miR-23a/27a/24基因簇g.65307469G>A突变对大白猪产仔数和启动子活性的影响

[目的]本文旨在研究大白猪miR-23a/27a/24基因簇启动子突变位点多态性与产仔数性状的关系及潜在机制,为母猪繁殖性状的分子育种提供新的潜在遗传标记。[方法]利用混池测序技术筛选猪miR-23a/27a/24基因簇启动子突变位点,直接测序法对大白猪群体(n=345)miR-23a/27a/24基因簇突变位点进行基因分型,计算遗传多样性;用线性模型对突变位点多态性与产仔数性状进行关联性分析;构建不同等位基因类型启动子载体,转染猪卵巢颗粒细胞,通过检测荧光素酶活性分析突变对启动子活性的影响;用生物信息学方法预测不同等位基因类型启动子潜在结合的差异转录因子,用荧光素酶活性分析差异转录因子对不同等位基因类型启动子活性的影响。[结果]在猪miR-23a/27a/24基因簇启动子-648 nt(Chr.2,65307469 nt)处发现1个新的G/A突变,命名为g.65307469G>A。在大白猪群体中发现3种基因型(GG、GA和AA),其中GG为优势基因型(89.57%),G等位基因为优势等位基因(94.64%)。关联性分析发现,GA基因型母猪的总产仔数(TNB)比GG基因型母猪每胎高0.56头(P<0.05)。荧光素酶活性分析结果显示G等位基因类型启动子活性显著高于A等位基因类型(P<0.05)。在不同等位基因类型启动子间发现1个潜在结合的差异转录因子死亡相关蛋白1(THAP1),成功构建猪THAP1基因过表达载体,共转试验结果显示转录因子THAP1对不同等位基因类型启动子活性均无显著影响(P>0.05)。[结论]miR-23a、miR-27a和miR-24是大白猪产仔数性状的候选基因,g.65307469G>A突变抑制miR-23a/27a/24基因簇的启动子活性,但与转录因子THAP1无关。

miR-34a通过激活lncRNA NORHA转录诱导猪卵巢颗粒细胞早期凋亡

【目的】探索miR-34a诱导GCs凋亡的RNA激活机制,为揭示猪卵泡闭锁的分子机理、筛选调控母猪繁殖的小核酸调节物提供依据。【方法】利用生物信息学方法分析猪miR-34a特征及其与潜在靶基因lncRNA NORHA启动子的结合情况。利用核质分离技术分析猪GCs中miR-34a的亚细胞定位。qPCR检测miR-34a对猪GCs中NORHA、凋亡标志基因BCL-2和BAX表达的影响。利用荧光素酶活性分析验证miR-34a对NORHA启动子转录活性的靶向调控关系。利用染色质免疫沉淀(ChIP)检测miR-34a对猪GCs中NORHA启动子miRNA反应元件(MRE)处AGO2和组蛋白修饰因子富集情况。利用western blot和流式细胞术分析miR-34a通过NORHA对下游因子FOXO1的表达和细胞凋亡的调控作用。【结果】猪miR-34a为基因间miRNA,其序列在哺乳动物中具有高度保守性。亚细胞定位分析显示,miR-34a在猪GCs中细胞核与细胞质均有分布。生物信息学分析显示miR-34a的MRE位于NORHA启动子-194 nt至-173 nt处,且两者结合自由能为-23.9 kcal·mol^(-1)。qPCR结果表明miR-34a显著上调猪GCs中NORHA的表达。荧光素酶活性分析显示,miR-34a极显著上调NORHA启动子报告载体活性,而对MRE突变型启动子活性没有显著影响。ChIP试验显示,miR-34a可增加NORHA启动子MRE处RNA诱导转录激活(RITA)复合物核心成员AGO2和转录激活型组蛋白H3K4me3的富集,而减少转录抑制型组蛋白H3K9me3的富集。共转试验显示,敲减NORHA可显著或极显著逆转由miR-34a过表达引起的FOXO1蛋白水平和早期凋亡率的上调,以及BCL-2/BAX比值的下调。【结论】细胞核miR-34a是猪GCs中的内源性小激活RNA(saRNA),通过靶向激活促凋亡lncRNA NORHA的转录,诱导猪GCs早期凋亡(细胞膜完整),可能参与猪卵泡闭锁的启动。

