谈药剂学实验教学改革

药剂学是药学专业的一门主干专业课 ,实验教学在整个教学过程中占有非常重要的地位。我们对实验教学进行了改革 ,优化实验教学内容 ,改革教学模式 ,对于小设计实验多以在学生实验报告和实验过程中以讨论的形式体现。尽可能地开放实验室 ,为学生提供实验场所。并建立综合性实验考核制度 ,从实验预习报告、实验技能、实验报告与结果、专题设计及其它等五个方面进行考核。

HPLC法测定人血浆中美索巴莫及其相对生物利用度

目的:建立正常人血浆中美索巴莫的 HPLC 测定法,并研究美索巴莫的分散片、干混悬剂与普通片在正常人体的相对生物利用度。方法:血浆样品用18%高氯酸沉淀后离心,上清液直接进样,以甲醇-25 mmol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(32:68,v/v)为流动相,在 Hypersil BDS_2柱(4.6 mm×200 mm,5 μm)上分离,流速为1.2 mL·min^(-1),检测波长为272 nm。18名健康志愿者以3周期随机交叉试验设计,分别单剂量口服美索巴莫分散片(T_1)、美索巴莫干混悬剂(T_2)或美索巴莫片(R)后不同时间点采血,测定血药浓度,计算药物动力学参数并进行生物等效性判定。结果:美索巴莫在0.081～20.8μg·mL^(-1)范围内浓度与峰面积的线性关系良好,同归方程为4=5.337×10~3C-191.9,r=0.9999。最小可定量浓度为0.081μg·mL^(-1),方法回收率为99.0%～106.2%(n=5),日内 RSD 为1.4%～6.8%(n=5);日间 RSD 为2.9%～6.8%(n=15)。单次服用 T_1、T_2或 R0.5 g 后,与 R 相比,T_1的相对生物利用度为(105.2±15.1)%;T_2的相对生物利用度为(105.6±14.3)%。药动学参数经多因数方差分析显示周期间与制剂间差异均无显著意义(P>0.05),双单侧 t 检验表明接受 T_1、T_2与 R 生物等效的假设,经计算90%置信区间均在规定值内。结论:该方法简单、快速,准确度、灵敏度高,重现性好,可用于美索巴莫在人体内过程研究;T_1、T_2与 R 为生物等效制剂。

利用MMDL评价尼麦角林胶囊人体生物利用度

目的建立测定人血浆中1-甲基-10α-甲氧基-9,10-二氢麦角醇(MMDL)浓度的高效液相色谱法,并以MMDL体内的水平为指标研究尼麦角林胶囊的人体生物利用度。方法以二氯甲烷-异丙醇(9∶1)为萃取液,美索巴莫为内标,血浆样品经液-液萃取浓缩后,经Diamonsil C18柱分离,以乙腈-20 mmol·L-1磷酸二氢钾溶液(22∶78)为流动相,在225 nm波长处检测。18名健康男性志愿者采用随机交叉给药方案,分别单剂量po60 mg受试制剂或参比制剂,不同时间点采血,用HPLC测定血浆中MMDL,比较二者生物利用度。结果MMDL和内标分离良好,内源性杂质不干扰测定,在浓度为1.7～207μg·L-1内,MMDL浓度与峰面积比线性关系良好,方法回收率为91.7%～101.8%,日内、日间RSD分别小于9.7%(n=5)、11.6%(n=15)。单剂量po受试制剂或参比制剂60 mg后,MMDL的ρmax分别为(97.9±54.6)和(103.0±60.5)μg·L-1;tmax分别为(1.2±0.4)和(1.2±0.4)h;t1/2分别为(3.7±2.6)和(4.4±3.0)h;AUC0→12 h分别为(283.7±218.4)和(305.3±244.6)μg·h·L-1。相对生物利用度为(93.8±6.4)%。结论此方法灵敏、简便、准确度高,可用于尼麦角林体内过程研究。国产尼麦角林和国外产品的体内过程无显著性差别,两者为生物等效性制剂。

硝苯地平膜控型控释微丸的制备及体外评价

目的研究硝苯地平(NF)膜控型24 h控释微丸的处方与工艺,并考察其体外释放特性。方法采用液相层积、丸芯上药法制备载药速释微丸,以Eudragit RL100、RS100为包衣材料,流化床悬浮包衣法制备膜控型控释微丸,并对影响微丸释放的处方因素进行了考察。通过与市售渗透泵片拜新同的体外释放度的对比研究,探讨硝苯地平膜控型控释微丸的体外释药特征。结果调整Eudragit RL100、RS100的比例、衣层厚度、致孔剂的用量,可以改变药物的释放速率。当Eudragit RL100、RS100的比例为3∶7,包衣增重为6%时,制备的控释微丸体外释药与市售渗透泵片相似(f2=62.8),具有良好的零级释放特性。结论以丸芯上药法,Eudragit RL100、RS100为控释材料制备的NF膜控型控释微丸,具有良好的零级释放特性,结果可为硝苯地平多单元控释制剂的研究开发提供参考。

