抗AFP抗体双标记法及其产物特性测定

采用氯胺丁改良法和过碘酸钠氧化法，进行抗ＡＦＰ多抗或单抗直接双标记１３１Ⅰ和ＭＭＣ，过Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ５０柱并以ｒ计数仪与紫外分光光度仪同步监测分离、收集标记物。经测定多抗和单抗双标记物，标记比分别为７０．３ＭＢｑ∶ｍｇ∶２．２μｇ和５９．２ＭＢｑ∶ｍｇ∶１．８μｇ；放化纯度９８％和９７％；１３１Ⅰ利用率８３％和８８％；抗体回收率６２％和７４％；标记后与标记前相比抗体活性均无明显降低。置４℃５ｄ和１０ｄ时，抗体活性不受影响；放化纯度分别降为９５％和９２％、９１％和８８％。经裸鼠人肝癌模型放免显像，７２ｈ即见肿瘤区有放射性浓集，至１２０ｈ肿瘤显像最清晰。结果表明，多抗和单抗的双标记物的生物、理化性质稳定。为免疫导向治疗肝癌提供了一种新型的“双弹头”导向药物。

用广西矮马制备抗人AFP血清

用亲和层析法提纯人甲胎蛋白(AFP)后免疫两匹广西矮马,制备马抗AFP血清取得成功。用双扩散法测定其抗AFP效价均在1∶32～1∶64以上。经免疫电泳鉴定:马抗AFP血清与正常人血清无沉淀线;与新生儿脐带血清及纯AFP溶液只有一条沉淀线。与放免法测定AFP含量在≥400μg/L的24份肝癌病人血清作对流免疫电泳测定,全部为阳性。和北京生物所891批AFP诊断血清作平行对流免疫电泳检测255份血样,其中43份同时阳性,212份同时阴性。单相特异性相一致。

^（125）I－抗AFP制备的研究

用亲和层析法提纯马抗ＡＦＰ，采用氯胺Ｔ改良法标记１２５Ｉ，经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０柱分离，以ｒ计数与紫外同步监测进行标记物的收集。并对１２５Ｉ－抗ＡＦＰ制备方法及其稳定性等进行探讨和测定。结果：１２５Ｉ和抗ＡＦＰ的利用率分别为６０％～８０％和５０％～７３％；标记率为６５％～８３％，１２５Ｉ－抗ＡＦＰ的比放射性为５５．５～７４ＭＢｑ／ｍｇ；放化纯度５ｄ内为９７％～９８％，１４ｄ为９３％；抗体活性标记后与标记前基本不变，４℃保存５ｄ和１４ｄ均无降低。表明１２５Ｉ－抗ＡＦＰ的生物活性及稳定性良好。

^(131)Ⅰ-抗AFP抗体导向治疗肝癌的临床观察

１９８０～１９９３年，用（１３１）Ⅰ－抗ＡＦＰ抗体治疗不能切除肝癌７２例（１５３例次），治疗≥２次占４７例，平均（１３１）Ⅰ量为３１．８７（６．４～９７．４）Ｍｃｉ，中位数２７．４ｍｃｉ（１０１３．８ＭＢｑ）。结果：总有效率２０．８％（１５／７２），治后一年生存率３３．３％（２２／６６）；治疗≥２，≥３，≥４次者有效率分别为２９．８％（１４／４７）、６０．０％（９／１５）和７０．０％（７／１０）；一年生存率依次为４５．７％、７３．３％和８０．０％；瘤大小：≤７ｃｍ，７．１～１０ｃｍ和＞１０ｃｍ患者，治后瘤缩小率分别为１００．０％、７６．９％和５３．９％；一年生存率８７．５％、４８．０％和１５．４％；经肝动脉灌注治疗有效率高于ｉｖ给药者（６４．３％：１５．２％），一年生存率亦高于ｉｖ（６４．３％：３７．５％）。本研究表明，（１３１）Ⅰ－抗ＡＦＰ抗体导向治疗肝癌具有明显疗效。