Al(OH)_3、ISA206及Poly(I:C)免疫佐剂对灭活口蹄疫140S抗原免疫效果的影响

目的选取Al(OH)3、ISA206及Poly(I:C)3种佐剂,分别与灭活口蹄疫病毒(FMDV)配制成疫苗,并通过小鼠实验比较和评价3种佐剂的免疫效力。方法以口蹄疫O型病毒为毒种,经细胞培养传代,获得较高滴度的病毒培养物,并经化学方法灭活制成140S口蹄疫完整病毒粒子抗原。在蔗糖密度梯度定量后分别与Al(OH)3、ISA206及Poly(I:C)3种佐剂配合制作口蹄疫灭活疫苗。疫苗经肌肉注射免疫Balb/c小鼠,通过检测抗体效价评价机体产生的体液免疫反应。通过检测体外刺激免疫小鼠脾淋巴细胞后产生的细胞因子以及淋巴细胞增殖实验评价机体产生的细胞免疫反应。结果 ISA206口蹄疫灭活苗和Poly(I:C)口蹄疫灭活苗诱导小鼠产生的抗体效价较高;通过体外刺激实验发现,ISA206口蹄疫灭活苗免疫组小鼠脾淋巴细胞在抗原刺激后,产生的IFN-γ和IL-4含量最高;通过淋巴细胞增殖实验发现,ISA206口蹄疫灭活苗免疫组小鼠脾淋巴细胞的增殖能力最强(P<0.05)。结论ISA206佐剂在配合灭活口蹄疫140S完整病毒粒子进行免疫时所表现的免疫效力最高。

TLR-7／8激动剂作为疫苗佐剂的最新研究进展

小分子TLR-7和TLR-8激动剂(agonist)具有很强的抗病毒与抗肿瘤性能,引起了科研人员的极大关注。最为重要的当属咪唑喹啉衍生物家族(imidazoquinoline),包括咪喹莫特(imiquimod),瑞喹莫特(resiquimod)等。通过对不同种类的咪唑喹啉衍生物的研究,TLR-7和TLR-8的多种新功能被揭示了出来。TLR-7/8介导对中心转录因子的调节,可以诱发炎性细胞因子和其他调节成分的产生,从而在抗病毒与抗肿瘤的免疫反应中起到重要作用。试验证实,咪唑喹啉衍生物与蛋白质疫苗、多肽疫苗和DNA疫苗协同作用后,诱发的免疫反应倾向Th1,同时产生大量的细胞因子及趋化因子,这使得其有可能成为一种新型的疫苗佐剂。越来越多的咪唑喹啉衍生物(imidazoquinoline)被研发出来,并且应用于试验及临床当中,为寻找一种新的、简单而安全的疫苗佐剂开辟了新思路。

口蹄疫及其防制简介

口蹄疫（Foot and Mouth Disease,FMD）是致偶蹄动物的一种急性热性、高度接触性传染病。患病动物的口、舌、唇、蹄、乳房等部位往往出现示病性水泡,破溃后会形成烂斑。该病以传播迅速、感染率高为主要特点,国际兽疫局（OIE）将其列为A类传染病之一。

二汽往事

从1953年到1969年,二汽的建立经历了"三起三落",然而命运多舛的二汽人却用一种艰苦创业的精神,告诉后人一段曲折的历史。半个世纪过去了,我们在记录新二汽人的奋斗历程时,总不免会想起那段令人难忘的岁月。