木香挥发油的β-环糊精包合物研究

目的研究木香挥发油最佳包合物工艺 ,增加制剂中挥发油的稳定性。方法采用饱和水溶液法 ,以包合物收率、挥发油利用率及包合物含油率为指标 ,采用L9(3 4 )正交设计试验 ,对木香挥发油进行β 环糊精包合研究。结果优选出包合工艺为A2 B2 C3 即 β 环糊精∶挥发油为 6∶1 ,包合温度为 5 0℃ ,包合时间为 3h。TLC法验证了包合物的形成。结论采用最佳工艺制备包合物 ,收率高、工艺简单、设备要求不高 。

药学实验教学中心化管理模式的构建

为适应二十一世纪医药卫生人才的培养需要,多年来的教学改革和建设的目的实践已经为"加强基础,增强知识,培养能力、提高素质"的人才培养模式奠定了一定的基础,同时也比较强烈地提示了实验教学改革是药学教育培养目标得以实现的重要环节.

药学专业创新性人才培养模式的课程设置研究

针对1998年全国高等教育专业调整及原来专业划分的情况,并根据我们的办学实际情况,从强调学生综合素质、培养创新意识的角度出发,经广泛调研和充分论证,我院本着对课程设置强调"强化基础、拓宽口径、突出特色、提高综合素质"的改革原则,改革了以往将课程分为普通课、基础课、专业基础课和专业课的模式;提出了将课程划分为素质构成课程和能力构成课程两大类的设想.

HPLC-MS/MS法测定伏立康唑的血药浓度及其在生物等效性研究中的应用

目的建立测定人血浆中伏立康唑的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）,研究2种伏立康唑片的相对生物利用度。方法血浆样品经酸化后用甲醇沉淀蛋白,经Waters Atlantis C18柱分离,流动相为乙腈-0.2%冰醋酸水溶液（内含20 mmol.L-1醋酸铵）（60∶40,v/v）,流速为0.2 mL.min-1;选择多反应离子检测（MRM）方式进行定量分析,用于监测的离子为质荷比m/z350.9→281.4（伏立康唑）和m/z307.9→220.3（内标氟康唑）。18名健康志愿者以随机交叉方式分别单次口服伏立康唑分散片T或伏立康唑片R 0.2 g后于不同时间点取血,样品以新建立的HPLC-MS/MS法测定,研究比较两制剂的药动学及相对生物利用度。结果伏立康唑与血浆中内源性杂质分离度好,伏立康唑浓度在27.35~3 500 ng.mL-1与峰面积比线性良好,最低定量浓度为27.35ng.mL-1。蛋白沉淀绝对回收率为86.2%~88.8%,相对回收率为97.9%~105.7%,日内精密度（RSD）〈9.8%,日间精密度（RSD）〈9.4%。单剂量口服伏立康唑分散片T和伏立康唑片R 0.2 g后2种制剂的Cmax为（717.9±325.1）、（671.8±243.3）μg.L-1;tmax为（1.1±0.5）、（1.1±0.4）h;AUC0~24为（3 729.1±1 887.7）、（3 811.2±1 836.6）μg.h.L-1;t1/2为（6.7±1.9）、（6.7±1.7）h。与R相比,T制剂相对生物利用度为（97.3±13.0）%。结论该方法简单快速,灵敏度高,可用于伏立康唑的体内过程研究。方差分析表明伏立康唑分散片T与伏立康唑片R中伏立康唑的主要药动学参数之间均无明显差异,双单侧t检验结果表明两制剂为生物等效制剂。

薄荷脑和樟脑对复方苯海拉明乳膏透皮作用的影响

目的研究薄荷脑和樟脑对复方苯海拉明乳膏中盐酸苯海拉明和苯佐卡因透皮作用的影响。方法采用改良Franz直立式扩散池,以离体乳猪皮肤为渗透屏障进行体外透皮扩散试验,以盐酸苯海拉明和苯佐卡因的累积渗透量、稳态流量及皮肤滞留量为指标,考察薄荷脑和樟脑在处方中的透皮调节作用。结果薄荷脑和樟脑对盐酸苯海拉明的累积渗透量、稳态流量及皮肤滞留量均无显著影响(P>0.05);对苯佐卡因的累积渗透量、稳态流量有显著抑制作用(P<0.01),并能提高其12 h皮肤滞留量(P<0.05)。结论薄荷脑和樟脑在复方苯海拉明乳膏中除发挥其药理活性外,还能调节药物的透皮吸收,其对苯佐卡因经皮渗透的抑制及皮肤滞留量的增加可能更有利于复方苯海拉明乳膏发挥局部治疗作用。

