基于微量筛选模型的48种中草药提取物乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选及评价

采用微量筛选模型考察48种中药提取物的乙酰胆碱酯酶抑制活性。采用不同极性溶剂对中药材进行提取,采用微量筛选模型对不同浓度提取物的乙酰胆碱酯酶抑制活性进行考察,并采用Origin8.0计算其IC50值。结果表明,几种中药材的不同极性溶剂(水、80%乙醇、乙酸乙酯、石油醚)提取物有不同程度的乙酰胆碱酯酶抑制活性。其中黄柏、元胡的80%乙醇提取物,丹参的乙酸乙酯提取物的抑制率较高。当上述提取物在实验体系中的终浓度为76.92 mg/L时,抑制率分别为66.72±0.02%、52.67±0.04%、46.84±0.03%,其IC50值分别为295.12、229.09、1202.26 mg/L。本研究结果为从中草药中快速筛选乙酰胆碱酯酶抑制剂提供了方法和数据支持。

牛膝中齐墩果酸和β-蜕皮甾酮的HPLC法含量测定及指纹图谱研究

建立了中药牛膝的HPLC指纹图谱并同时测定其中齐墩果酸和β-蜕皮甾酮的含量。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,流动相为乙腈-0.6%甲酸,柱温为25℃,检测波长为260 nm,进行了13批次牛膝药材的分析。牛膝药材的HPLC指纹图谱共有16个共有峰,4个特征峰,定量测定了其中两个峰β-蜕皮甾酮和齐墩果酸。通过相似度分析初步断定,不同地域的牛膝药材在质量上存在明显的差异。该研究为建立牛膝药材的质量控制体系提供了方法和技术支持。

山东产区黄芩HPLC定量指纹图谱研究

目的:建立山东产区黄芩药材定量指纹图谱,为黄芩药材的真伪鉴别及质量控制提供方法支持。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,乙腈-水(含1%甲酸、20 mmol·L-1甲酸铵)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为274 nm,进样量5μL,进行了10批次黄芩药材的分析。结果:该分析方法具有良好的精密度、重现性,10批黄芩指纹图谱有17个共有峰,4个特征峰,采用ESI-TOF/MS对4个特征峰进行了指认,10个批次山东产黄芩样品中6种黄酮类化合物含量分布规律相似,其相似度系数均大于0.955 7。结论:黄芩HPLC定量指纹图谱有望成为黄芩样品真伪鉴别及质量控制的有力工具。

pH区带逆流色谱法分离纯化吴茱萸中的吴茱萸碱和去氢吴茱萸碱

目的分离纯化吴茱萸中的活性成分。方法应用p H区带逆流色谱,以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(3:1:3:3,v/v)为两相溶剂体系,上相加入10 mmol/L盐酸作为固定相;下相加入5 mmol/L三乙胺作为流动相,转速850 r/min,流速2.0 m L/min,检测波长254 nm,所得馏分经HPLC检测,并经电喷雾电离(ESI)质谱和核磁共振谱(NMR)鉴定化合物的结构。结果从2 g吴茱萸粗提物中一次性分离得101 mg吴茱萸碱和304 mg去氢吴茱萸碱,其纯度为90.0%和93.1%。结论此法简便、快捷、重现性好、上样量大,适于制备性分离吴茱萸碱和去氢吴茱萸碱。

