虎杖苷通过AMPK/Nrf2途径调控糖尿病大鼠伤口愈合和血管生成的机制研究

目的:基于AMPK/Nrf2途径探讨虎杖苷(PD)对糖尿病(DM)大鼠伤口愈合和血管生成的作用机制。方法:建立DM大鼠模型,将45只DM大鼠随机分为DM组、DM+PD组和DM+PD+ML385组(n=15),另取15只健康大鼠作为对照组,建立伤口愈合受损的模型,DM+PD组大鼠予PD灌胃(20mg/kg),DM+PD+ML385组大鼠在PD的基础上腹腔注射ML385抑制AMPK/Nrf2通路(30mg/kg)。比较各组大鼠伤口愈合情况,通过免疫组化染色检测分析微血管密度,Westernblot及RT-qPCR分析转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)以及AMPK/Nrf2通路转录和翻译水平。结果:四组小鼠的上述指标比较差异显著(P<0.05)。DM组的伤口愈合百分比、生成血管数目、TGF-β1和VEGF蛋白水平、AMPK和Nrf2 mRNA和蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05)。DM+PD组的伤口愈合百分比、生成血管数目、TGF-β1和VEGF蛋白水平、AMPK和Nrf2mRNA和蛋白表达水平显著高于DM组(P<0.05)。DM+PD+ML385组的伤口愈合百分比、生成血管数目、TGF-β1和VEGF蛋白水平、AMPK和Nrf2 mRNA和蛋白表达水平显著低于DM+PD组而显著高于DM组(P<0.05)。结论:PD可能通过调控AMPK/Nrf2通路诱导血管生成,进而促进DM模型大鼠的伤口愈合。

基于miR-128-3p/SIRT1/自噬探讨虎杖苷促进糖尿病溃疡模型大鼠创面愈合的机制

目的:探究虎杖苷调控微小RNA(microRNA,miR)-128-3p/SIRT/自噬促进糖尿病(DM)溃疡模型大鼠创面愈合的机制。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(70 mg/kg)建立DM模型。将30只DM大鼠随机分为模型组(n=15)、虎杖苷组(n=15)。另取15只健康大鼠作为对照组。3组均通过去皮建立DM伤口损伤模型。虎杖苷组大鼠灌胃虎杖苷(20 mg/kg)。比较各组大鼠伤口愈合情况、愈合周围组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和自噬标志蛋白表达水平。分析miR-128-3p和SIRT1的表达水平。通过双荧光素酶报告在内皮祖细胞中验证miR-128-3p与SIRT1的靶向关系。通过转染miR-128-3p mimic质粒过表达miR-128-3p。结果:第5天,模型组、虎杖苷组大鼠伤口愈合率低于对照组(P<0.05);第10天,虎杖苷组大鼠伤口愈合率高于模型组(P<0.05),低于对照组(P<0.05)。模型组大鼠创面组织中SOD、SIRT1 m RNA相对表达量、SIRT1蛋白相对表达量、LC3Ⅱ蛋白相对表达量、Beclin1蛋白相对表达量、LC3Ⅱ/Ⅰ均低于对照组(P<0.05),而MDA和miR-128-3p水平显著高于对照组(P<0.05)。虎杖苷组大鼠创面组织中SOD、SIRT1 m RNA相对表达量、SIRT1蛋白相对表达量、LC3Ⅱ蛋白相对表达量、Beclin1蛋白相对表达量、LC3Ⅱ/Ⅰ均高于模型组(P<0.05),而MDA、miR-128-3p均低于模型组(P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示miR-128-3p可以与SIRT1靶向结合。转染miR-128-3p mimic后,内皮祖细胞中的miR-128-3p的水平显著升高,并且SIRT1 m RNA和SIRT1蛋白表达水平显著降低。结论:虎杖苷可能通过调控miR-128-3p/SIRT1通路诱导自噬,进而缓解高血糖引起的氧化应激损伤,促进DM模型大鼠的伤口愈合。

断屑槽槽型在控屑过程中对刀具振动的影响

通过ABAQUS有限元软件分别对梯形、直线圆弧型和梯形双槽结构断屑槽刀具切削Ti6Al4V钛合金材料进行三维切削仿真,并分析其切削力的波动,得到断屑槽槽型在控制切屑卷曲过程中对刀具在主运动方向、进给方向和切削深度方向振动的影响。经过仿真发现,梯形、直线圆弧型和梯形双槽结构断屑槽在控制切屑卷曲的过程中对刀具振动的影响各不相同。三种槽型结构中,梯形断屑槽刀具的振动最弱,直线圆弧型断屑槽刀具的振动最强。

小鼠肺癌正位模型的建立

肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,肺癌正位模型的建立是肺癌研究的基础。本研究构建了稳定表达荧光素酶的鼠Lewis肺腺癌细胞株,以非开放性的方式进行肺内注射,监测小鼠的精神状态、行动力、体重,用活体成像系统观察肿瘤大小,并将瘤荷小鼠处死后进行肺部组织活体取材,进行病理检测。研究发现,随着小鼠肺肿瘤的不断变大,小鼠精神状态变差、行动力变弱、体重降低,病变肺叶肺泡结构被大量异型性细胞取代。构建肺癌正位模型操作简单且可重复性高,为深入研究肺癌提供了良好模型。

结直肠癌患者血清miR-1233检测的临床意义及诊断价值

目的探讨miR-1233在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)诊断中的临床应用价值。方法收集经手术后病理诊断为结直肠癌患者85例,同时选择53例结直肠腺瘤(colorectal adenoma,CA)患者为对照组,采用实时荧光定量PCR技术,检测结直肠癌患者、对照组miR-1233水平,采用电化学发光技术检测2组肿瘤标志物水平。结果miR-1233在结直肠癌患者中表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);血清miR-1233诊断结直肠癌患者的曲线下面积(AUC)及95%CI为0.836(0.75~0.91),且诊断结直肠癌具有较高的阳性预测值(82.1%);血清miR-1233与CA724水平呈正相关(r=0.300,P=0.004),与CA19-9水平呈正相关(r=0.315,P=0.003),与CEA水平呈正相关(r=0.434,P=0.001),进行单因素及多元Logistic回归分析,发现miR-1233是结直肠癌发生的独立危险因素,其OR及95%CI为1.923(1.21~2.93)。结论miR-1233升高与结直肠癌关系密切,在诊断和预测结直肠癌发生及疗效观察中具有潜在的临床意义。