柴达木盆地南翼山构造油气成因及成藏分析

南翼山构造油气藏是目前柴西北区发现的最大油气藏。其深层E32是凝析气藏,浅层N22是正常密度的油藏,这种分布格局在柴西北区是唯一的,对它进行成藏解剖对整个柴西北区的油气勘探具有重要的意义。结合原油轻烃、天然气碳同位素和生物标志化合物综合判识油源,认为南翼山构造的N22与E32储集层原油来源不同,深层E32油气来自E32烃源岩,浅层N22的油来自N1烃源岩;南翼山构造的油气是就近捕获的产物,不是从南边长距离运移而来,深部凝析气藏的形成受有机质类型和成熟度共同控制。

HPLC-MS/ESI法同时检测血浆中4种非典型抗精神病药物

目的 建立同时测定血浆中的非典型抗精神病药利培酮、氯氮平、奥氮平和奎硫平HPLC-MS/ESI法。方法样品经碱化后用乙醚2次提取,采用NUCLEODUR C18(2.0 mm×125 mm,3μm)柱,水(甲酸:2.7 mmol·L-1,醋酸铵:10 mmol·L-1)-乙腈(53:47,v/v)为流动相,以地西泮为内标,电喷雾电离源正源(ESI+)选择离子峰检测。结果 氯氮平和奎硫平在20～1000μg·L-1内,利培酮和奥氮平在1～50μg·L-1内线性关系良好,4种药物的萃取回收率均>90％,方法回收率均>95％,日间差和日内差均<15％。结论 此方法准确、灵敏、简单,适用于这4种药物的常规治疗药物浓度监测(TDM)、药物动力学及代谢机制的研究。

HPLC-MS同时测定4种新型抗抑郁药物的血药浓度

目的:建立一种快速灵敏的同时测定血浆中氟西汀、西酞普兰,帕罗西汀及文拉法辛浓度的 HPLC-MS 方法,监测这4种药物的血药浓度,为临床用药提供依据。方法:以氟伏沙明作为内标,样品碱化后固相萃取,用 MACHEREY-NAGEL C_(18)反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm,Germany)进行分离,以乙腈-缓冲盐(30 mmol 醋酸铵和0.6‰甲酸)(65:35)为流动相,柱温40℃,流速0.85 mL·min^(-1)。采用质谱电喷雾电离源(ESI)将样品离子化,选择性离子监测(SIM)准分子离子峰。结果:氟西汀、西酞普兰、帕罗西汀,文拉法辛及内标氟伏沙明在9 min 内完全分离;各物质在5～1000 ng·mL^(-1)时线性关系良好,相关系数均大于0.9964;萃取回收率均大于73.2%;方法回收率均大于95.0%;最低检测浓度:氟西汀0.5 ng·mL^(-1)、西酞普兰0.3 ng·mL^(-1)、帕罗西汀0.3 ng·mL^(-1),文拉法辛0.1 ng·mL^(-1);日内日间变异系数均小于15%。结论:本方法简便快速,灵敏准确,可用于血药浓度的临床监护、中毒分析,药物动力学以及代谢机制的研究。

用于油田污水处理的纳米TiO_2光催化剂的初步研究

采用正交设计实验方法,以亚甲基蓝在20 mg/L水溶液中的光降解率为性能指标,研究了TiO2凝胶的制备方法,确定正钛酸四乙酯、乙醇、水、醋酸的最佳配比为5∶30∶3∶2。将按此工艺制备的TiO2凝胶陈化几天后承载于钛板上,在不同温度下煅烧,由煅烧物的X射线衍射图谱得知,锐钛相纳米晶粒随煅烧温度升高(250-600℃)而增大,光降解率则在煅烧温度为550℃时达到最高,超过80%,550℃为最佳煅烧温度。将3 g催化剂载于10×10(cm)钛板上,置于盛有3 L彩南油田污水的光解槽中,紫外灯装于水面以上10 cm处,光照30 min后,污水中溶解氧(0.015 mg/L)减少66.7%,硫化物(8 mg/L)减少50%,SRB菌(2.5×104个/mL)和TGB菌(6.0×103个/mL)减少99.9%和99.6%,悬浮物(28 mg/L)减少82.1%,含油量(86.5 mg/L)减少88.7%,腐蚀率(1.145 mm/a)则增加74.7%。图3表2参9。