尼群地平β-环糊精包合物的研制

目的 :研究尼群地平 β 环糊精包合物最佳制备工艺。 方法 :采用饱和水溶液法 ,通过正交试验设计 ,以包合物的收率、药物的包封率及溶出度为考察指标 ,综合评分后确定最佳制备工艺。结果 :最佳制备工艺为尼群地平∶β 环糊精 (摩尔比 ,1∶1) ,包合时间为 3 0min ,包合温度为 70℃ ;尼群地平经 β 环糊精包合后 ,45min溶出度为原料药的 5.4倍 ,证明有包合物形成。结论 :采用最佳制备工艺制成的包合物收率高 ,溶出快 ,有助于提高其体内的生物利用度 。

高效液相色谱-荧光法测定人血浆中文拉法辛及相对生物利用度

目的建立人血浆中文拉法辛的HPLC-荧光测定法，研究2种文拉法辛胶囊的相对生物利用度。方法以拉呋替丁为内标，血浆样品萃取后经Diamonsil C18柱分离，流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液（磷酸调pH为5．95）25：75（v／v），荧光检发射波长（Ex）为276nm，检测波长（EM）为598nm。18名健康志愿者采用随机交叉方式分别单剂量口服文拉法辛胶囊100mg后研究两者的相对生物利用度。结果血浆中文拉法辛与内源性杂质分离完全，在5．1～490．7μg·L^-1浓度与峰面积比线性良好，回归方程为：Y=0．074X＋0．0285（r^2=0．9998），最低定量限为5．1μg·L^-1；文拉法辛绝对回收率为98．6％～100．5％（n=20），内标绝对回收率为84．2％～85．7％（n=20），方法回收率为89．3％～108．7％（n=15），日内精密度（RSD）〈3．6％（n=15），日间精密度（RSD）〈9．6%（n=15）。单次服用100mg文拉法辛胶囊T或R后的AUC0-24。分别为（1146．4±339．6）和（1132．9±311．3）μg·h·L^-1；Cmax分别为（167．7±49．1）和（177．6±47．8）μg·L^-1；tmax分别为（1．9±0．3）和（1．8±0．6）h。与R相比，T的相对生物利用度为（103．7％±13．3％）。结论该法简单，准确度高，灵敏度好。方差分析结果两制剂的主要药动学参数之间无明显差异，两者为生物等效制剂。

人血浆中甲苯磺酸妥舒沙星的HPLC-荧光法测定及相对生物利用度

建立了HPLC-荧光法测定人血浆中的甲苯磺酸妥舒沙星,以加替沙星为内标,血浆样品萃取后经C18色谱柱分离,流动相为乙腈-甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(pH6.5)(10:30:60),荧光激发波长350nm,发射波长420nm。血浆中妥舒沙星在18.2～2280ng/ml浓度范围内线性关系良好,方法回收率为93.7%～104.1%,日内、日间RSD不大于10.1%和9.4%。18名健康志愿者采用随机交叉方式分别单剂量口服甲苯磺酸妥舒沙星分散片(受试制剂)或片剂(参比制剂)0.3g,AUC0→24h为(6403.0±1827.4)和(6544.1±1937.9)ng·h·ml-1,cmax为(1266.9±409.6)和(1258.2±395.8)ng/ml,tmax为(0.9±0.3)和(1.0±0.3)h。受试制剂的相对生物利用度为(98.6±7.4)%。

高效液相色谱法测定人血浆中普卢利沙星活性代谢产物NM394

目的 建立人血浆中普卢利沙星活性代谢产物NM394的高效液相色谱测定方法。方法 取血浆样品0．5mL，用高氯酸沉淀蛋白，以乙腈-枸橼酸溶液为流动相，用Hyperisl BDS2柱分离，紫外检测器272nm处检测。结果 普卢利沙星活性代谢产物NM394的线性范围为0．025～5．0μg·mL^-1，平均回收率为107．0%～114．0％，日内、日间精密度均〈10％。结论 方法灵敏、专属、快速，可用于普卢利沙星人体药动学及生物利用度研究。