蛹虫草固态发酵豆渣的功能性成分与抗氧化活性

目的:用蛹虫草固态发酵豆渣,测定豆渣发酵前后功能性成分含量及抗氧化能力的变化。方法:蛹虫草CM-1固态发酵豆渣7 d,测定发酵前后豆渣水提物中虫草素、总酚和多糖的含量,以及DPPH自由基清除力、还原力、ABTS自由基清除能力、铁离子还原力(FRAP)的变化,并用皮尔森相关性分析以及主成分分析研究了虫草素、总酚、多糖含量与抗氧化指标之间的关系。结果:豆渣经蛹虫草CM-1固态发酵,水提物中多糖、虫草素和总酚含量分别是(236.16±39.91)、(1.88±0.04)μg/mg和(11.94±0.33)μg GAE/mg,多糖、总酚含量分别是发酵前的1.42倍和2.15倍。豆渣经过发酵,在提取物浓度为6 mg/m L时,DPPH自由基清除力由24.63%提高到72.4%,还原力由0.11提高到0.38,ABTS自由基清除能力由76.76%提高至88.71%,FRAP由39.08μmol/L提高至269.55μmol/L。主成分分析和相关性分析表明,抗氧化指标与虫草素、总酚、多糖含量具有非常显著的相关性(p<0.01)。结论:用蛹虫草发酵豆渣可以提高豆渣的功能性成分和抗氧化能力,发酵豆渣有望开发成为功能性食品基料及抗氧化食品。

酢辣椒中益生乳酸菌的筛选及其功能特性

为从酢辣椒筛选出具有益生特性的菌株,开发辣椒益生菌产品,本实验从地方特色发酵食品酢辣椒中分离得到16株乳酸菌,以产酸速度、耐人工胃液能力为指标进行初筛,通过生化实验和16S rDNA序列分析方法鉴定;并通过研究菌株对工艺逆境的耐受能力,表面疏水性和自聚合能力以及抑菌活性、抗氧化能力、降解亚硝盐能力和安全特性来评价乳酸菌的益生特性。结果表明:发酵乳杆菌17-1、发酵乳杆菌18-2和短乳杆菌L3-5能耐受0.4%苯酚、溶酶菌和热处理;具有较高的表面疏水性和自聚合能力;能产生具有广谱抑菌效果的细菌素来抑制病原菌的生长;菌株L3-5和17-1具有较高的抗氧化能力;3株菌都具有胆盐水解酶活性和产γ-氨基丁酸能力,并且都属于安全性菌株。综上所述,传统酢辣椒是分离益生乳酸菌新的天然来源,从中分离得到的发酵乳杆菌17-1、发酵乳杆菌18-2和短乳杆菌L3-5可以作为潜在的益生性菌株。

UAE-ZIC-HILIC-DAD同时测定不同产地瓜蒌中核苷和黄酮类成分

目的:建立超声提取-ZIC亲水柱-亲水色谱-二极管阵列发光检测器技术(UAE-ZIC-HILIC-DAD)同时测定不同产地(河北、山东)瓜蒌中核苷和黄酮类成分含量的方法。方法:采用UAE(超声提取)法同时提取瓜蒌中核苷和黄酮类成分,采用ZIC-HILIC色谱柱进行梯度洗脱,对瓜蒌提取物进行分析,并结合主成分分析和聚类分析区分不同产区瓜蒌。结果:建立的UAE-ZIC-HILIC-DAD法可以实现瓜蒌中6个核苷类和3个黄酮类成分含量的同时测定;含量测定结果表明山东产瓜蒌中核苷类化合物含量明显高于河北产瓜蒌;主成分分析和聚类分析法可以区分2个产区样品。结论:该方法实现了对不同产区瓜蒌的综合评价,为瓜蒌质量标准提升提供了方法和技术支持。

红花药材中四种化学成分的高效液相色谱双波长法同时测定

目的建立HPLC双波长法同时测定红花药材中羟基红花黄色素A、芦丁、槲皮素和山柰酚含量的方法,为红花质量标准的研究提供科学依据。方法采用Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）柱,以0.4%甲酸溶液为流动相A,以乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为0.8 ml·min-1,柱温为25℃,检测波长分别为360 nm,403 nm,进样量20μl。结果在上述色谱条件下,羟基红花黄色素A、芦丁、槲皮素和山柰酚分别在0.01-100.00μg·ml-1（r=1.000 0）,0.01-10.00μg·ml-1（r≥0.998 5）,0.01-10.00μg·ml-1（r≥0.998 5）,0.01-10.00μg·ml-1（r≥0.997 5）线性关系良好。平均回收率羟基红花黄色素A为95.1%,芦丁为95.7%,槲皮素为95.2%,山柰酚为95.5%。结论该方法操作简便、重现性好、灵敏度高、结果准确,为控制红花药材质量提供了可靠的方法。