腺病毒表达载体对骨髓间充质干细胞分化能力的影响

目的研究腺病毒感染骨髓间充质干细胞(MSC)对MSC分化潜能的影响。方法利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒感染传至3代的人MSC,分别在感染后第2、4、8和16天收集细胞,提取总RNA,利用RT-PCR检测感染前后MSC中内胚层标志基因CYP51、中胚层标志基因SM22α、外胚层标志基因槽蛋白(nestin)、多分化潜能标志基因OCT4和可变剪切因子基因nPTB的表达。在腺病毒感染MSC7d后,利用成脂肪诱导剂继续诱导培养14d,用油红O染色观察MSC向脂肪细胞分化情况。结果RT-PCR检测显示,MSC中CYP51、SM22α、nestin、OCT4和nPTB在腺病毒感染后2、4、8和16d时仍有表达。腺病毒感染7d后的MSC仍可向脂肪细胞分化,且分化效率同正常MSC一致。结论腺病毒载体感染MSC后,不会影响MSC的分化能力,可以作为MSC诱导分化机制研究的基因表达载体。

利培酮及其活性代谢产物的药动学研究

目的研究利培酮(risperdal)及其活性代谢产物9-羟基利培酮(9-OH-risperdal)在中国女性精神分裂症患者的临床药动学。方法单周期实验,20例女性患者经过17d的利培酮治疗,收集系列标本,高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定血浆中的药物浓度。结果利培酮吸收迅速,其tmax和t1/2分别为1.6和3.3h。9-羟利培酮的tmax和t1/2分别为2.6和25.1h。利培酮和9-羟基利培酮的ρassv分别为30.5和136.8μg.L-1,AUC0ss-12分别为482.4和1744.3μg.h.L-1。利培酮的CL/F和V/F分别为8.4L.h-1和33.2L。结论利培酮和9-羟基利培酮的血药浓度,尤其是利培酮,存在着巨大的个体差异。结果表明,治疗药物浓度监测对维思通的合理用药有重要意义。

用权重基因共表达网络分析识别心脏重构关键节点基因

目的采用权重基因共表达网络分析方法(WGCNA)挖掘心肌梗死后心脏重构的关键节点基因,并研究其与ACE1和ACE2的关系。方法从NCBI的GEO下载2个心肌梗死后心脏重构的全基因组表达数据GSE7487和GSE738;数据初处理后,用WGCNA构建基因共表达网络,识别与心脏重构相关的模块与关键节点基因,分析关键节点基因与ACE1和ACE2的关联性;并在心肌梗死后心脏重构大鼠模型中验证它们的关系。结果分析发现在GSE7487,17个模块中有6个模块与心脏重构相关,模块基因富集于16条KEGG信号通路。在GSE738,5个模块与心脏重构相关,模块基因富集于15条KEGG信号通路,其中有10条信号通路与第一组数据结果相同,这些信号通路涉及心肌肥厚病理、氧化磷酸化、代谢等。进一步利用模块内连通性和基因重要性找到了一些心脏重构的关键调控基因,如钙依赖磷酸酶调节子(RCAN1)。RCAN1表达与ACE1表达高度相关,但与ACE2不相关。在动物模型中验证结果与上述结果一致。结论权重基因共表达网络分析方法是一个高效的系统生物学方法,应用本方法发现了心脏重构的关键节点基因,其中RCAN1可能影响ACE1-ACE2在肾素血管紧张素系统中的平衡。

