体积、前列腺湿重及PI均明显减小(P<0.05),低、中、高剂量组大鼠前列腺组织LN表达水平均不同程度降低(P<0.05)。与空白组比较,中、高剂量组BPH-1细胞随着浓度的增高,由菱形变成不规则,密度明显减少,生长速度缓慢,24、48 h BPH-1细胞活力均明显下降(P<0.05),MMP-2、LN蛋白表达量均明显降低,TIMP-2蛋白表达量明显增高(P均<0.05)。结论QLN能有效减小前列腺体积、前列腺湿重及PI,降低前列腺组织LN表达水平,其机制之一可能是通过调控前列腺组织及BPH-1中MMP-2、TIMP-2降解LN而得以实现。

粗叶悬钩子根部多糖含量测定

目的建立粗叶悬钩子根部多糖的含量测定方法。方法利用苯酚-硫酸法显色,标准曲线在490 nm处分光光度法测定粗叶悬钩子根部多糖含量。结果回归方程:Y=0.8325X+0.0223,r=0.9998,测得粗叶悬钩子根多糖含量9.473%,平均回收率为99.69%,RSD=0.56%(n=6)。结论该方法简便,精密度及重现性均较好,可用于粗叶悬钩子多糖的提取和含量测定。

前列宁胶囊对BPH大鼠前列腺组织中IL-10 TNF-α的影响

目的:探讨前列宁胶囊(QLNC)治疗良性前列腺增生(BPH)过程中对炎症因子IL-10、TNF-α表达的影响。方法:将成年SD大鼠随机分为正常组,BPH模型组,保列治治疗组(0.5mg.kg-1.d-1),前列宁高、中、低治疗组(2.25g.kg-1.d-1、4.5g.kg-1.d-1、9g.kg-1.d-1),每组10只,采用去势后皮下注射丙酸睾酮法建立大鼠BPH模型(5mg.kg-1.d-1)。28天后观察各组大鼠前列腺湿重和体积、指数及病理形态学变化,RT-PCR法检测大鼠前列腺组织中IL-10、TNF-α表达情况。结果:QLNC组大鼠前列腺体积、指数较模型组明显减小,病理变化较模型组明显改善;RT-PCR显示QLNC能增强大鼠前列腺组织中IL-10表达,降低TNF-α表达。结论:QLNC能明显抑制大鼠前列腺组织增生,降低炎症因子TNF-α在前列腺组织中的表达,提高IL-10在前列腺组织中的表达,表明QLNC通过抑制炎症因子表达可能是治疗BPH的机制之一。

前列宁胶囊调控MMP-2影响细胞外基质对良性前列腺增生治疗的影响

目的:观察前列宁胶囊(QC)对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)介导的细胞外基质(ECM)的影响,探讨QC对BPH的治疗机制。方法:SD大鼠随机分为空白组,BPH模型组,QC低、中、高观察组,建立BPH模型,QC干预,ELISA法检测大鼠血清MMP-2、FN、Collagen IV、LN; BPH-1细胞培养,分别加入MMP-2和未加MMP-2刺激因子,QC干预,MTT法观察细胞活性,Q-PCR及Western-Blot分别检测MMP-2、FN、Collagen IV、LN基因及蛋白表达(未加MMP-2),加入MMP-2组检测FN、Collagen IV、LN。结果:QC各剂量组大鼠血清中的FN、LN、Collagen IV含量降低,MMP-2升高(P <0. 05 or P <0. 01);BPH-1细胞培养QC干预,加入及未加入MMP-2刺激因子细胞活力均有下降,以48 h后最明显;加入MMP-2刺激因子FN、Collagen IV、LN基因及蛋白表达明显低于未加MMP-2刺激因子,差异有统计学意义。结论:QC对BPH具有治疗作用,QC调控MMP-2介导细胞外基质FN、Collagen IV、LN基因和蛋白表达可能是其治疗BPH机制之一。

血府逐瘀汤不同极性溶剂萃取物对人脐静脉内皮细胞增生的影响

目的:探讨血府逐瘀汤不同萃取物对血管内皮增生的影响。方法:分别用正丁醇、石油醚、氯仿萃取血府逐瘀汤水提液得不同部位,用不同萃取物及萃取后剩余物制备大鼠含药血清,干预人脐血管内皮细胞生长;采用细胞培养、形态学观察、MTT法测定细胞的增殖速度、免疫组化(ELISA)法测定细胞培养液中VEGF的浓度、硝酸还原酶法测定细胞培养液中iNOS、NO的浓度。结果:检测显示氯仿萃取物及萃取剩余物各浓度组中血管内皮细胞增殖程度明显高于其它组别(P<0.01),细胞培养液中VEGF、iNOS、NO含量明显增高(P<0.05)。结论:氯仿萃取部位及萃取后剩余物部位有明显促进血管内皮细胞增生作用。