“双弹头”抗AFP抗体对肝癌导向综合治疗的实验和临床研究

为增强导向治疗的“弹头”杀伤力，提高肝癌导向综合治疗的疗效，对马抗人ＡＦＰ抗体进行了１３１Ⅰ和丝裂霉素（ＭＭＣ）双标记，制备同时携带１３１Ⅰ和ＭＭＣ的“双弹头”马抗人ＡＦＰ抗体（１３１Ⅰ－ＡＦＰＡｂ－ＭＭＣ）。荷人肝癌裸鼠的定位显像和抑癌率实验显示１３１Ⅰ－ＡＦＰＡｂ－ＭＭＣ具有良好的定位显像作用，抑癌率达７３．５％，明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。２２例配对的中晚期原发性肝癌患者的“双弹头”导向综合治疗结果：治疗组的有效率（ＣＲ＋ＰＲ＋ＭＲ）为６３．２％明显高于对照组（３１．８％），Ｐ＜０．０５；治疗组的１年生存率（５２．６％）亦明显高于对照组（２２．７％）Ｐ＜０．０５，且无严重毒副作用。表明：１３１Ⅰ－ＡＦＰＡｂ－ＭＭＣ的“双弹头”

广西肝癌高发区成年居民乙型肝炎病毒感染的现况研究

目的探讨广西肝癌高发区防癌筛查对象的HBV感染现况。方法共采集筛查对象早上空腹静脉血15701人份,分离血清并检测其HBsAg和ALT等生化指标。结果防癌筛查对象的HBsAg阳性率为17·83%,ALT异常率为1·80%,HBsAg阳性且ALT异常的百分率为1·08%;男性筛查对象的HBsAg阳性率和/或ALT异常率均明显高于女性;随着年龄增长,防癌筛查对象的HBsAg阳性率和/或ALT异常率逐渐降低。结论该地区不但是肝癌高发区,也是乙型肝炎高发地区。

核素-抗AFP抗体-MMC双弹头导向治疗肝癌的实验和临床研究

目的分析标记物核素－抗ＡＦＰ抗体－ＭＭＣ．在荷瘤裸鼠肝癌模型的免疫显象和治疗，以及患者体内代谢、药代动力学和治疗效果方法用改良氯胺Ｔ法和过碘酸钠氧化法，直接将［３］Ⅰ（或１２５Ⅰ）和丝裂霉素（ＭＭＣ）双标记单抗（ｍＡｂ）和多抗（ｐＡｂ）得标记物［３］Ⅰ－抗ＡＦＰｍＡｂ－ＭＭＣ（双弹头Ⅰ）和［３］Ⅰ（或１２５Ⅰ）－抗ＡＦＰ－ｐＡｂ－ＭＭＭＣ（双弹头Ⅱ），将双弹头作荷瘤裸鼠定位显象和治疗，观察药物在体内代谢和药代动力学；并经静脉（Ｖ）或动脉（Ａ）给药治疗中晚期肝癌４１例（治疗组）治疗１，２，３次分别有４，２４和１３例，其放射剂量（ＭＢｑ／例）分别为１９８±３８，６５２±２０２和９９８±２２１结果双弹头Ⅰ，Ⅱ在肝癌模型给药ｄ５时瘤内定位显象均清晰，ｄ１３抑瘤率分别为８１．５％和５０．０％、双弹头Ⅰ，Ⅱ在血浆清除Ｔ１／２约２４ｈ，尿Ｔ１／２ＭＡｂ（１２０ｈ）长于ｐＡｈ（１８ｈ）药代动力学模式为二室模式；肝ＳＰＥＣＴ扫描肿瘤阳性显象率１００％治后瘤小率、ＡＦＰ下降率和一、二年生存率分别高于同期经Ａ灌注（ＴＡＩ）或化疗栓塞（ＴＡＣＥ）的对照组（５７．５％比３１．７％，Ｐ＜０．０１；６５．７％比３７．５％，Ｐ＜０．０１和?

^(125)I-抗AFP抗体介入灌注联合化疗栓塞治疗肝癌的临床观察

目的 观察12 5I 抗AFP抗体经肝动脉灌注后在癌灶内的定位导向能力及与化疗栓塞(TACE)联合治疗肝癌的近期疗效和毒副作用。方法 肝动脉内介入灌注12 5I 抗AFP抗体联合行TACE ,综合治疗肝癌 36例。结果 导向组瘤 肝放射比值平均为 1 86± 0 72 ,有效率、AFP显著下降率及中位缓解期与TACE组相比 ,各为 55 6 %比 4 1 2 % (P >0 0 5)、77 8%比 52 9% (P <0 0 5)、8 5M比 5 6M(P <0 0 5)。两组的毒性反应相似。结论 经肝动脉灌注并与TACE联合可显著增强12 5I 抗AFP抗体在肝癌灶中的导向定位能力和滞留能力及内照射作用 ,提高综合疗效。