阿奇霉素分散片人体药动学和相对生物利用度研究

目的对阿奇霉素血药浓度测定方法进行改进,研究阿奇霉素分散片的相对生物利用度。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药,分别口服单剂量阿奇霉素试验制剂及参比制剂500 mg后于不同的时间点采血,100μL血样经乙腈沉淀蛋白后,HPLC-MS/MS检测。DAS2.0软件计算两者的药物动力学参数,并评价试验制剂的生物等效性。结果阿奇霉素在1~1 000 ng.mL-1范围内线性好,日内或日间差均小于1 0%,准确度在97%~110%。稳定性良好。萃取回收率至少大于91%。受试药与对照药的药动学参数t1/2,Tmax,Cmax,AUC0~t,AUC0~∞,分别为：（40.3±6.5）h,（2.1±0.7）h,（541.7±179.4）ng.mL-1,（4 772.4±913.9）ng.h.mL-1,（5 346.9±1 300.0）ng.h.mL-1和（35.6±5.1）h,（1.8±0.5）h,（584.9±147.3）ng.mL-1,（5 059.5±1347.4）ng.h.mL-1,（5 480.5±1 484.3）ng.h.mL-1。结果显示：单剂量给药后,阿奇霉素受试制剂的相对生物利用度为（99.4%±28.3%）。结论本方法简单快速,灵敏可靠,成功应用于阿奇霉素生物等效性研究,阿奇霉素试验制剂相对参比制剂生物等效。

HPLC-MS法检测利培酮与9-羟利培酮的血浆浓度及在临床药动学的应用

目的:建立 HPLC-MS 法测定利培酮及其代谢物9-羟利培酮的血浆浓度,以研究其在华人女性精神病人体内的药动学。方法:24名华人女性精神分裂症患者,口服多剂量的利培酮片,在设计的时间点取静脉血;分取血浆0.5mL,经0.1mol·L^(-1)氢氧化钠溶液0.1mL 碱化和5.0mL 乙醚萃取处理;采用 MACHEREY-NAGEL C_(18)反相色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-30mmol·L^(-1)醋酸铵和1.7mmol·L^(-1)甲酸(85:15)流动相,HPLC-MS 内标(喹硫平,[MH]^+,m/z=384)选择性正离子检测法测定利培酮([MH]^+,m/z=411)和9-羟利培酮([MH]^+,m/z=427)的血浆浓度。结果:利培酮在0.5～200μg·L^(-1),9-羟利培酮在5～250μg·L^(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.9905及 r=0.9926),最低检测浓度为0.5μg·L^(-1)。萃取回收率均大于78.4%,方法回收率均大于90%,日内与日间的相对标准偏差均小于14.2%。24例精神分裂症患者多剂量服用4mg 利培酮片后利培酮及其代谢物9-羟利培酮的主要药动学参数如下:达峰时间 t_(max)分别为(1.7±0.99),(2.3±0.74)h;半衰期 t_(1/2)分别为(3.1±1.4),(25.3±8.1)h;稳态最高血药浓度 C_(max)^(SS)分别为(84.8±54.5),(145.7±41.1)μg·L^(-1);稳态最低血药浓度 C_(mm)^(SS)分别为(13.6±17.5),(79.5±23.7)μg·L^(-1);平均稳态血药浓度 C_(av)^(SS)分别为(30.5±26.5),(136.8±37.2)μg·L^(-1)。利培酬的 C_(0→12)^(SS)为(451.8±404.3)μg·h·L^(-1);9-羟利培酮的 C_(0→48)^(SS)为(3986.2±1175.8)μg·h·L^(-1);C_(0→∞)^(SS)分别为(482.1±418.8),(5511.6±1975.5)μg·h·L^(-1);消除速率常数 K_e 分别为(1.6±0.9),(2.6±0.8)h^(-1);利培酮的表观清除率 CL/F 和表观分布容积 V/F 分别为(88.9±62.1)L·h^(-1)和(361.4±282.3)L。结论:该方法简便快速和可靠,适用于利培酮和9-羟利培酮的临床药动学研究。