前列宁颗粒对大鼠前列腺增生的影响

目的探讨前列宁颗粒对实验大鼠前列腺增生症(BPH)的影响。方法将雄性SD大鼠60只,随机分成空白组、模型组、保列治治疗对照组、前列宁颗粒低、中、高剂量组,采用丙酸睾丸酮皮下注射引起大鼠前列腺增生模型,连续给药30d后,观察6组动物体重、前列腺湿重、前列腺指数、前列腺组织形态、血清睾酮(T)、雌二醇(E2)水平的变化。结果模型组大鼠体重较正常组明显减轻(P<0.05),而前列腺重量和前列腺指数明显升高(P<0.01);前列宁颗粒中、高剂量组的前列腺重量和前列腺指数明显下降(P<0.01);前列宁颗粒高剂量组可明显升高大鼠血清T水平,降低E2水平,使T/E2比例升高。结论前列宁颗粒能降低实验大鼠前列腺湿重、前列腺指数,调节大鼠血清中T/E2比例,对大鼠前列腺增生有明显治疗作用,并呈量效关系。

粗叶悬钩子根部提取物对急性肝损伤的治疗作用研究

目的:探讨粗叶悬钩子根部提取物对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法:以化学方法提取粗叶悬钩子根部总生物碱、总多糖、总黄酮为治疗药物,通过一次性腹腔注射99.5%CCl4建立大鼠急性肝损伤模型,检测药物对大鼠血清ALT、AST、AG、GST含量的影响。结果:粗叶悬钩子根部总生物碱可显著降低大鼠血清中异常增高的ALT、AST、GST含量(P<0.01),但总多糖、总黄酮效果不明显(P>0.05)。结论:粗叶悬钩子根部总生物碱具有保护肝细胞膜、细胞内膜和抗肝损伤的作用,可能为粗叶悬钩子抗肝损伤的有效部位。

HPLC法测定强力枇杷露(煎膏剂)中吗啡的含量

目的:测定强力枇杷露(煎膏剂)中吗啡的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-0.005mol/L庚烷磺酸钠溶液(20:40:40);检测波长为220nm。结果:吗啡的线性范围为10-100 μg/mL,r=0.9998,平均回收率为99.94%,RSD%=1.05%(n=9)。结论:所建方法简便、准确、重复性好,可用于强力枇杷露(煎膏剂)中吗啡的含量测定。

PBL教学法在诊断学教学中应用体会

探讨PBL教学法在诊断学中的合理应用,提高诊断学理论课教学质量。同等条件下两班(甲班、乙班),甲班采用PBL教学法,乙班采用传统教学法并进行比较。甲班学生整体优良率明显提高,学习成绩整体水平提高。PBL教学法能够激发学生的学习兴趣,调动学生的学习主动性,提高学生整体成绩和实践能力。

血府逐瘀汤不同提取部位对血管内皮细胞增殖的影响

目的探讨血府逐瘀汤不同部位对血管内皮增殖的影响。方法用正丁醇、石油醚、氯仿萃取血府逐瘀汤水提液,得不同萃取物及萃取剩余物制备大鼠含药血清,以不同浓度含药血清处理人脐血管内皮细胞,用细胞培养、免疫组化法测定细胞培养液中VEGF的浓度,用硝酸还原酶法测定iNOS、NO的浓度。结果氯仿萃取物及萃取剩余物细胞培养液中VEGF、iNOS、NO含量明显增高。结论血府逐瘀汤氯仿提取部位及提取后剩余物部位有明显的促进血管内皮细胞增殖的作用。

血小板、脾脏指数与乙型肝炎肝硬化中医证型的关系

近年来。许多学者和临床医生对慢性乙肝中医辨证分型及其与客观指标的相关性进行了深入的探讨，肝组织纤维化发展到肝硬化失代偿期时，常伴有门脉高压和脾功能亢进。表现为食管、胃底静脉曲张、周围血细胞计数下降、腹水等，临床容易诊断。可是临床患者一旦达到肝硬化，其病理改变往往是不可逆性的。

海外班学生《检体诊断学》教学研究探索

《检体诊断学》是《诊断学》重要章节,也是教学的重点和难点,如何提高海外班学生《检体诊断学》的教学质量是诊断学老师一直探索的重要课题。在教学过程中,采取符合学生特点的教学方法将取得很好的教学效果。

前列宁胶囊调控Caspase-3通路治疗良性前列腺增生的机制

目的研究前列宁胶囊治疗良性前列腺增生(BPH)的机制。方法用SD大鼠制作BPH模型,光镜观察6组大鼠前列腺组织病理改变,Real-time PCR法检测6组大鼠前列腺组织Fas、Caspase-8、Caspase-3、Bax及bcl-2基因表达,BPH-1细胞培养,前列宁胶囊不同剂量干预,比色法分析Caspase-8、Caspase-3活化,Real-time PCR检测Fas、Bax及bcl-2基因表达,Westen-blot检测Fas、bcl-2、Bax蛋白表达。结果病理显示前列腺病理组织明显改善,前列腺组织中Fas、Caspase-8、Caspase-3、Bax基因表达增强,bcl-2表达降低;BPH-1细胞培养,前列宁胶囊干预后,倒置显微镜观察BPH-1细胞胞密度明显减少,细胞变小,细胞凋亡增加,前列宁胶囊不同剂量干预比色法分析Caspase-8、Caspase-3活化增强,Real-time PCR、Westen-blot检测Fas、Bax基因及蛋白表达增强,bcl-2降低。结论前列宁胶囊调控Caspase-3通路中的相关因子,促进前列腺组织细胞凋亡,是其治疗BPH的机制。