蛋白沉淀结合HPLC测定人血浆中尼美舒利及相对生物利用度

目的建立人血浆中尼美舒利的HPLC-UV测定法,研究两种尼美舒利胶囊的相对生物利用度。方法采用COSMOSIL C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温为30℃,流动相为乙腈-0.015 mol·L^(-1)的磷酸二氢钾缓冲液(氢氧化钠溶液调pH至7.3)(79:21),流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为404 nm。18名健康志愿者采用自身对照随机交叉给药方案,分别单次口服不同厂家尼美舒利胶囊0.1 g,在不同时间点取血,血浆样品以新建立的HPLC-UV测定,比较两药主要药动学参数的差异和相对生物利用度。结果尼美舒利与血浆中内源性杂质分离完全,尼美舒利在0.05～6.0 mg·L^(-1)内与峰面积比线性良好,血浆中尼美舒利最低定量质量浓度为0.05 mg·L^(-1)。方法回收率为96.8%～103.6%,日内精密度(RSD)<13.4%,日间精密度(RSD)<9.9%。单剂量口服尼美舒利0.1g后,两种制剂的ρ_(max)为(5.7±1.5)和(5.4±1.4)mg·L^(-1);t_(max)为(3.4±0.5)和(3.4±0.5)h;AUC_(0→24)为(41.4±12.5)和(40.3±15.7)mg·h·L^(-1);AUC_(0→∞)为(42.9±13.2)和(41.5±10.8)mg·h·L^(-1);t_(1/2)为(4.1±1.6)和(4.1±1.5)h。结论该方法简单快速,灵敏度高,可用于尼美舒利的体内过程研究。方差分析表明,两制剂之间药动学参数无明显差异,试验制剂与参比制剂为生物等效制剂。

HPLC-MS-MS测定人血浆中的甘草次酸及生物利用度

目的 建立人血浆中的甘草次酸的HPLC-MSMS测定法，研究复方甘草甜素制剂的相对生物利用度。方法 以雷尼替丁为内标，血浆样品液液萃取后，经BDS Hypersil C18柱分离，采用质谱检测器检测。18名健康男性志愿者采用随机交叉方式分别单次口服复方甘草甜素制剂A、B或C各75mg，在不同时间点取血，样品以新建立的HPLC-MS-MS法测定，研究比较3种制剂的药动学及相对生物利用度。结果 甘草次酸在浓度2．0～200．0μg·L^-1与峰面积比线性良好，最低定量浓度为2．0μg·L^-1。方法回收率为97．2％～108．0%，日内精密度（RSD）〈4．2％，日间精密度（RSD）〈8．9%.单剂量口服复方甘草甜素片A、B或胶囊C75mg后3种制剂的Cmax分别为（130．4±40．3）、（132．1±43．6）、（128．6±44．7）μg·L^-1；tmax分别为（3．5±0．5）、（3．3±0．5）、（3．4±0．5）h；AUC0-48分别为（2097．6±744．8）、（2037．0±894．9）、（2075．0±734．0）μg·h·L^-1；t1／2分别为（6．0±2．1）、（5．9±1．5）、（5．7±2．1）h。结论 该方法选择性好，灵敏度高，可用于甘草次酸的体内过程研究。药动学参数经方差分析表明A、B和C中甘草次酸的主要药动学参数之间均无显著差异，双单侧t检验结果表明3制剂为生物等效制剂。

注射用兰索拉唑在健康人体内的药动学研究

目的研究兰索拉唑在健康受试者体内的药动学过程。方法采用三交叉拉丁方设计,12名健康受试者分别静脉滴注兰索拉唑15、30、60 mg（45 min滴完）,洗脱期为1周。血浆中兰索拉唑的浓度以HPLC-UV法测定,以DAS Ver 2.1计算药动学参数。结果受试者静脉滴注兰索拉唑后体内过程符合二室模型,单次给药15、30、60 mg后主要药动学参数：t1/2分别为（1.76±1.43）、（1.21±0.4）、（1.86±1.29）h,Cmax分别为（0.92±0.33）、（2.05±0.59）、（4.04±0.55）μg.mL-1,AUC0-10h分别为（3.41±2.14）、（6.25±3.55）、（11.65±5.96）μg.h.mL-1,AUC0-∞分别为（7.67±6.37）、（9.21±7.13）、（14.68±10.01）μg.h.mL-1,V分别为（5.95±5.18）、（6.32±3.74）、（5.26±6.03）L,CL分别为（3.98±4.38）、（4.81±2.18）、（5.43±2.43）L.h-1。结论中国健康受试者单剂量静脉滴注兰索拉唑后,在15~60 mg内的体内过程呈线性药动学特征。兰索拉唑在人体的代谢存在较大的个体差异,变异来源可能与CYP2C19的基因多态性有关,临床宜个体化用药。