HPLC-MS/MS法检测辛伐他汀血浆浓度及生物等效性研究

目的改进辛伐他汀血药浓度测定方法，研究辛伐他汀的相对生物利用度。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药，分别口服单剂量辛伐他汀试验制剂及参比制剂40mg后于不同的时间点采血，200μL血样经1mL乙醚1次萃取后，HPLC—MS／MS检测。DAS2．0软件计算两者的药物动力学参数及相对生物利用度，并评价试验制剂的生物等效性。结果辛伐他汀在0．1-20ng·mL^-1线性好，日内或日间差均〈6％．准确度在101％～109％，稳定性良好，萃取回收率≥82％。受试药与对照药的药动学参数t1/2，tmax，Cmax，AUC0-t，AUC0-∞，分别为：（5．3±5．1）h，（2．2±0．7）h，（4．6±3．0）ng·mL^-1，（24．3±15．7）ng·h·mL^-1，（27．5±21．6）ng·h·mL^-1和（4．5±6．7）h，（1．9±0．7）h，（5．0±3．0）ng·mL^-1，（21．4±13．4）ng·h·mL^-1，（23．9±21．2）ng·h·mL^-1。结果显示：单剂量给药后，辛伐他汀受试制剂的相对生物利用度为（113．1％±17．4％）。结论本方法简单，快速，灵敏，成功应用于辛伐他汀生物等效性研究，辛伐他汀试验制剂相对参比制剂生物等效。

利用质粒介导的miRNA-1-2抑制H9C2中Hand2蛋白的表达

目的构建人miRNA-1-2的真核表达载体,并检测其对大鼠成肌细胞H9C2中Hand2蛋白表达的抑制作用。方法用PCR法体外合成miRNA-1-2前体序列的DNA模板,并定向插入到发夹RNA(hairpin RNA)表达载体pSilencer-4.1-neo上。用脂质体法将构建正确的重组质粒pSilencer-4.1/miRNA-1-2瞬时转染H9C2细胞,检测miRNA-1-2前体转录本(pre-miRNA-1-2)和miRNA-1靶基因Hand2(heart and neural crest derivatives expressed transcript 2)的表达。结果DNA测序表明重组质粒pSilencer-4.1/miRNA-1-2构建正确。pSilencer-4.1/miRNA-1-2转染的H9C2细胞中,pre-miRNA-1-2被有效表达,Hand2 mRNA表达无变化,Hand2蛋白表达被抑制。结论成功构建了miRNA-1-2的真核表达载体,由表达载体介导的miRNA-1能有效抑制Hand2蛋白的表达。

Lox-1基因501G>C和3′UTR*188C>T多态性与急性心肌梗死发病的相关性

目的检测Lox-1501G>C和3′UTR*188C>T多态性在中国汉族人群中的分布及其与急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)发病的相关性。方法利用荧光染料SYBRGreenⅠ标记定量PCR产物,通过PCR生长曲线和融解曲线分析结果进行多态位点的基因分型。分别检测汉族202名AMI患者及161名健康人群Lox-1501G>C和3′UTR*188C>T多态性。随机选取30份经荧光定量PCR分型的标本进行DNA测序鉴定。结果AMI患者和健康人群的Lox-1501G等位基因频率分别为0.834和0.798,Lox-1501C等位基因频率分别为0.166和0.202,Lox-1501G>C基因型频率在AMI组和对照组间差异无统计学意义[OR0.687,95%CI(0.226～2.093);P=0.507]。AMI患者和健康人群的Lox-13′UTR*188C等位基因频率分别为0.681和0.674,Lox-13′UTR*188T等位基因频率分别为0.319和0.326,Lox-13′UTR*188C>T基因型频率在AMI组和对照组亦无统计学意义[OR0.947,95%CI(0.623～1.439);P=0.80]。结论中国汉族Lox-1基因501G>C和3′UTR*188C>T多态性与AMI发病无关。