前列宁胶囊对细胞外基质TN-C表达的抑制作用

目的观察前列宁胶囊对细胞外基质细胞黏合素(tenascin-C,TN-C)表达的抑制作用。方法 SD大鼠制作良性前列腺增生(BPH)模型,BPH-1细胞培养,分模型组、前列宁胶囊低、中、高剂量组,ELISA法检测大鼠血清及细胞上清液中TN-C含量,RT-PCR、免疫组化法、Westen-blot法检测大鼠前列腺组织及BPH-1细胞中TN-C的mRNA和蛋白表达。结果前列宁胶囊各剂量组能明显降低大鼠血清及BPH-1细胞培养中的TN-C含量,抑制大鼠前列腺组织及BPH-1细胞中TN-C的mRNA和蛋白表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论前列宁胶囊对良性前列腺增生具有明显的治疗作用,能抑制细胞外基质TN-C表达。

粗叶悬钩子根部提取物对急性肝损伤大鼠TNF-α IL-1β IL-6的影响

目的:探讨粗叶悬钩子根部提取物对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法:以化学方法提取总生物碱、总多糖、总黄酮为治疗药物,通过一次性腹腔注射99.5%CCL4建立大鼠急性肝损伤模型,检测药物对大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量的影响。结果:粗叶悬钩子根部总多糖能明显降低大鼠血清中异常增高的TNF-α、IL-1β、IL-6含量(P<0.01)减轻大鼠肝细胞坏死程度。总生物碱、总黄酮对大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量有一定影响但没有统计学意义。结论:粗叶悬钩子根部总多糖具有减轻炎症因子对肝细胞造成损伤的作用。

田基黄对小鼠急性肝损伤的防治作用

目的探讨田基黄对急性肝损伤防治作用的药理机制。方法以四氯化碳(CCl4)制备小鼠急性肝损伤的模型,田基黄水煎剂灌胃,检测小鼠血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活力以及一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6的含量,观察肝组织的病理损伤程度。结果不同浓度的田基黄能不同程度地降低CCl4所致异常升高的小鼠血清中的ALT,AST,NO,TNF-α,IL-6含量,升高SOD活性,并且改善肝脏组织的病理损伤。结论田基黄对CCl4所致小鼠肝损伤具有防治作用,其作用机制可能与降转氨酶、提高抗氧化能力和抑制NO,TNF-α,IL-6过量生成等有关。

粗叶悬钩子总生物碱对急性肝损伤大鼠肝组织CYP2E1与CYP3A1酶mRNA表达的影响

目的研究粗叶悬钩子总生物碱对肝药物代谢酶CYP2E1和CYP3A1 mRNA表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、联苯(对照)组和粗叶悬钩子总生物碱低、中、高剂量组,采用CCl4腹腔内注射建立急性肝损伤大鼠模型,检测各组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝组织病理损伤程度,RT-PCR检测各组肝组织中CYP2E1、CYP3A1 mRNA的表达水平。结果粗叶悬钩子总生物碱中、高剂量组大鼠血清中ALT、AST显著降低(P<0.01),低剂量组ALT显著降低(P<0.01),AST降低差异无统计学意义(P>0.05);各剂量组大鼠肝损伤程度显著减轻(P<0.01);肝组织中CYP2E1、CYP3A1 mRNA表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论粗叶悬钩子总生物碱能明显降低ALT、AST含量,保护肝细胞损伤,抑制肝组织中CYP2E1、CYP3A1 mRNA的表达。

芎芍胶囊对人脐静脉内皮细胞分泌血管新生因子的影响

目的探讨芎芍胶囊对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分泌血管新生因子影响的机制。方法采用血清药理学和体外干预培养HUVEC的方法,通过MTT法和酶联免疫吸附分析法观察芎芍胶囊低、中、高剂量对HUVEC的体外增殖和分泌Ang、Ang-2、VEGF、bFGF、EGF和TGF-β1的影响。结果芎芍胶囊各剂量组均有促HUVEC增殖的作用。低剂量组有促进HUVEC分泌Ang、Ang-2、EGF和VEGF的作用,而对bFGF、TGF-β1分泌的影响无明显差异;中剂量组有促进HUVEC分泌Ang、Ang-2、EGF和bFGF的作用,抑制TGF-β1的分泌,对VEGF的分泌无明显影响;高剂量组有促进HUVEC分泌Ang、EGF和bFGF的作用,并抑制VEGF与TGF-β1的分泌,而对Ang-2的影响无明显差异。结论芎芍胶囊能促进HUVEC的增殖,增加HUVEC分泌促血管新生因子和降低抑血管生成因子表达,且与剂量有一定的关系。