HPLC-UV法测定人血浆及尿液中比阿培南的浓度

目的建立HPLC-UV法测定人血浆及尿液中比阿培南的浓度。方法血浆样品经超滤离心法提取后,采用XB-C18柱分离,流动相：乙腈-0.1 mol.L-1醋酸铵缓冲液（pH 4.6）=3∶97（v/v）,流速：1.0 mL.min-1,检测波长：300 nm,柱温：40℃,进样量：30μL;尿样处理方法同血样,但以甲醇代替乙腈,进样量20μL。结果比阿培南与血浆、尿液中内源性物质分离度好,血药、尿药浓度分别在0.1~50、0.5~300 mg.L-1与峰面积线性关系良好,定量下限分别为0.1、0.5 mg.L-1,绝对回收率分别在90.9%~97.3%、99.1%~102.5%,相对回收率分别为102.1%~110.1%、100.3%~104.4%,日内精密度（RSD）分别〈3.4%、2.1%,日间精密度（RSD）分别〈5.7%、2.8%。均满足生物样本测定要求。结论所建立方法高效、灵敏、简捷快速、专属性好、重现性高,可用于比阿培南药动学研究。

高效液相色谱法测定双氯芬酸二乙胺乳胶剂有关物质

目的建立HPLC法测定双氯芬酸二乙胺乳胶的有关物质。方法采用Ultimate C18色谱柱,以0.2%乙酸溶液(pH=3.0)-甲醇(34∶66)为流动相,检测波长为254nm。结果辅料不干扰各杂质的检出,双氯芬酸二乙胺能与各杂质完全分离,检测限为0.02μg.mL-1,在杂质的吸收系数等于或大于双氯芬酸二乙胺的情况下,最低杂质检出量为0.002%。结论建立的双氯芬酸二乙胺有关物质测定方法简单,灵敏度高,能用于该制剂的质量控制。

白藜芦醇三甲醚乳胶体外经皮渗透研究

目的制备白藜芦醇三甲醚(BTM)乳胶,考察载药量、促渗剂及其组合对BTM经皮渗透性的影响,评价药物透皮给药的可行性。方法以卡波姆940为凝胶基质制备BTM乳胶,选用改良Franz扩散池,以离体乳猪腹部皮肤为屏障进行体外经皮渗透实验,用HPLC-UV法测定各时间点接收室中药物浓度,计算经皮渗透动力学参数。结果载药量由1%增加到2%时,BTM 24 h单位面积渗透量增加1倍,2%与4%乳胶渗透量没有统计学差异(P>0.1)。促渗剂均可显著促进BTM透皮吸收,其透皮速率为:2%香叶醇>2%肉豆蔻酸异丙酯>2%油酸>2%氮酮>2%橙花叔醇>无促渗剂;香叶醇的浓度大小对BTM的透皮吸收无明显影响(P>0.05);与单用2%香叶醇相比,促渗剂联用(2%香叶醇+2%丙二醇、2%香叶醇+2%肉豆蔻酸异丙酯)未显示出显著协同促渗作用(P>0.05),而2%香叶醇+2%异丙醇则显示弱拮抗促渗作用(P<0.05)。结论常用促渗剂均能不同程度促进BTM经皮渗透,载药量为2%、促渗剂为2%香叶醇时,BTM体外透皮可达最大吸收。但BTM体外透皮吸收具有饱和性,该结果为BTM经皮给药研究提供了基础。

基于全自动二维液相色谱的地奈德乳膏体外经皮渗透研究

目的建立乳膏及经皮渗透样品中地奈德的全自动二维液相色谱(2D-LC-UV)测定法,比较新研制的地奈德乳膏与原研制剂的体外经皮渗透性。方法采用ASTON RG C30色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为四氢呋喃-水-乙腈=25:35:40,流速为1.0 m L·min^(-1),检测波长245 nm。体外透皮实验采用改良Franz扩散池,以离体乳猪皮为屏障,以累积渗透量和皮肤滞留量为指标,评价新研制的地奈德乳膏与原研制剂的经皮渗透规律。结果皮肤接收液和皮肤提取液样品中地奈德浓度分别在10~1000ng·m L^(-1)、10~300 ng·m L^(-1)内线性关系良好(r^2=0.999,r^2=0.997)。与原研制剂相比,新研制的地奈德乳膏在2、7、12、24 h的单位皮肤面积累积渗透量和2、24 h皮肤滞留量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论所建立的2D-LC-UV方法快速、准确,可用于地奈德乳膏的含量测定及体外经皮渗透规律研究。新研制的地奈德乳膏的经皮渗透特性与原研制剂相似。