左氧氟沙星分散片人体相对生物利用度及生物等效性研究

目的研究国产左氧氟沙星片剂的相对生物利用度，并且评价该制剂的生物等效性。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药，分别口服单剂量左氧氟沙星试验制剂及参比制剂，采用反相高效液相色谱法测定血药浓度，计算两者的药动学参数及相对生物利用度，并评价试验制剂的生物等效性。结果口服左氧氟沙星200mg试验和参比制剂的主要药代力学参数，t1／2分别为（11．0±3．2）h和（9．5±2．6）h；Tmax分别为（0．90±0．46）h和（1．3±0．62）h；Cmax分别为（2．7±0．75）μg·mL^-1和（2．65±0．70）μg·mL^-1；AUC0-T分别为（16．6±3．0）μg·h·mL^-1和（16．5±2．6）μg·h·mL^-1；AUC0-∞分别为（18．2±3、9）μg·h·mL^-1和（19．2±3．5）μg·h·mL^-1。按实测值AUC0-T计算，试验制剂对于参比制剂的平均相对生物利用度为（100．6±10．2）％。Cmax、AUC0-T和AUC0-∞三个药动学参数制剂间均无显著性差异（P〉0．05），服药周期对Cmax，AUC0-T和AUC0-∞三个参数亦无明显影响（P〉0．05），Cmax、AUC0-T和AUC0-∞三个药动学参数均存在明显的个体间差异（P〈0．05）。统计结果显示，AUC0-T的置信区间为100．7％～113．0％，AUC0-∞的置信区间为100．1％～112．2％，Cmax的置信区间为95.0％～115．4％，均符合等效标准；Cmax，AUC0-T和AUC0-∞三个参数的双向t检验结果同样符合等效标准；Tmax经非参检验结果合格。结论左氧氟沙星分散片试验制剂相对参比制剂生物等效。

人ACE2基因真核表达载体的构建及其转染人内皮细胞的研究

目的:克隆人血管紧张素转换酶2(ACE2)基因,构建其真核表达载体并将之转染入体外培养的人血管内皮细胞中。方法:采用PCR方法从人胎儿心脏cDNA文库扩增出人ACE2cDNA全长基因,克隆到pcDNA3.1-D/V5-His表达载体上,构建重组真核表达质粒phACE2,经酶切和测序鉴定。采用脂质体法将phACE2转染至人血管内皮细胞中,分别利用实时定量PCR和Western印迹检测重组ACE2的mRNA和蛋白的表达情况。结果:经PCR、酶切和基因序列测定证实重组入载体的片段(2419bp)为目的基因序列,在转染的内皮细胞中发现ACE2的mRNA和蛋白的表达明显增加(P<0.01)。结论:本研究成功构建并表达了pcDNA3.1-hACE2重组真核表达载体,为该基因在高血压病防治中的功效研究奠定了基础。

抑郁症患者多药耐药基因多态性对度洛西汀稳态血药浓度和临床疗效的影响☆

目的探讨抑郁症患者多药耐药1(multidrug resistance 1,MDR1)基因的G2677T和C3435T位点多态性对度洛西汀稳态血药浓度和临床疗效的影响。方法 120例符合中国精神障碍分类与诊断标准第3版(CC-MD-3)抑郁发作标准的抑郁症患者接受度洛西汀治疗8周。在治疗前后采用汉密尔顿抑郁量表评估患者病情,检测8周时度洛西汀稳态血药浓度。检测患者的MDR1基因的G2677T/C3435T多态性。结果 8周后,MDR1基因的G2677T位点的不同基因型患者组之间度洛西汀稳态血药浓度和疗效的差异均有统计学意义(P<0.05),TT基因型组的度洛西汀稳态血药浓度高于GG和GT基因型组[(34.22±2.41)ng/mL,(31.49±3.32)ng/mL,(32.40±2.89)ng/mL,P<0.05],TT型患者组的疗效评分平均秩次较GG型患者组高(70.38 vs 51.65,P<0.05);C3435T位点的不同基因型患者组之间的度洛西汀稳态血药浓度和疗效差异有统计学意义(P<0.05),TT型的度洛西汀稳态血药浓度较CC型和CT型高[(33.99±2.40)ng/mL,(31.53±3.41)ng/mL,(32.32±2.96)ng/mL,P<0.05],TT基因型患者组的疗效平均秩次优于CC基因型组(69.11 vs 51.16,P<0.05)。结论 MDR1基因G2677T/C3435T多态性与度洛西汀稳态血药浓度和疗效可能有关。