广西肝癌高危人群队列和高发家系样本数据库的建立

目的建立肝癌高危人群队列和高发家系的血样本库和基础资料数据库。方法在广西肝癌高发现场,选择肝癌高发年龄段常住居民进行防癌筛查和流行病学调查,其中HBsAg阳性的对象列为肝癌高危人群队列,对其定期随访和复查;根据基于人群的肿瘤登记资料和临床流行病学资料,选取肝癌高发家系并匹配相应对照家系。对所有研究对象均采集早晨空腹静脉血,进行HBsAg等生化指标检测和腹部B超检查;分离其血清、血浆和有核细胞,置于-80℃保存。所有资料按要求进行质控,并录入数据库。结果已收集了30 000多人次的血清、血浆和有核细胞及其基础资料,并妥善保存和实行计算机动态管理。结论建立该样本数据库,为下一步开展更深层次、高水平和高质量的广西区域性高发肿瘤基础研究、现场防控与临床研究,搭建了资源共享平台;探索和建立了一个具有先进性、科学性以及通用性等优点的数据管理系统,逐步实现了样本和资料的科学有效管理。

^(125)I抗AFP抗体在肝癌病人体内的药代动力学观察

目的 :用 1 2 5 I标记抗 AFP多克隆抗体治疗 12例原发性肝癌患者 ,观察其药代动力学特征。方法 :用改良氯胺 - T法制备 1 2 5 I-抗 AFP抗体 ,标记率为 6 5 %～ 83% ,比放射性为 5 5 .5～ 74MBq/ m g (Ig G)。全部病例采用 Seldinger插管技术 ,经肝动脉注射给药。给药后在不同时间点采集外周静脉血测放射活性。所得数据用计算机程序 PK - GRAPH模拟出 1 2 5 I-抗 AFP抗体的药代动力学模型、血放射性 -时间曲线和计算出各种动力学参数。结果 :全组病例的药代动力学模式为二室模型 ;t1 /2α为 (1.85± 1.79) h,t1 /2β为 (15 6 .46± 6 5 .11) h。血清 AFP>40 0μg/ L和 AFP阴性病人药动学参数无显著性差异 ,不同的抗体用量以及是否经肝动脉用碘油抗癌药乳剂作 TAE对药动学参数均无显著性影响 (P >0 .0 5 )。结论 :1 2 5 I-抗 AFP抗体经肝动脉给药 ,在肝癌病人体内有较长的清除半衰期。

^（125）I－抗AFP放射免疫治疗原发性肝癌临床观察

将纯化抗ＡＦＰ多抗，用氯胺Ｔ氧化法标记￣（１２５）Ｉ，得￣（１２５）Ｉ－抗ＡＦＰ抗体进行导向治疗不能切除的肝癌２２例。均经静脉滴注。全组￣（１２５）Ｉ中位剂量为２８９．３（１００．３～７０８．９）ＭＢｑ，抗ＡＦＰ抗体的ＩｇＧ量为５．２ｍｇ（１．８～１２．８ｍｇ）。可评价疗效１９例，有效率为３１．６％（ＣＲ５．３％，ＰＲ２６．３％），总有效率（ＣＲ＋ＰＲ＋ＭＲ）为４２．１％，肿瘤缩小率为６３．２％（１２／１９）、ＡＦＰ下降率６４．７％（１１／１７），６例转阴，治后１年生存率为４７．１％（８／１７），７例尚存活，５例存括１４～３３个月。治疗耐受良好，毒副反应轻微。￣（１２５）Ｉ半衰期长，射线穿透力短，对正常组织扰乱少，使用方便，防护较简便，具有显著实用价值。

肝癌^(131)I-抗AFP抗体-MMC“双弹头”免疫导向治疗的研究

目的观察一种集化疗和内照射于一体的新型“双弹头”免疫导向治疗肝癌的效果。方法以大鼠抗人甲胎蛋白（ＡＦＰ）单克隆抗体（抗ＡＦＰＭｃＡｂ）和马抗人ＡＦＰ多克隆抗体（抗ＡＦＰＡｂ）为载体，１３１碘（１３１Ｉ）或１２５碘（１２５Ｉ）和丝裂霉素（ＭＭＣ）为“双弹头”，用改良氯胺Ｔ法制备１３１Ｉ－抗ＡＦＰＭｃＡｂ－ＭＭＣ（双弹头Ｉ）和１３１Ｉ（或１２５Ｉ）－抗ＡＦ－ＰＡｂ－ＭＭＣ（双弹头Ⅱ），治疗中晚期肝癌４１例（治疗组）。治疗１、２、３次分别有４、２４和１３例，放射剂量（ＭＢｑ／例）依次为１９８．３２±３７．８６，６５１．９±２０２．４和９９８．０±２２０．５。结果治疗后肿瘤缩小率，血清ＡＦＰ下降率和１、２年生存率分别高于同期经动脉灌注（ＴＡＩ）或化疗栓塞（ＴＡＣＥ）的对照组［５７．５％（２３／４０）比３２．５％（１３／４０），Ｐ＜０．０１；６５．７％（２３／３５）比３７．５％（１２／３２），Ｐ＜０．０１；５８．５％比３７．５％，４５．０％比１９．０％，Ｐ＜０．０５］，治疗组病例的进展率（９．８％）明显低于对照组（３５．０％，Ｐ＜０．０１）。结论“双弹头”疗效的提高可能是由于抗体、核素和抗癌药的协同作用而增强了对癌细?

