转染人CXCR4细胞株的构建及其生物学功能的研究

目的:构建稳定表达人CXCR4基因的L929细胞株,分析CXCR4分子对转基因细胞迁移能力的影响。方法:TRIzol一步法抽提人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA,RT-PCR扩增出CXCR4基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term,与辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达CXCR4分子的L929细胞株;利用微孔隔离小室检测转人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下的迁移能力。结果:构建含CXCR4基因的重组逆转录病毒载体,经转染包装细胞293T后,筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的L929转基因细胞,转入人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下介导迁移。结论:成功构建转染人CXCR4细胞株,为肿瘤迁移模型的研究和鼠抗人CXCR4mAb的制备打下基础。

PD-L1和PD-L2在树突状细胞上的表达及其生物学意义

探讨小鼠髓系DC (CD8α )中PD L1和PD L2的表达及其在T淋巴细胞活化中的作用。采用mCD4 0L CHO和TNF α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载DC 4 8h ;免疫荧光标记检测DC表型 ;RT PCR和realtime PCR检测PD L1和PD L2mRNA转录水平 ;ELISA测定IL 2的分泌水平 ;3 H TdR掺入试验和51Cr释放试验测定DC体外激发T细胞的增殖和细胞毒杀伤率。结果显示 :PD L1和PD L2随着DC的成熟呈上调表达 ,CD4 0配基化DC的PD L1和PD L2均为中度表达 ,TNF α激发的DC为高度表达 ,二者呈现差异性表达 (P <0 0 5 ) ;CD4 0配基化髓系DC分泌IL 2的量明显高于TNF α组 (P <0 0 5 ) ,体外刺激T增殖和激活CTL能力在CD4 0配基化DC组最高 (P <0 0 5 )。提示CD4 0配基化的小鼠髓系DC呈现PD L1和PD L2的中度表达 ,IL 2大量分泌 。

小鼠骨髓前体细胞来源的树突状细胞超微结构

无菌制备BALB/c小鼠骨髓细胞,按常规方法分离纯化出树突状细胞(DCs),采用GM-CSF和IL-4诱导后,以凋亡肿瘤细胞负载未成熟DCs,再分别加入mCD40L-CHO细胞和TNF-α继续培养48h,按常规方法分别制备各发育阶段DCs的超薄切片。用透射电镜观察小鼠DCs在不同发育阶段的超微结构特征,并比较凋亡肿瘤细胞负载的小鼠DCs被CD40L和TNF-α刺激后超微结构的差别。实验结果证实DCs在分化发育成熟中存在异质性;DCs可通过吞噬凋亡的肿瘤细胞负载抗原;CD40配基化对DCs的分化成熟作用优于TNF-α。

加油站油气回收验收及不确定度评定

本文针对油气回收验收检测过程中涉及到的项目一一进行了解释,并重点论述了气液比的不确定度来源、分析方法及结果。现有和新建加油站进行油气回收系统设计,势在必行,既解决资源浪费、环境污染和火灾隐患等问题,又符合国家标准要求。

关于CNG加气机检定装置建标及后续检定工作经验

随着我国经济社会的快速发展,天然气作为一种清洁能源得到了很好的发展。天然气加气机作为一种商品调节工具,在新形势下需要提高和保证天然气加气机标准计量的测量精度,其计量精度必须控制在法定范围内。结合工作实践和研究经验,对天然气压缩机标准测试设备进行了研究,以期为同行提供实践参考。

提升计量技术机构能力建设的途径探讨

随着社会经济的快速发展,对计量技术机构的检测能力也提出了新的要求,提升计量技术机构检测能力是社会经济发展的必然要求,计量技术机构应该在加大软硬件设施投入力度的基础上,提高自身检测管理水平,同时加大科研创新能力,只有这样才能切实提高计量检定水平。本文主要针对计量技术机构的能力建设和计量技术机构能力建设中遇到的问题以及提升计量技术机构能力建设的途径进行简要分析。

汽车油罐车容量测量不确定度分析

汽车油罐车是装运轻质油的重要工具。经检定后的油罐可作为计量器具用于油品交接、贸易结算。油罐车的检定是根据JJG133-2005《汽车油罐车容量》检定规程进行。使用二等金属量器加水注入到汽车油罐,记录量器的容量升数,并使用石油专用丁字尺测量空高。将测得的容量和空高值输入专用软件中,通过插值算法编制出容量表。汽车油罐车的油品交接和贸易结算通过使用石油专用丁字尺测量空高值,查询容量表进行。