HPLC-MS/ESI测定人血浆中米格列醇

目的 建立高效液相色谱 质谱联用测定人血浆中米格列醇浓度的方法 ,并用于健康人体内米格列醇药物动力学研究。方法 采用MACHEREY NAGELCN色谱柱 (4. 6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,柱温 5 0℃ ,以乙腈 甲醇 0 . 0 2 %盐酸水溶液为流动相 ,流速0 . 80mL·min-1;质谱采用电喷雾电离源正源 (ESI+ ) ,定量分析采用选择离子监测 (SIR) ,质荷比为准分子离子峰 ;血浆样品用乙腈沉淀后 ,将乙腈挥干 ,残渣用氯仿 异丙醇提取杂质 ,磷酸液提取药物 ,外标法定量。结果 米格列醇浓度在 32～ 32. 0 0ng·mL-1内线性关系良好 ,相关系数为 0 . 9997,最低检测浓度 5ng·mL-1(S/N =3)。批内、批间RSD符合方法学要求 ,单次服用10 .0mg米格列醇片后药动学参数AUC0～ 12 ,AUC0～∞ ,cmax,tmax,t1/2 分别为 (75 92 . 7± 4 2 0 7 .4 )ng·h·mL-1,(795 7 .6± 4 4 2 5 . 7)ng·h·mL-1,(1883. 9± 912 .3)ng·mL-1,(2 . 4± 0 . 6 )h ,(2 . 5± 0 .9)h。结论 该方法稳定、灵敏度高、操作简单 ,适用于米格列醇血药浓度测定及药动学研究。

人微小RNA-133a(miR-133a)重组腺病毒的构建和鉴定

目的:构建人miR-133a重组腺病毒,研究其在人骨髓间充质干细胞(hMSCs)中的表达。方法:从人基因组DNA中扩增包含miR-133a的PCR产物,并定向插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV。将经pmeⅠ线性化的重组穿梭载体与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化感受态大肠杆菌BJ5183,通过同源重组获得重组腺病毒质粒rAd-mir-133a。将rAd-mir-133a在人胚肾293细胞(HEK293)中包装并扩增出miR-133a的重组腺病毒。将重组腺病毒感染hMSCs,利用RT-PCR和实时定量PCR分别检测初级miR-133a和成熟miR-133a的表达。结果:限制性内切酶分析和DNA测序结果显示,重组腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-miR-133a构建正确。在HEK293细胞中成功包装并扩增出重组腺病毒rAd-miR-133a。rAd-miR-133a感染的hMSCs中初级miR-133a转录子和成熟miR-133a表达显著增强。结论:成功构建了人miR-133a重组腺病毒,并在hMSCs中高效表达出miR-133a,为进行miR-133a的功能研究创造条件。

高效液相色谱质谱串联法检测厄洛替尼血浆浓度

目的建立高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定人血浆中厄洛替尼的浓度。方法 血浆样品经甲醇蛋白沉淀后,以甲醇-(0.1%甲酸+5mmol.L-1 NH4Ac)(60∶40,v/v)为流动相,采用Ultimate XB-C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱进行分离,流速为0.9mL·min-1,通过电喷雾离子化串联质谱,以多反应监测(MRM)方式进行检测。结果厄洛替尼的线性范围为1～2 000ng·mL-1,平均方法回收率在103.5%～109.0%,日内和日间变异均<15%。结论本法简单、快速、灵敏、重现性好,成功应用于厄洛替尼的血药浓度监测。

非典型抗精神病药利培酮的药代动力学研究进展

利培酮(risperidone)是已在中国上市的非典型抗精神病药,由于其疗效肯定,且锥体外系反应及运动功能抑制等药物不良反应少,因而倍受关注。因此本文就利培酮在人体内吸收、分布、代谢、排泄的药代动力学特征,年龄、肝。肾功能损伤等因素对这些过程造成的影响及其他药物的相互作用做一综述。