广西肝癌高发农村地区人群HBsAg肝病患病筛查现况分析

目的分析对比广西肝癌高发农村地区防癌筛查人群及其HBsAg阳性人群的常见肝病的流行特点和分布特征。方法选择广西肝癌高发农村地区20岁以上常住居民(15701人)作为研究对象,进行现场流行病学调查、血清生化指标检测、肝脏B超检查和体格检查等,并与其中HBsAg阳性人群(2800人)进行对比分析。结果防癌筛查人群HBsAg阳性率为17.83%,其中男性为20.21%,女性为13.18%,男性HBsAg阳性率明显高于女性。在整个防癌筛查人群,肝占位、肝硬化、肝吸虫感染、脂肪肝、酒精肝和肝大等患病率较高,均男性检出率明显高于女性。防癌筛查HBsAg阳性人群的肝占位、肝硬化、肝炎和肝吸虫感染,男性检出率均明显高于女性,且肝炎、肝硬化和肝占位的检出率明显高于防癌筛查人群。结论广西肝癌高发地区的肝炎、肝硬化和肝占位的患病主要与HBV高感染有关,肝吸虫感染、脂肪肝、酒精肝等常见肝病也同时呈现高患病率状况,尤其男性成年人群是肝病高危人群。各级政府、卫生行政部门对广西肝癌高发农村地区的肝病现状必须高度重视,并采取有效防治措施。

特异性转移因子对宫颈癌患者淋巴细胞转化率和白细胞黏附抑制率的影响

目的 :观察特异性转移因子 (STF)在化、放疗宫颈癌患者的体内生物学活性。方法 :对化、放疗的宫颈癌患者采用 STF行免疫治疗。利用淋巴细胞转化试验及白细胞黏附抑制试验检测外周血淋巴细胞、白细胞。结果 :实验组淋巴细胞转化率有4 5 %显著高于治疗前 (P <0 .0 1) ;对照组治疗前后无显著变化 (P >0 .0 5 ) ,实验组白细胞黏附抑制率显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :山羊来源的 STF对化、放疗的宫颈癌患者有一定的促进淋巴细胞转化率的作用 ,并能显著提高白细胞黏附抑制率。

特异性转移因子对卵巢癌患者、宫颈癌患者淋巴细胞转化试验的影响

目的 :观察特异性转移因子在化疗的卵巢癌患者和放化疗的宫颈癌患者的体内生物学活性。方法 :对化疗的卵巢癌患者和放化疗的宫颈癌患者用特异性转移因子免疫治疗。利用淋巴细胞转化试验检测外周血淋巴细胞。结果 :卵巢癌实验组淋巴细胞转化率有 34 4%显著高于对照组 (P <0 0 1)。宫颈癌实验组淋巴细胞转化率有 45 %显著高于治疗前 (P <0 0 1)。结论 :山羊来源的特异性转移因子对化疗卵巢癌患者和放化疗宫颈癌者有促进淋巴细胞转化率的作用。

广西21世纪初食管癌死亡趋势及减寿分析

目的了解广西食管癌的死亡趋势及对居民健康的危害,为制定广西食管癌防治措施提供科学依据。方法对2004～2005年广西食管癌死亡回顾性调查资料进行统计分析,计算食管癌粗死亡率、标化死亡率、减寿数和减寿率等疾病危害分析指标。结果广西21世纪初食管癌的粗死亡率为4.17/10万(男性5.38/10万,女性2.84/10万),占恶性肿瘤死亡的3.53%,在恶性肿瘤死亡中排第6位;男、女性别比为1.9∶1,差异有统计学意义(P<0.01);减寿人数为2175人年,减寿率为0.07‰。与20世纪70年代和90年代相比,食管癌粗死亡率呈上升,但标化死亡率则呈下降趋势。结论广西21世纪初食管癌的标化死亡率呈下降趋势,食管癌死亡对广西居民的危害程度男性高于女性。