“慧眼”识别世界——记中国科学院自动化研究所模式识别国家重点实验室刘成林研究员

人类对世界的认知，归根到底来自外在的符号与内在的思维。那么怎样联接这两个世界呢？需要通过对感知信号的分析．这些信号以图像、视频、声音等形式存在着．被称为是模式。对这些模式的识别有助于人们实现获取外部环境知识并与环境进行交互的目的。这就涉及到了一个研究领域——模式识别。这．是一个崭新的认知领域。

绿色家园的守护神——访中国林业科学院森林生态环境与保护研究所首席专家张真

法国导演雅克·贝汗用唯美的镜头为我们展现了神奇美妙的昆虫世界．这是电影《Microcosmos》带给我们的美。然而，现实生活中的昆虫并不像电影镜头中的虫子可爱，它们中的很多种类是植物的天敌．危害着林木，进而危害人类。为了保卫地球的一抹绿，很多林业科学家与虫子开始了角力。中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所的首席专家、中国林学会森林昆虫分会副理事长张真．就是其中的一员。

神圣的职责——记解放军第163医院神经外科主任卢明

在星城长沙的浏阳河畔．坐落着一座现代化的军队中心医院——解放军第163医院。它创建于1940年，现占地530亩，拥有床位900张，开设临床医技科室为33个，设置专业42个，是一所集医疗、科研、教学为一体的军队综合性医院。2005年，医院被中国人民解放军总后勤部批准为“三级甲等”医院，随后，它又被授予“全国百姓放心示范医院”称号。

国家队的守护者——记北京大学第三医院运动医学研究所所长敖英芳

走进北京大学第三医院（以下简称北医三院）的运动医学研究所，墙上挂着几张顿有纪念意义的照片：冼东妹、冯坤、李小双、李娜，还有刚刚在游泳世锦赛上实现零突破的中国男游新贵张琳……一个个名震体坛的健将们与医院工作者纷纷合影。或许你已经猜到了．这个特殊的医学研究所服务的对象主要都是一些运动员，当然普通百姓也是其主要的服务对象。而这些就医的运动员中，

通信安全的“守门员”——记北京邮电大学信息与通信工程学院责任教授景晓军

2008年6月2日，在第五届全国军转干部表彰大会上，北京邮电大学信息与通信工程学院教授景晓军在众多候选人中脱颖而出，以中央单位排名第一的评选结果被授予“全国模范军队转业干部”荣誉称号，受到了党和国家领导人的亲切接见并合影留念。19天后，在2008年《科学中国人》年度人物颁奖典礼上，景晓军又一次走进公众视线，

奖励与产业:螺旋式的互助推进——访中国照明学会理事长王锦燧

2008年的那个夏天，华尔街的金融阴霾迅疾蔓延，风暴掠过之处，经济一片哀鸣，被称为全球经济发动机的中国也未能幸免于此难。珠三角，中国经济最具活力的一片乐土，顿时在风暴的冲击下陡生寒意，外贸出口严重下滑，经济增长骤然放缓，一大批企业迎来了艰难经营的时日。珠三角，也被称作中国照明电器产业的群居地，金融风暴下的“珠三角照明”经受了建国以来最严峻的考验。

草鱼胰岛素样生长因子1受体基因cDNA全序列的克隆及功能

本研究采用cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)IGF-IR基因全长cDNA序列,并对该基因在草鱼不同时期胚胎和成鱼不同组织中的表达进行了分析。序列分析表明,草鱼IGF-IR基因cDNA序列全长5 741 bp,包括5′端非翻译区822 bp,3′端非翻译区581 bp,开放阅读框4 338 bp,共编码1 445个氨基酸。序列比对结果显示,草鱼IGF-IR可能属于a型,该基因编码的氨基酸序列与鲤(Cyprinus carpio)IGF-IRa、斑马鱼(Danio rerio)IGF-IRa和人类(Homo sapiens)IGF-IR的相似性分别为95%、93%和66%,具有较高的同源性,表明该基因在长期进化中具有较高的保守性。RT-PCR结果表明,该基因从16 hpf(hours post fertilization)胚胎期到出苗期都有表达,在成鱼大部分组织中均有表达。原位杂交结果显示,草鱼IGF-IR mRNA在不同时期胚胎组织中广泛存在,其中在脑部、脊索和尾部等生长旺盛组织的细胞中表达量较高。本研究为进一步探索草鱼IGF-IR基因在生长发育信号通路中的作用和育种提供了基础资料。