试论燃油加油机计量检定相关问题及信息化建设

近些年,我国社会经济的不断发展与进步,增加了燃油的需求量,燃油属于推动我国国计民生发展的主要能源,所有为了更好的保障我国消费者的合法权益,促进我国社会经济稳定发展,就需要全面提高油品计量设备的准确性、可靠性。加油机计量器是目前常用的油品计量设备,本文通过对燃油加油机计量检定相关问题进行探讨,提出有效的实施对策,进一步推进我国燃油市场信息化建设。

食品包装中自动定量计量系统研究

对食品包装自动定量计量系统的相关技术和结构组成进行说明,其主要技术包括传感器技术、信号预处理技术、A/D 转换技术、微控技术和人机交互技术。深入分析了食品包装自动定量计量系统的硬件和软件设计,主要控制系统为核心,结合电源系统、数据采集系统、储存系统、通信系统和人机交互系统构成整个硬件系统,Re-alviewMDK 软件为开发工具,设计了控制系统的软件实施办法。最后从物料计量精度、硬件抗误差能力和软件控制精度三个方面入手,提出完善该系统的解决方案。

SHH方案诱导胚胎干细胞分化为神经干细胞移植促进小鼠损伤脊髓结构与功能的恢复

目的比较分析体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为神经干细胞的方法并观察神经干细胞移植后对脊髓损伤小鼠的治疗作用。方法采用维甲酸(retinoic acid, RA)方案及音猬因子(sonihedgehog,SHH)方案进行体外诱导培养,然后用抗Nestin、NeuN、GFAP、O1抗体进行免疫细胞化学染色鉴定。脂质体转染法将LacZ基因导入小鼠胚胎干细胞,继而在SHH方案诱导后移植进入脊髓横断小鼠体内,分别于移植后1个月、2个月冰冻切片进行X-gal染色追踪ES细胞并对X-gal阳性细胞行免疫荧光组织化学染色鉴定细胞类型;BBB评分分析了小鼠后肢运动功能的恢复。结果RA与SHH方案得到的Nestin阳性细胞的比例分别为32.54%和68.51%。细胞移植后1个月、2个月均可在脊髓横断小鼠体内检测到大量的X-gal阳性细胞,它们与宿主的脊髓组织相整合。免疫荧光组织化学染色显示X-gal阳性细胞主要表达ChAT和MBP。细胞移植组BBB评分高于对照组。结论与RA相比,SHH是一种较为高效的诱导剂,经SHH诱导得到的神经干细胞移植到脊髓横断的小鼠体内至少可存活2个月,表达成熟用胆碱能神经元的标志及髓鞘碱性蛋白,并且可以促进脊髓损伤小鼠运动功能的恢复。

加油机计量检定中存在的问题及重要环节检定分析

为对加油机市场的良好秩序进行有效维护,必须要加强对加油机计量检定工作的管理。但是当前加油机计量鉴定中仍旧存在一定的问题,所以提出有效的解决对策至关重要。文章简述了加油机的工作原理及重要环节,分析了其检定过程中存在的问题,探讨了具体的解决策略,希望给有关的工作人员一些借鉴和参考。

试论压缩天然气(CNG)加气机检定方法与检定注意事项

为保证天然气在利用方面起到良好的作用,首先就要保证CNC设备具备良好的质量,要求技术人员准确掌握CNC设备的运行原理,确定设备运行过程中存在的影响因素,据此确定CNC设备鉴定方式的合理性。文章阐述了天然气加气机的构成、工作原理、CNC设备检定工作的重要性,同时阐述压缩天然气机检定中存在的问题,从而分析解决的途径。

定量包装商品净含量不合格的原因及对策浅析

随着我国社会经济的不断发展,我国的市场经济繁荣极大地促进了我国商品经济的发展,形式多样的产品商业化程度也在不断提高,定量包装产品是我国当前市场中主要的商品。但是在对定量包装商品的检测过程中,并不是所有的定量包装商品都能够达到净含量的标准,依然有少部分的定量包装商品存在着不合格的现象,在一定程度上危害到了消费者的权益。文章对定量包装商品净含量不合格的原因进行了深入的分析与研究,并提出了一些合理的应对策略,旨在进一步提高定量包装商品的净含量合格率,保护消费者的基本权益。

关于加油机计量常用作弊手段的相关研究

近年来,我国汽车相关产业迅速崛起,汽车用户逐年上升。为了切实维护众多汽车用户的消费者权益,在加油机计量方面,有关部门必须加强工作的合法性与规范性,大力防控加油机计量作弊行为。文章对常见的加油机计量工作的常见作弊手段进行分析,并提供了针对性的作弊防控对策,希望可以为打击加油机计量作弊行为,维护汽车燃油消费者权益提供参考。