广西鼻咽癌死亡的流行趋势分析

目的描述2004～2005年广西鼻咽癌死亡的流行特征,分析20世纪70年代至2005年30年间广西鼻咽癌死亡的流行趋势。方法采用多阶段分层抽样的方法选取广西9个县作为样本点,调查样本点居民2004～2005年的死亡原因,然后与前两次死因调查所得的鼻咽癌死亡情况相比较,分析广西鼻咽癌死亡的流行特征和趋势。结果 2004～2005年广西鼻咽癌的粗死亡率为6.61/10万(其中男性死亡率为9.53/10万,女性为3.40/10万)。1964年中国人口标化率为4.56/10万。死亡率男女性别比为2.80∶1。鼻咽癌占所有恶性肿瘤死亡的5.60%,居恶性肿瘤死亡的第4位。广西鼻咽癌死亡的年龄分布曲线大致呈双峰状;地区分布很不均衡;20世纪70年代至今这30年间,其粗死亡率和标准化死亡率均呈下降后又上升的趋势。结论广西居民鼻咽癌死亡率上升、死亡年龄高峰前移等现象值得监测机构的进一步关注。

卵巢癌特异性转移因子的临床疗效研究

目的:探讨卵巢癌特异性转移因子(STF)治疗卵巢癌的临床疗效。方法:将121例卵巢癌患者随机分成实验组和对照组,两组分别为52例和69例。对照组给予手术、化疗等常规治疗,实验组则在常规治疗的同时加用卵巢癌STF。结果:实验组的生存率高于对照组,但差异尚无统计学意义(P>0.05).其中使用≥2疗程卵巢癌STF组的生存时间明显高于使用1个疗程组及对照组(P<0.05),而使用1个疗程组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卵巢癌STF对提高卵巢癌患者的生存率、延长其生存时间可能有效,且其疗效具有量—效关系。

抗卵巢癌细胞膜抗体对卵巢癌细胞体外细胞毒性试验及荷瘤小鼠的体内聚集性的实验研究

目的 :探讨抗卵巢癌细胞膜抗体作为放射免疫治疗载体的可能性 ,及对靶细胞体外裸鼠体内杀伤的相对特异性。方法 :采用补体介导细胞毒性试验 (MTT法 )测定抗卵巢癌细胞膜抗体对靶、非靶细胞比毒性 ;建立 BAL B/ C- m u裸鼠荷人卵巢癌模型 ,用 SPECT显像及病理检查分析 1 31 I标记抗卵巢癌细胞膜抗体在荷人卵巢癌裸鼠的聚集性。结果 :抗卵巢癌细胞膜纯化抗体比抗血清对卵巢癌靶细胞显示了更强的细胞毒作用 ,并且都显示了浓度梯度依赖性。抗卵巢癌细胞膜抗体对靶、非靶细胞比毒性显示了相对特异性 ,对卵巢癌细胞杀伤率高于非靶细胞 (宫颈癌、肝癌、胃癌、O型白细胞 )。并且呈时间依赖关系。1 31 I标记抗卵巢癌细胞膜抗体对荷人卵巢癌裸鼠腹腔注射 3d后 ,肿瘤区即有明显聚集 ,一直持续至第 8天。注射后第 8天 ,行病理检查 ,肉眼见有局部坏死淤血区 ;镜下见癌区组织大片状坏死 ,坏死区可见淋巴细胞浸润。结论 :抗卵巢癌细胞膜抗体对体内、体外卵巢癌细胞有相对特异性靶向性 。

卵巢癌特异性转移因子的制备与鉴定

目的：为了卵巢癌手术后免疫治疗的需要，我们用透析法从用癌组织免疫的山羊脾及淋巴结制备了卵巢癌特异性转移因子（ＳＴＦ）。方法：按中国药典及白细胞粘附抑制试验（ＭＴＴ法）对ＳＴＦ的理化性质和免疫学性质进行了检测和鉴定。结果：所制备的卵巢癌ＳＴＦ符合转移因子质量标准，具有对卵巢癌细胞抗原的特异性。在１５例卵巢癌病人的临床应用中，未发现任何毒副反应。结论：用该法制备的卵巢癌ＳＴＦ，可以安全地应用于卵巢癌的免疫治疗。