中国中西医结合学会科技奖揭晓

本刊讯（记者 周春雪）日前，在浙江省杭州市举行的“2008年度中国中西医结合科学技术奖”颁奖大会上，有35项中西医结合医学领域的科学研究成果获奖。

中国数学界“三大奖”名花有主 8位数学大师喜获殊荣

今天上午，中国数学会2009年学术年会在厦门大学建南大会堂开幕。开幕式上，中国数学会第九届“华罗庚数学奖”、第十二届“陈省身数学奖”和第九届“钟家庆数学奖”分别举行了颁奖典礼。张恭庆、李邦河等8位数学大师分别问鼎数学界“三大奖”。

“1+20”筑巢:从“引凤”到“育凤”的嬗变——访大北农集团副总裁宋维平博士

海淀区酝酿已久的20项政策近日出台。3月13日,国务院批复"同意支持中关村科技园区建设国家自主创新示范区"之后,4月1日,北京市政府批复"同意中关村科技园区海淀园作为中关村国家自主创新示范区核心区"。当天,海淀区整合打包出台了"1+20"配套政策。其中,16项措施是在4月1日当天出台的,"中关村速度"可见一斑。行动之快,力度之大,何以? 2008年4月14日,由科技部、财政部、国家税务总局联合颁布了《高新技术企业认定管理办法》,由于一下新规定"下水",居住在海淀园内的一些高科技企业有了"出走"的念头。"认定条件调整了,我们还有必要付出这么贵的地租吗?企业要考虑成本付出的。"这,不是一两个企业老总的想法,而是大多数。而海淀区政府要做的,是留住这些企业,保持区域的竞争力,进而帮助他们成长为有国际影响力的"巨头"。居安思危,海淀区政府的新政酝酿已久。用大北农集团副总裁宋维平博士的话说,之前的政府是在"筑巢引凤",现在的他们要学着"筑巢育凤"了。

第十届高士其科普奖颁奖 19名中小学生获奖

7月24日，第十届高士其科普奖在济南市举行的第24届全国青少年科技创新大赛上颁发。获奖的10名中学生中，5名荣获全国青少年科技发明奖、5名荣获全国青少年科技创新奖。

2008年度中国质量协会质量技术奖颁发 34项成果获奖 125项成果获优秀项目

4月22日，2008年全国质量技术奖励大会暨第六届全国六西格玛大会在西安市陕西宾馆举行。会议由中国质量协会、全国六西格玛管理推进工作委员会主办，中国航天科工集团公司协办，共有来自中国、美国、日本、韩国、香港特别行政区等国家和地区的近400名代表出席大会。

第八届中国土木工程詹天佑奖颁奖典礼举行

本刊3月26日讯（记者周春雪）第八届中国土木工程詹天佑奖颁奖大会今天在国家大剧院隆重举行。会上，共有31项工程摘得殊荣，260多家工程设计和建筑单位获得表彰。

基于IP Core的FIR数字滤波器的FPGA实现

介绍使用EDA工具及IP Core开发基于FPGA的FIR数字滤波器,采用去伪延迟控制器,截除因滤波器延迟产生的伪信号。使用FDATool工具设计FIR数字滤波器,利用现有的IP Core在FPGA器件上实现滤波器设计,借助ChipScope Pro工具验证实现结果。整个过程方便、快捷;去伪延迟控制器效果明显。